Ciclofilinas na biologia do Paracoccidioides brasiliensis: estudos in vitro e in silico.
Autor(a) principal: | |
---|---|
Data de Publicação: | 2022 |
Tipo de documento: | Dissertação |
Idioma: | por |
Título da fonte: | Repositório Institucional da UNIFESP |
Texto Completo: | https://repositorio.unifesp.br/11600/66143 |
Resumo: | Objetivo: O objetivo principal deste trabalho foi elucidar as possíveis funções das ciclofilinas na biologia do Paracoccidioides brasiliensis através de experimentos in vitro e in silico. Métodos: Os métodos in vitro foram realizados em três experimentos em duplicata de culturas de células de leveduras de P. brasiliensis com três grupos (CTR, CsA e Debio) a 37°C. Foram realizados experimentos de Perfil de crescimento celular utilizando a densidade óptica ao longo dos dias de cultura, experimentos de análise de estabilidade farmacológica e coloração dos corpúsculos lipídicos. Os experimentos de transição morfológica também seguiram os grupos descritos acima, porém a temperatura de cultura foi de 25°C para 37°C após a divisão dos grupos de estudo. Foram realizadas análises das fases de transição morfológica e também a coloração com oil red O. O trabalho com análise de bancos de dados abertos foi realizada utilizando a ferramenta blastx, blastp do NCBI e a ferramenta Align do site uniprot.org. Resultados: As leveduras tratadas com CsA apresentaram crescimento significativamente inferior que o grupo CTR, enquanto o grupo Debio apresentou diferença sutil no crescimento quando comparado ao grupo CTR. A estabilidade farmacológica da CsA é alta mesmo em pouco tempo de exposição ao fármaco. A transição M-L foi afetada no grupo tratado com CsA, enquanto o grupo Debio apresentou resultados próximos ao CTR. A busca pelas ciclofilinas do gênero Paracoccidioides encontrou 10 ciclofilinas por isolado/espécie. Conclusão: A inibição da calcineurina e ciclofilinas pela CsA apresenta respostas biológicas mais expressivas ao P. brasiliensis, o que sugere um papel mais relevante da calcineurina no crescimento celular, manutenção dos CL e transição morfológica. Os fungos do gênero Paracoccidioides apresentam dez ciclofilinas homólogas entre si e possuem organização gênica idêntica, porém com regulação da expressão diferente. |
id |
UFSP_faa80509760af116cc2c76d8e00b907a |
---|---|
oai_identifier_str |
oai:repositorio.unifesp.br:11600/66143 |
network_acronym_str |
UFSP |
network_name_str |
Repositório Institucional da UNIFESP |
repository_id_str |
3465 |
spelling |
Dias, Natália Aparecida Vasconcelos [UNIFESP]http://lattes.cnpq.br/0466319851464131http://lattes.cnpq.br/8867737169235839Campos, Claudia Barbosa Ladeira de [UNIFESP]São José dos Campos, SP2022-12-19T19:00:03Z2022-12-19T19:00:03Z2022-11-09https://repositorio.unifesp.br/11600/66143Objetivo: O objetivo principal deste trabalho foi elucidar as possíveis funções das ciclofilinas na biologia do Paracoccidioides brasiliensis através de experimentos in vitro e in silico. Métodos: Os métodos in vitro foram realizados em três experimentos em duplicata de culturas de células de leveduras de P. brasiliensis com três grupos (CTR, CsA e Debio) a 37°C. Foram realizados experimentos de Perfil de crescimento celular utilizando a densidade óptica ao longo dos dias de cultura, experimentos de análise de estabilidade farmacológica e coloração dos corpúsculos lipídicos. Os experimentos de transição morfológica também seguiram os grupos descritos acima, porém a temperatura de cultura foi de 25°C para 37°C após a divisão dos grupos de estudo. Foram realizadas análises das fases de transição morfológica e também a coloração com oil red O. O trabalho com análise de bancos de dados abertos foi realizada utilizando a ferramenta blastx, blastp do NCBI e a ferramenta Align do site uniprot.org. Resultados: As leveduras tratadas com CsA apresentaram crescimento significativamente inferior que o grupo CTR, enquanto o grupo Debio apresentou diferença sutil no crescimento quando comparado ao grupo CTR. A estabilidade farmacológica da CsA é alta mesmo em pouco tempo de exposição ao fármaco. A transição M-L foi afetada no grupo tratado com CsA, enquanto o grupo Debio apresentou resultados próximos ao CTR. A busca pelas ciclofilinas do gênero Paracoccidioides encontrou 10 ciclofilinas por isolado/espécie. Conclusão: A inibição da calcineurina e ciclofilinas pela CsA apresenta respostas biológicas mais expressivas ao P. brasiliensis, o que sugere um papel mais relevante da calcineurina no crescimento celular, manutenção dos CL e transição morfológica. Os fungos do gênero Paracoccidioides apresentam dez ciclofilinas homólogas entre si e possuem organização gênica idêntica, porém com regulação da expressão diferente.Objective: The main objective of this work was to elucidate the possible functions of cyclophilins in the biology of Paracoccidioides brasiliensis through in vitro and in silico experiments. Methods: In vitro methodology was performed using P. brasiliensis yeast cell cultures in three