Caracterização da proteína parkina em espermatozoides murinos e sua influência no desenvolvimento embrionário

• Autor(a) principal: Melo, Karla Pacheco de [UNIFESP]
• Data de Publicação: 2022
• Tipo de documento: Dissertação
• Idioma: por
• Título da fonte: Repositório Institucional da UNIFESP
• Texto Completo: https://repositorio.unifesp.br/xmlui/handle/11600/63993
• topic: Fertilização in vitro; Mitocôndrias; Desenvolvimento embrionário; Espermatozoide; Mitofagia

Objetivo: Avaliar o papel da proteína Parkina na distribuição das mitocôndrias paternas após a fertilização in vitro. Métodos: Foram utilizados camundongos C57BL / 6 normais e nocaute para PARK2 para promover deleção da proteína Parkina. Dos machos foram coletados espermatozoides para a avaliação da função espermática (concentração, motilidade, fragmentação do DNA dos espermatozoides e atividade mitocondrial), e análise da ubiquitinação e presença de Parkina, além da coleta de espermatozoides para a fertilização in vitro. As fêmeas foram estimuladas com hormônios para a indução da ovulação e delas foram coletados os oócitos para a fertilização in vitro. Com a fertilização pretendeu-se avaliar a presença das mitocôndrias paternas nos embriões e se a ausência de Parkina gera déficit na degradação de mitocôndrias paternas pela via de degradação proposta. Resultados: Não foram observadas diferenças significativas quanto aos parâmetros seminais e funcionais dos espermatozoides em ambos os grupos (p>0,05). Identificamos a proteína Ubiquitina na peça intermediária e região acrossomal dos espermatozoides e a proteína Parkina em toda a extensão desta célula. Observou-se diminuição na intensidade de marcação das proteínas Ubiquitina e Parkina nos espermatozoides de machos nocaute (p<0,05). Quanto à segregação mitocondrial, observamos que ela é dependente do tempo após a fertilização e sofre efeito da mutação no gene da PARK2, onde a união dos gametas entre uma fêmea nocaute e um animal controle demonstrou maior déficit na degradação mitocondrial. Conclusões: A proteína Parkina está presente em todo o espermatozoide e a diminuição da sua expressão no oócito impacta negativamente a fertilização e a eliminação de mitocôndrias paternas no zigoto após a fertilização in vitro.