Comparação entre a microbiota fecal de crianças e adolescentes com diabetes mellitus do tipo 1 com seus irmãos e indivíduos saudáveis

• Autor(a) principal: Araujo Filho, Humberto Bezerra De [UNIFESP]
• Data de Publicação: 2018
• Tipo de documento: Tese
• Idioma: por
• Título da fonte: Repositório Institucional da UNIFESP
• Texto Completo: https://sucupira.capes.gov.br/sucupira/public/consultas/coleta/trabalhoConclusao/viewTrabalhoConclusao.jsf?popup=true&id_trabalho=6642334; https://repositorio.unifesp.br/handle/11600/52453
• topic: Diabete mellitus tipo 1; Criança; Adolescente; Microbioma gatrintestinal; Metagenômica; Reação em cadeias de polimerase em tempo real; Type 1 diabetes mellitus; Child; Adolescent; Gastrointestinal microbiome metagenomics; Real time polimerase chain reaction

A microbiota intestinal humana possui grande diversidade de microrganismos, desempenhando papel importante no metabolismo. Apesar dos aspectos positivos, a microbiota intestinal está associada com o desenvolvimento de várias doenças, tais como doença inflamatória intestinal, doença celíaca, doenças alérgicas, e diabetes. O diabetes mellitus do tipo 1 (DM1) é uma doença autoimune crônica, caracterizada pelo aumento dos níveis glicêmicos no sangue devido à uma deficiência na produção de insulina, como consequência da destruição das células β do pâncreas. A patofisiologia da DM1 ainda não está completamente esclarecida, no entanto, apenas os fatores genéticos não são suficientes para determinar o risco de desenvolvimento da doença. A participação da microbiota intestinal como um dos fatores desencadeantes de DM1 foi avaliada em estudos com animais e com seres humanos, sendo encontradas fortes evidências de uma microbiota promotora do desenvolvimento da doença. Este estudo tem como objetivo comparar a microbiota fecal entre crianças e adolescentes com DM1, seus irmãos e crianças saudáveis sem parentesco com os diabéticos. Foram coletadas amostras de fezes de 13 crianças e adolescentes com DM1, 9 irmãos desses pacientes e 21 crianças saudáveis sem grau de parentesco com os pacientes. O DNA extraído das fezes foi submetido à amplificação por PCR do gene 16S rRNA e submetido à sequenciamento de nova geração. Além disso, foi realizado PCR em tempo real para quantificação de bactérias representativas da microbiota fecal. As sequencias de DNA foram analisadas no software livre QIIME, e os dados obtidos foram analisados quanto à alfa e beta diversidade. Os índices de alfa diversidade não apresentaram diferenças estatísticas entre os grupos, no entanto foi possível observar diferenças estatísticas significantes quanto à abundância relativa do Filo Firmicutes e do gênero Prevotella, entre os pacientes com DM1 e o grupo saudável sem parentesco. O PCR em tempo real mostrou que os pacientes com DM1 possuem maiores concentrações dos Filos Bacteroidetes e Firmicutes e das espécies Escherichia coli e Methanobrevibacter smithii, em relação ao grupo saudável sem parentesco. Concluise que há diferenças entre a composição da microbiota fecal de pacientes com DM1 e indivíduos saudáveis sem grau de parentesco, há ausência de diferenças significativas na microbiota entre indivíduos com alto grau de parentesco e os fatores ambientais desempenham papel importante na composição da microbiota intestinal.