Avaliação do perfil de expressão de microRNAs como marcador da presença de células tumorais nos linfonodos de pacientes com carcinoma epidermóide de cavidade oral

• Autor(a) principal: Zamunér, Fernando Tadeu [UNIFESP]
• Data de Publicação: 2016
• Tipo de documento: Tese
• Idioma: por
• Título da fonte: Repositório Institucional da UNIFESP
• Texto Completo: https://sucupira.capes.gov.br/sucupira/public/consultas/coleta/trabalhoConclusao/viewTrabalhoConclusao.jsf?popup=true&id_trabalho=3883130; http://repositorio.unifesp.br/handle/11600/48224
• topic: Carcinoma de cabeça e pescoço; Cavidade oral; Micrornas; Metástases cervicais

Introdução: O carcinoma epidermóide de cabeça e pescoço (CECP) é uma neoplasia maligna que apresenta altas taxas de incidência e mortalidade. Apesar das inúmeras estratégias de tratamento utilizadas para o CECP, a taxa de sobrevida global em 5 anos encontra-se próxima a 50%, sendo que, o desenvolvimento de recorrências loco-regionais é a principal razão para a falha no tratamento. A presença ou ausência de doença metastática nos linfonodos cervicais é um fator determinante para a escolha da estratégia terapêutica utilizadas no tratamento e para o prognóstico dos pacientes. Dessa forma, a identificação de marcadores moleculares capazes de selecionar pacientes que apresentem risco elevado para a presença de metástases linfonodais e para recorrência pode ser de grande valia. Estudos recentes têm mostrado que microRNAs podem ser reguladores do processo de metástase tumoral por atuarem em várias vias de sinalização envolvidas com este processo sendo extremamente úteis no diagnóstico, determinação do prognóstico da doença e na previsão da resposta terapêutica. Objetivos: Identificar microRNAs diferencialmente expressos em CE de cavidade oral (língua e assoalho bucal) associados a presença de metástases linfonodais, integrar com os resultados de análise de expressão gênica global (mRNA) visando identificar possíveis alvos destes microRNAs e entender o papel do melhor marcador selecionado nos processos de tumorigênese em CECP. Métodos: Amostras tumorais foram obtidas de pacientes com diagnóstico de CECP do Departamento de Cirurgia Pescoço do Hospital do Câncer de Barretos e do ACCamargo Cancer Center. Foram realizados experimentos de microarrays de microRNAs e de mRNA. A avaliação dos microRNAs diferencialmente expressos foi realizada através de RT-PCR. A partir da seleção do melhor marcador, ensaios funcionais foram realizados para avaliar o impacto de sua superexpressão em linhagem celular de CECP. Resultados: Comparamos a expressão de 866 sequências de microRNAs entre tumores metastáticos e não-metastáticos de 24 pacientes com CECP. Após diversos. passos de seleção, 11 microRNAs foram escolhidos para serem examinados em um grupo independente e somente um deles, o miR-497-5p mostrou elevados níveis de especificidade e de sensibilidade nas diversas análises realizadas, sendo específico para aqueles com câncer de língua. A seleção de genes possivelmente regulados pelo miR-497, através das análises de microarray de mRNA, revelou seis genes dentre os hipoexpressos: IGF1, WNT5B, PTGS2, VEGFA, ALOX12 e OTX1, e quatro dentre os hiperexpressos VEGFA, ALOX12, BAIAP2 e CXCL 10, que tem relação aos processos de migração, invasão, metástase e ao tumor de cabeça e pescoço (CECP). Os ensaios funcionais demostram que quando o miR-497 está superexpresso, há redução das taxas apoptose e ocorrem aumento na viabilidade celular, na migração celular e invasão in vitro, podendo contribuir para o processo de metastização destes tumores. Conclusões: Nosso trabalho sugere que o microRNA identificado, miR-497, possa servir como marcador da presença de células tumorais em pacientes com câncer de cavidade oral, sendo específico para aqueles com câncer de língua, tendo papel oncogênico em linhagem de CECP. xx