Otimização e aplicação de testes rápidos para a detecção de Carbapenemases em bactérias gram-negativas

• Autor(a) principal: Silva, Ana Carolina Ramos Da [UNIFESP]
• Data de Publicação: 2019
• Tipo de documento: Tese
• Idioma: por
• Título da fonte: Repositório Institucional da UNIFESP
• Texto Completo: https://sucupira.capes.gov.br/sucupira/public/consultas/coleta/trabalhoConclusao/viewTrabalhoConclusao.jsf?popup=true&id_trabalho=7772922; https://repositorio.unifesp.br/handle/11600/59093
• topic: Gram-Negativo; Carbapenemases; Carbapenêmicos; K-SeT; MALDI-TOF MS; KPC; EasyQ; Gram Negative; Carbapenemases; Carbapenemics; K-SeT; MALDI-TOF MS; KPC; EasyQ

A resistência aos antimicrobianos tem se tornado um dos maiores problemas de saúde pública. Os carbapenêmicos caracterizam uma das últimas opções terapêuticas para o tratamento de bactérias gram-negativas multiressitentes (MDR), entretanto a frequência de isolamento de bactérias produtoras de carbapenemases, adicionado à co-produção de outros mecanismos de resistência tem aumentado signitivamente no Brasil e no mundo. A detecção rápida destes patógenos pode proporcionar um alto impacto na diminuição dos índices de mortalidade e morbidade, bem como na diminuição dos custos hospitalares. Sendo assim, o objetivo deste estudo foi otimizar e avaliar testes rápidos para a detecção de carbapenemases em bactérias gram-negativas. Em nosso primeiro estudo (artigo científico 1) avaliamos a influência de diferentes meios de cultura para a detecção da capacidade hidrolítica das carbapenemases pela técnica de MALDI TOF MS. Observamos que três isolados de A. baumanni produtores de OXA-25, OXA-26 e OXA-72 demonstraram resultados falso-negativos após crescimento no agar MacConkey, enquanto que todos os isolados avaliados após crescimento em CPS, Agar Sangue e Mueller-Hinton foram detectados em no máximo 4 horas de incubação. O nosso segundo estudo (artigo científico 2) avaliou o teste imunocromatográfico KPC K-SeT para a detecção de diferentes variantes de KPC, bem como a influência de diferentes meios de cultura. O teste demonstrou-se uma ferramenta rápida e sensível para a detecção de diferentes variantes de KPC no período máximo de 15 minutos. No entanto, o inóculo bacteriano de duas enterobactérias produtoras de KPC-6 e KPC-8 foi aumentado para possibilitar a detecção pelo KPC K-SeT. Além disso, o teste molecular EasyQ KPC foi avaliado para a detecção de blaKPC diretamente de swabs retais no qual resultou no artigo científico 3. O teste demonstrou uma sensibilidade de 100% e especificidade de 87,7%, contudo a detecção de blaKPC foi detectada diretamente do swab retal sem a necessidade prévia de incubação. E por fim, o nosso último estudo (artigo científico 4) que avaliou a capacidade da técnica de MALDI TOF MS para detectar a resistência à ceftazidima-avibactam em isolados produtores de carbapenemases. Este estudo demonstrou uma elevada concordância com o método molecular (97%) e com o teste de sensibilidade (94%). Nossos resultados demonstraram que a maioria das metodologias avaliadas demonstraram rapidez na liberação dos resultados e altos índices de sensibilidade e especificidade. Entretanto, a dinâmica de cada laboratório clínico deve ser levada em consideração para optar pelo teste fenotípico e/ou molecular que melhor de adapte às características específicas de cada centro hospitalar.