Bioanalytical studies of porphyric disorders using HPLC with fluorescence detection
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Data de Publicação: | 2014 |
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Tipo de documento: | Artigo |
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Título da fonte: | Repositório Institucional da UNIFESP |
Texto Completo: | http://repositorio.unifesp.br/handle/11600/8616 http://dx.doi.org/10.5935/0103-5053.20140230 |
Resumo: | Neste artigo, desenvolvemos, validamos e aplicamos um método para separação e quantificação de porfirinas precursoras do grupo heme na urina de portadores de porfirias. Os isômeros coproporfirinogenio I e III (COPRO I e III), uroporfirinogenio I (URO I), heptacarboxilporfirinogenio I (HEPTA I), pentacarboxilporfirinogenio I (PENTA I) e hexacarboxilporfirinogenio (HEXA I) foram determinados em amostras coletadas de 24 pacientes de porfiria aguda intermitente e de porfiria cutânea tarda. Utilizou-se cromatografia líquida de alta eficiência (HPLC) e detector de fluorescência. As concentrações de porfirinas foram determinadas com precisão inter e intra-dias (< 5%) e exatidão dentro da faixa 95-99%. Os limites de detecção e quantificação das porfirinas, expressos em nmol L-1, foram os seguintes: URO I, 0,62 e 2,05; HEPTA I, 0,59 e 1,96; HEXA I, 0,54 e 1,81; PENTA I, 0,52 e 1,73; COPRO I, 2,03 e 6,77; e COPRO III, 0,43 e 1,44. O método descrito aqui obedece a parâmetros analíticos satisfatórios, com excelente relação custo-benefício, e foi aplicado a amostras de urina de portadores assintomáticos e pacientes de porfirias. Este método foi validado analiticamente e mostrou potencial para diagnóstico de portadores de diferentes tipos de porfirias, imediatamente antes ou durante crises, e até mesmo para monitorar um tratamento farmacológico. |
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Cypriani, Michele Gotelipe de Souza Corrêa [UNIFESP]Alves, Atecla Nunciata Lopes [UNIFESP]Bechara, Etelvino José Henriques [UNIFESP]Assunção, Nilson Antonio [UNIFESP]Universidade Federal de São Paulo (UNIFESP)Universidade de São Paulo (USP)2015-06-14T13:47:19Z2015-06-14T13:47:19Z2014-10-01Journal of the Brazilian Chemical Society. Sociedade Brasileira de Química, v. 25, n. 10, p. 1918-1926, 2014.0103-50531678-4790http://repositorio.unifesp.br/handle/11600/8616http://dx.doi.org/10.5935/0103-5053.20140230S0103-50532014001000018.pdfS0103-5053201400100001810.5935/0103-5053.20140230WOS:000344490900018Neste artigo, desenvolvemos, validamos e aplicamos um método para separação e quantificação de porfirinas precursoras do grupo heme na urina de portadores de porfirias. Os isômeros coproporfirinogenio I e III (COPRO I e III), uroporfirinogenio I (URO I), heptacarboxilporfirinogenio I (HEPTA I), pentacarboxilporfirinogenio I (PENTA I) e hexacarboxilporfirinogenio (HEXA I) foram determinados em amostras coletadas de 24 pacientes de porfiria aguda intermitente e de porfiria cutânea tarda. Utilizou-se cromatografia líquida de alta eficiência (HPLC) e detector de fluorescência. As concentrações de porfirinas foram determinadas com precisão inter e intra-dias (< 5%) e exatidão dentro da faixa 95-99%. Os limites de detecção e quantificação das porfirinas, expressos em nmol L-1, foram os seguintes: URO I, 0,62 e 2,05; HEPTA I, 0,59 e 1,96; HEXA I, 0,54 e 1,81; PENTA I, 0,52 e 1,73; COPRO I, 2,03 e 6,77; e COPRO III, 0,43 e 1,44. O método descrito aqui obedece a parâmetros analíticos satisfatórios, com excelente relação custo-benefício, e foi aplicado a amostras de urina de portadores assintomáticos e pacientes de