Desenvolvimento e Validação de Um Método Imunofluorométrico Para a Pesquisa de Anticorpos Antiperoxidase Tiroidiana no Soro
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Data de Publicação: | 2002 |
Outros Autores: | , |
Tipo de documento: | Artigo |
Idioma: | por |
Título da fonte: | Repositório Institucional da UNIFESP |
Texto Completo: | http://dx.doi.org/10.1590/S0004-27302002000200009 http://repositorio.unifesp.br/handle/11600/1402 |
Resumo: | We developed an assay in which highly purified human TPO is adsorbed to microtiter plate wells; after incubation with the study serum samples, presence of specific antibodies is revealed by a monoclonal europium-labeled antibody against human IgG. The sensitivity of the test is 0.6U/mL, and the reproducibility quite acceptable. We analyzed serum samples from: 188 normal subjects of both sexes, 74 of whom >65 years of age; 54 patients with Graves' disease (GD) and 13 with Hashimoto thyroiditis (HT). Based on 97 routine samples, the method was compared to a commercial RIA, and a high concordance was found, with a kappa index of 0.959. The definition of a cut-off value for the presence of anti-TPO antibodies was based on a ROC curve and was set at 10U/mL. Positive anti-TPO values were found in 9.6% of the normal subjects up to 64 years of age, and in 16.5% of those >65 years. Patients with GD presented 85.2% of positivity, and those with HT showed 100% positivity. Thus, we described a sensitive and specific easy to perform assay, for detection of autoantibodies against thyroid peroxidase in patients with thyroid autoimmune diseases. |
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Desenvolvimento e Validação de Um Método Imunofluorométrico Para a Pesquisa de Anticorpos Antiperoxidase Tiroidiana no SoroDevelopment and Validation of an Immunofluorometric Assay for Serum Thyroid Anti-Peroxydase AntibodiesAnti-thyroid antibodiesAnti-thyroperoxidase antibodiesAnti-thyroglobulin antibodiesAutoimune thyroid diseasesAnticorpos antitiroidianosAnticorpos antiperoxidase tiroidianaAnticorpos antitiroglobulinaDoenças auto-imunes da tiróideWe developed an assay in which highly purified human TPO is adsorbed to microtiter plate wells; after incubation with the study serum samples, presence of specific antibodies is revealed by a monoclonal europium-labeled antibody against human IgG. The sensitivity of the test is 0.6U/mL, and the reproducibility quite acceptable. We analyzed serum samples from: 188 normal subjects of both sexes, 74 of whom >65 years of age; 54 patients with Graves' disease (GD) and 13 with Hashimoto thyroiditis (HT). Based on 97 routine samples, the method was compared to a commercial RIA, and a high concordance was found, with a kappa index of 0.959. The definition of a cut-off value for the presence of anti-TPO antibodies was based on a ROC curve and was set at 10U/mL. Positive anti-TPO values were found in 9.6% of the normal subjects up to 64 years of age, and in 16.5% of those >65 years. Patients with GD presented 85.2% of positivity, and those with HT showed 100% positivity. Thus, we described a sensitive and specific easy to perform assay, for detection of autoantibodies against thyroid peroxidase in patients with thyroid autoimmune diseases.Desenvolvemos um ensaio onde TPO altamente purificada, obtida a partir de tecido humano, é adsorvida em poços de placas de microtitulação; após incubação com os soros a serem estudados, a revelação da presença de anticorpos específicos é feita com o emprego de anticorpo monoclonal anti-IgG humana marcado com európio. A sensibilidade do teste é da ordem de 0,6U/mL, e as características de reprodutibilidade bastante aceitáveis. Foram analisadas amostras de soro de 188 indivíduos normais de ambos os sexos (74 com >65 anos), de 54 pacientes com doença de Graves (DG) e de 13 com tiroidite de Hashimoto (TH). O método foi comparado, com base em 97 amostras, com um RIE comercial, encontrando-se alta concordância com índice kappa de 0,959. O estudo do valor de corte para definir a presença de anticorpos anti-TPO em níveis significativos baseou-se na curva ROC, e foi fixado em 10U/mL. A freqüência de anti-TPO positivo na população normal foi de 9,6% em indivíduos até 64 anos e de 16,5% nos com >65 anos; nos pacientes com DG 85,2% apresentaram anti-TPO positivo, sendo 100% nos pacientes com TH. O ensaio descrito mostrou-se sensível e específico e de fácil execução para a detecção de autoanticorpos contra a peroxidase tiroidiana presentes na maioria dos indivíduos com doença auto-imune tiroidiana.Universidade Federal de São Paulo (UNIFESP) Escola Paulista de Medicina Laboratório de HormôniosUNIFESP, EPM, Laboratório de HormôniosSciELOSociedade Brasileira de Endocrinologia e MetabologiaUniversidade Federal de São Paulo (UNIFESP)Kasamatsu, Teresa S. [UNIFESP]Maciel, Rui Monteiro de Barros [UNIFESP]Vieira, José Gilberto H. [UNIFESP]2015-06-14T13:29:39Z2015-06-14T13:29:39Z2002-04-01info:eu-repo/semantics/articleinfo:eu-repo/semantics/publishedVersion167-172application/pdfhttp://dx.doi.org/10.1590/S0004-27302002000200009Arquivos Brasileiros de Endocrinologia & Metabologia. Sociedade Brasileira de Endocrinologia e Metabologia, v. 46, n. 2, p. 167-172, 2002.10.1590/S0004-27302002000200009S0004-27302002000200009.pdf0004-2730S0004-27302002000200009http://repositorio.unifesp.br/handle/11600/1402porArquivos Brasileiros de Endocrinologia & Metabologiainfo:eu-repo/semantics/openAccessreponame:Repositório Institucional da UNIFESPinstname:Universidade Federal de São Paulo (UNIFESP)instacron:UNIFESP2024-07-29T09:32:07Zoai:repositorio.unifesp.br/:11600/1402Repositório InstitucionalPUBhttp://www.repositorio.unifesp.br/oai/requestbiblioteca.csp@unifesp.bropendoar:34652024-07-29T09:32:07Repositório Institucional da UNIFESP - Universidade Federal de São Paulo (UNIFESP)false |
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