Validação de um painel de biomarcadores proteicos no plasma seminal de adolescentes com e sem varicocele

• Autor(a) principal: Belardin, Larissa Berloffa [UNIFESP]
• Data de Publicação: 2016
• Tipo de documento: Dissertação
• Idioma: por
• Título da fonte: Repositório Institucional da UNIFESP
• Texto Completo: https://sucupira.capes.gov.br/sucupira/public/consultas/coleta/trabalhoConclusao/viewTrabalhoConclusao.jsf?popup=true&id_trabalho=3613154; https://repositorio.unifesp.br/handle/11600/46162
• topic: Adolescente; Proteínas de plasma seminal; Proteômica; Testículo; Varicocele; Adolescent; Seminal plasma proteins; Proteomics; Testis; Varicocele

Objetivo: Verificar o nível de expressão de proteínas com potencial biomarcador para alteração testicular na varicocele em adolescentes. Os objetivos específicos foram verificar se a presença de varicocele e de alteração seminal trazem alterações nos níveis das seguintes proteínas: Cab45 (45 kDa calcium-binding protein); LEFTY1 (Left-right determination factor 1); DNase I (Deoxyribonuclease-1); PAP2-Alpha (Lipid phosphate phosphohydrolase 1); IFGBP7 (Insulin-like growth factor-binding protein 7); IGHG3 (Ig gamma-3 chain C region); CRISP-3 (Cysteine-rich secretory protein 3). Método: Este estudo observacional foi constituído por 61 adolescentes, com idade entre 15 e 17 anos e, maturidade sexual completa (Tanner V), que foram divididos em 3 grupos: Controle (sem varicocele, n=20); VSN (com varicocele e sêmen normal, n=22); e VSA (com varicocele e sêmen alterado, n=19). Os adolescentes coletaram 1 amostra seminal com 2 a 5 dias de abstinência ejaculatória. Após a liquefação, as amostras foram submetidas à centrifugação para que o plasma seminal fosse separado dos demais constituintes celulares e, então, após a quantificação total de proteínas, um volume correspondente a 50 µg de proteína por adolescente foi utilizado para a quantificação das seguintes proteínas Cab 45, LEFTY1, DNase I, PAP2-Alpha, IGFBP7, IGHG3 e CRISP-3 (todas foram normalizadas para a proteína Epididymis Secretory Sperm Binding Protein Li 67p [DJ-1]), pelo método de Western blotting. Resultados: Os indivíduos pertencentes ao grupo VSA apresentaram menor média de concentração de espermatozoides (milhões/mL) e células morfologicamente normais (% normais) com relação aos demais grupos experimentais. Observou-se diminuição nos níveis da proteína Cab45 em ambos os grupos de adolescentes com varicocele (VSN e VSA), sendo que o grupo VSA apresentou menor média. Os níveis da proteína DNase I estavam menores no grupo de adolescentes com varicocele e sêmen alterado (VSA). Observou-se uma hiperexpressão da proteína IGFBP7 nos grupos com varicocele quando comparados ao grupo controle e, uma hiperexpressão das duas isoformas da proteína CRISP-3 no grupo VSA. Conclusão: A proteômica do plasma seminal reflete alterações nas funções testiculares na varicocele em adolescentes. Os níveis das proteínas LEFTY1, PAP2-Alpha, IGHG3 não estão alterados com a presença de varicocele. Os níveis de Cab45 estão diminuídos na presença de varicocele; os níveis de DNase I estão diminuídos na presença de alterações seminais e varicocele. Por um lado, a proteína IFGBP7 é um marcador positivo para varicocele, e a CRISP-3 é um marcador positivo para variococele e qualidade seminal alterada. Esses resultados podem futuramente ajudar na determinação da conduta médica para uma intervenção cirúrgica precoce na varicocele.