Identificação de genes diferencialmente expressos no endométrio de mulheres durante o ciclo menstrual

• Autor(a) principal: Otsuka, Audrey Yumi [UNIFESP]
• Data de Publicação: 2006
• Tipo de documento: Tese
• Idioma: por
• Título da fonte: Repositório Institucional da UNIFESP
• Texto Completo: http://repositorio.unifesp.br/handle/11600/21306
• topic: Endométrio; Ciclo menstrual; Imuno-histoquímica

As variações fisiológicas dos hormônios sexuais ao longo do ciclo menstrual promovem alterações histomorfológicas e funcionais no endométrio. Para melhor entender as variações de expressão genética responsáveis por tais eventos, motivamo-nos a avaliar as eventuais variações na expressão gênica nas fases proliferativa e secretora do ciclo menstrual. Para tanto, estudamos o endométrio normal de 24 pacientes submetidas à histerectomia por causas benignas. Retiraram-se fragmentos do endométrio para extração de RNA, os quais foram imediatamente acondicionados em gelo seco para futura utilização. As amostras foram submetidas a ensaios do tipo cDNA microarray em lâminas contendo 10.000 genes. A análise da expressão diferencial foi realizada pelo software SAM e os resultados confirmados, individualmente, por PCR em tempo real para RNA mensageiro, além de imunohistoquímica para a correta confirmação em nível protéico. Dos 10.000 genes estudados, obtivemos um total de 1127 genes diferencialmente expressos. Dentre estes, 364 genes estavam superexpressos na fase proliferativa e 763 genes tinham seu RNA mensageiro em maior quantidade na fase secretora. A fase secretora apresentou-se, do ponto de vista de variedade de expressão gênica, como uma fase marcadamente mais rica, em especial quando analisamos os genes envolvidos na resposta imune, e os genes que respondem aos hormônios tireoideanos, bem como aqueles envolvidos no metabolismo de cálcio.