O Mapeamento do padrão de expressão de c-Fos e definição de seu período refratário no cérebro de ratos e macacos (Callithrix jacchus) após estimulação com pentilenotetrazol (PTZ)

• Autor(a) principal: Barros, Vanessa Novaes [UNIFESP]
• Data de Publicação: 2014
• Tipo de documento: Dissertação
• Idioma: por
• Título da fonte: Repositório Institucional da UNIFESP
• Texto Completo: http://repositorio.unifesp.br/handle/11600/23138
• topic: Animais; Expressão Gênica; Epilepsia; Pentilenotetrazol; Animais

Introdução: Quando um neuronio e ativado de forma intensa, desencadeia-se o aparecimento de genes de expressao imediata, dentre eles o c-fos. Este gene codifica uma proteina nuclear c-Fos, relacionada a diversas cascatas de sinais envolvidos em importantes processos bioquimicos como plasticidade neuronal, crescimento celular e mitose. Objetivos: Neste trabalho investigamos o padrao de expressao e do periodo refratario de c-Fos no cerebro de ratos e macacos apos estimulacao com pentilenotetrazol. Materiais e metodos: Foram utilizados 40 ratos (Wistar) e 40 macacos (Callithrix jacchus) sacrificados em diferentes tempos apos crise convulsiva. Os grupos para o mapeamento do padrao de expressao de c-Fos foram: grupo controle (animais sem crise); grupo PTZ 0,5h; 1, 2, 3, 6, 9 e 12h. Ja os grupos para o mapeamento do periodo refratario de c-Fos foram: PTZ1h/1h, PTZ3h/1h e PTZ6h/1h em ratos e PTZ6h/3h, PTZ 9h/3h e PTZ12h/3h nos macacos onde a primeira hora corresponde ao momento da aplicacao da 2ª dose de PTZ (apos a 1ª crise), e a 2ª hora correspondendo ao momento em que os animais foram sacrificados apos a 2ª crise. Foi feita analise do gene e proteina c-fos por meio do PCR em tempo real e imunohistoquimica no cortex motor, piriforme e cingulado. Resultados: Tantos ratos quanto macacos apresentaram inicio de expressao de c-Fos em 0,5h apos crise. No entanto, o padrao de expressao proteica entre esses animais foram distintos: em ratos, o pico de expressao se deu entre 1h e 2h apos a crise, retornando aos niveis basais apos 6h em todas as regioes. Nos macacos o pico de expressao foi de 1h a 3h apos a crise e retorno aos niveis basais de 9 a 12h. Em relacao ao mapeamento do periodo refratario de c-Fos, observamos: nos ratos um periodo refratario de expressao proteica com duracao de ate 6h, enquanto que os macacos exibem refratariedade em ate 12h apos o primeiro estimulo. Porem, nao houve diferenca de expressao genica de c-fos entre esses grupos, demonstrando um controle pos-transcricional do mecanismo de inducao da refratariedade.Conclusao: A diferenca do padrao de expressao da proteina nos roedores e primatas demonstra um aspecto funcional da bioquimica cerebral diferenciada entre as especies que pode nos ajudar a entender a maior complexidade cognitiva dos primatas em relacao aos roedores em vista da ampla relacao de c-Fos com tarefas cognitivas e de aprendizagem