Análise proteômica diferencial na carcinogênese gástrica

• Autor(a) principal: Leal, Mariana Ferreira [UNIFESP]
• Data de Publicação: 2011
• Tipo de documento: Tese
• Idioma: por
• Título da fonte: Repositório Institucional da UNIFESP
• Texto Completo: http://repositorio.unifesp.br/handle/11600/8941
• topic: Expressão gênica; Proteínas; Proteômica; RNA mensageiro; Neoplasias gástricas

O câncer gástrico é o quarto tipo de tumor mais comum e a segunda maior causa de morte por câncer no mundo. No Estado do Pará, essa neoplasia é um grave problema de saúde pública, pois é diagnosticada em estágios avançados, com taxas de sobrevida extremamente baixas. Esses fatos reforçam a gravidade dessa patologia e a necessidade de novos estudos que possam modificar esse panorama. Objetivos: 1) Comparar o perfil de expressão proteica de amostras de adenocarcinoma gástrico e dos correspondentes não neoplásicos. 2) Identificar proteínas com expressão desregulada e das principais vias metabólicas e de interação envolvidas na carcinogênese gástrica. 3) Avaliar a expressão proteica e do RNAm de ENOA/ENO1, HSPB1, NPM1 e 14-3-3ɛ/YWHAE em amostras de tecido gástrico neoplásico e não neoplásico e associá-la às características clínico-patológicas de adenocarcinomas gástricos. Métodos: o perfil de expressão proteica foi avaliado por gel em eletroforese bidimensional seguido por espectrometria de massa utilizando-se 15 pares de tecido gástrico neoplásico e não neoplásico de indivíduos do Estado do Pará. Para selecionar as proteínas diferencialmente expressas, foram realizados testes paramétricos com reamostragem. Após a identificação das proteínas, foi realizada análise de cluster e as proteínas foram classificadas quanto à localização celular, aos processos biológicos, à função molecular e à localização do gene relacionado. Foram realizadas análises de bioinformática para avaliar as principais vias canônicas e de interação física e/ou funcional envolvidas na carcinogênese gástrica. A expressão de ENOA/ENO1, HSPB1, NPM1 e 14-3-3ɛ/YWHAE foi avaliada por PCR quantitativa em tempo real e por western Blot. Resultados: foram identificadas 111 proteínas associadas à carcinogênese gástrica. A análise de cluster demonstrou a presença de dois grupos principais: um composto por amostra de tecido gástrico não neoplásico e outro com amostras neoplásicas e duas amostras de não neoplásico. As principais vias canônicas envolvidas na carcinogênese gástrica estavam relacionadas ao metabolismo energético. Pela análise de proteômica, foram identificados dois spots de ENOA com expressão elevada em tecido gástrico tumoral em relação ao tecido não neoplásico. A média da expressão de ENOA por western blot foi significantemente reduzida em neoplasias gástricas. A redução da expressão de ENOA foi relacionada à menor invasão tecidual (T1/T2). Pela análise de proteômica, foi identificado um spot de HSPB1 com expressão elevada em câncer gástrico. Por western blot, a expressão de HSPB1 não diferiu entre tecido gástrico neoplásico e não neoplásico. A expressão de NPM1 e de 14-3-3e foi significantemente reduzida em tumores gástricos em relação aos correspondentes não neoplásicos. A expressão reduzida de NPM1 foi associada a um pior prognóstico. A expressão reduzida de 14-3-3e foi associada ao tipo difuso e a tumores de acometimento precoce. Conclusões: O presente estudo relata a expressão diferencial de diversas proteínas que poderão contribuir para a melhor compreensão da carcinogênese gástrica, em especial de indivíduos do Estado do Pará. NPM1 e 14-3-3 e atuam como proteínas supressoras de tumores na carcinogênese gástrica. As proteínas identificadas neste estudo poderão ser utilizadas como biomarcadores de diagnóstico e/ou prognóstico, além de serem possíveis alvos terapêuticos.