porfirias. Este método foi validado analiticamente e mostrou potencial para diagnóstico de portadores de diferentes tipos de porfirias, imediatamente antes ou durante crises, e até mesmo para monitorar um tratamento farmacológico.We describe here the development, validation, quantification and application of a method for determination of heme porphyrin precursors in the urine of porphyric patients. The isomers coproporphyrinogen I and III (COPRO I and III), uroporphyrinogen I (URO I), heptacarboxylporphyrinogen I (HEPTA I), pentacarboxylporphyrinogen (PENTA I), and hexacarboxylporphyrinogen I (HEXA I) were analyzed. These six urinary heme precursors were determined in urine samples collected from 24 patients by high-performance liquid chromatography (HPLC) equipped with a fluorescence detector. The inter- and intra-day precision (coefficient of variation < 5%) and accuracy (95-99%) were evaluated. The limits of detection and of quantification of the porphyrins, expressed in nmol L-1, were as follows: URO I, 0.62 and 2.05; HEPTA I, 0.59 and 1.96; HEXA I, 0.54 and 1.81; PENTA I, 0.52 and 1.73; COPRO I, 2.03 and 6.77; and COPRO III, 0.43 and 1.44. The method described here satisfactorily results in an acceptable cost-benefit ratio, precision and speed for determining the concentrations of heme precursors in the urine of latent or symptomatic acute intermittent porphyria individuals or porphyria cutanea tarda carriers. Since it was analytically validated, this method may be used for accurate and reliable diagnostic reports to follow-up the onset of acute crisis in porphyria carriers to adopt preventive pharmacological treatment.Conselho Nacional de Desenvolvimento Científico e Tecnológico (CNPq)INCT Redoxoma Redox Processes in BiomedicineFundação de Amparo à Pesquisa do Estado de São Paulo (FAPESP)Universidade Federal de São Paulo (UNIFESP) Instituto de Ciências Ambientais, Químicas e Farmacêuticas Departamento de Ciências Exatas e da TerraUniversidade de São Paulo Instituto de Química Departamento de Química FundamentalUNIFESP, Instituto de Ciências Ambientais, Químicas e Farmacêuticas Depto. de Ciências Exatas e da Terra2006/60245-3 e 2006/56530-4SciELO1918-1926engSociedade Brasileira de QuímicaJournal of the Brazilian Chemical Societyporphyrinsheme biosynthesisacute intermittent porphyriaporphyria cutanea tardaporphyria diagnosisHPLC analysis of porphyrinogensBioanalytical studies of porphyric disorders using HPLC with fluorescence detectioninfo:eu-repo/semantics/publishedVersioninfo:eu-repo/semantics/articleinfo:eu-repo/semantics/openAccessreponame:Repositório Institucional da UNIFESPinstname:Universidade Federal de São Paulo (UNIFESP)instacron:UNIFESPORIGINALS0103-50532014001000018.pdfapplication/pdf333010${dspace.ui.url}/bitstream/11600/8616/1/S0103-50532014001000018.pdf12f722965ca966a55c22870e0581da78MD51open accessTEXTS0103-50532014001000018.pdf.txtS0103-50532014001000018.pdf.txtExtracted texttext/plain39797${dspace.ui.url}/bitstream/11600/8616/9/S0103-50532014001000018.pdf.txt765276b6a622c662f03d388312de1bddMD59open accessTHUMBNAILS0103-50532014001000018.pdf.jpgS0103-50532014001000018.pdf.jpgIM Thumbnailimage/jpeg5593${dspace.ui.url}/bitstream/11600/8616/11/S0103-50532014001000018.pdf.jpg058dbfd35210e793fffd81715e905f84MD511open access11600/86162023-06-05 19:29:23.135open accessoai:repositorio.unifesp.br:11600/8616Repositório InstitucionalPUBhttp://www.repositorio.unifesp.br/oai/requestopendoar:34652023-06-05T22:29:23Repositório Institucional da UNIFESP - Universidade Federal de São Paulo (UNIFESP)false |
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