experiments with three groups (CTR, CsA, and Debio) in each one. All assays were made in duplicate and at 37°C. Cell growth profile experiments were performed using optical density over the days of culture, pharmacological stability analysis, and staining of lipid bodies. The morphological transition experiments also followed the groups described above, but the culture temperature went from 25°C to 37°C after the division of the study groups. Analyzes of the morphological transition phases and also staining with oil red O were performed. The work with analysis of open databases was performed using the blastx tool, blastp from NCBI, and the Align tool from the uniprot.org website. Results: The yeasts treated with CsA showed significantly lower growth than the CTR group, while the Debio group showed a subtle difference in growth when compared to the CTR group. The pharmacological stability of CsA is high even in a short time of drug exposure. The M-L transition was affected in the group treated with CsA, while the Debio group presented results close to the CTR. The search for cyclophilins of the genus Paracoccidioides found 10 cyclophilins per isolate/species. Conclusion: The inhibition of calcineurin and cyclophilins by CsA exhibits more expressive biological responses to P. brasiliensis, which suggests a more relevant role of calcineurin in cell growth, maintenance of CL, and morphological transition. Fungi of the genus Paracoccidioides have ten cyclophilins that are homologous to each other and have identical gene organization, but with different expression regulations.Coordenação de Aperfeiçoamento de Pessoal de Nível Superior (CAPES)85 f.porUniversidade Federal de São PauloParacoccidioides brasiliensisCiclofilinasCalcineurinaAlisporivirCiclofilinas na biologia do Paracoccidioides brasiliensis: estudos in vitro e in silico.info:eu-repo/semantics/publishedVersioninfo:eu-repo/semantics/masterThesisinfo:eu-repo/semantics/openAccessreponame:Repositório Institucional da UNIFESPinstname:Universidade Federal de São Paulo (UNIFESP)instacron:UNIFESPInstituto de Ciência e Tecnologia (ICT)BiotecnologiaBiotecnologia MolecularBioquímica e Biologia MolecularORIGINALDissertação Natália - Repositório (1).pdfDissertação Natália - Repositório (1).pdfDissertacao Natalia Diasapplication/pdf1293860${dspace.ui.url}/bitstream/11600/66143/3/Disserta%c3%a7%c3%a3o%20Nat%c3%a1lia%20-%20Reposit%c3%b3rio%20%281%29.pdfeb46b8960d81a586cdca7624eaccc3acMD53open accessLICENSElicense.txtlicense.txttext/plain; charset=utf-85838${dspace.ui.url}/bitstream/11600/66143/2/license.txtf466a6707c2a202ef38bb4d1830cb8c6MD52open accessTEXTDissertação Natália - Repositório (1).pdf.txtDissertação Natália - Repositório (1).pdf.txtExtracted texttext/plain141843${dspace.ui.url}/bitstream/11600/66143/4/Disserta%c3%a7%c3%a3o%20Nat%c3%a1lia%20-%20Reposit%c3%b3rio%20%281%29.pdf.txtcfc6036eb4d5e43ebab20f0d6e716ae5MD54open accessTHUMBNAILDissertação Natália - Repositório (1).pdf.jpgDissertação Natália - Repositório (1).pdf.jpgIM Thumbnailimage/jpeg3693${dspace.ui.url}/bitstream/11600/66143/6/Disserta%c3%a7%c3%a3o%20Nat%c3%a1lia%20-%20Reposit%c3%b3rio%20%281%29.pdf.jpgce82c376fe65fedab1d6086ddadd0897MD56open access11600/661432022-12-28 17:03:35.6open accessoai:repositorio.unifesp.br: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ório InstitucionalPUBhttp://www.repositorio.unifesp.br/oai/requestopendoar:34652022-12-28T20:03:35Repositório Institucional da UNIFESP - Universidade Federal de São Paulo (UNIFESP)false |
dc.title.pt_BR.fl_str_mv |
Ciclofilinas na biologia do Paracoccidioides brasiliensis: estudos in vitro e in silico. |
title |
Ciclofilinas na biologia do Paracoccidioides brasiliensis: estudos in vitro e in silico. |
spellingShingle |
Ciclofilinas na biologia do Paracoccidioides brasiliensis: estudos in vitro e in silico. Dias, Natália Aparecida Vasconcelos [UNIFESP] Paracoccidioides brasiliensis Ciclofilinas Calcineurina Alisporivir |
title_short |
Ciclofilinas na biologia do Paracoccidioides brasiliensis: estudos in vitro e in silico. |
title_full |
Ciclofilinas na biologia do Paracoccidioides brasiliensis: estudos in vitro e in silico. |
title_fullStr |
Ciclofilinas na biologia do Paracoccidioides brasiliensis: estudos in vitro e in silico. |
title_full_unstemmed |
Ciclofilinas na biologia do Paracoccidioides brasiliensis: estudos in vitro e in silico. |
title_sort |
Ciclofilinas na biologia do Paracoccidioides brasiliensis: estudos in vitro e in silico. |
author |
Dias, Natália Aparecida Vasconcelos [UNIFESP] |
author_facet |
Dias, Natália Aparecida Vasconcelos [UNIFESP] |
author_role |
author |
dc.contributor.authorLattes.pt_BR.fl_str_mv |
http://lattes.cnpq.br/0466319851464131 |
dc.contributor.advisorLattes.pt_BR.fl_str_mv |
http://lattes.cnpq.br/8867737169235839 |
dc.contributor.author.fl_str_mv |
Dias, Natália Aparecida Vasconcelos [UNIFESP] |
dc.contributor.advisor1.fl_str_mv |
Campos, Claudia Barbosa Ladeira de [UNIFESP] |
contributor_str_mv |
Campos, Claudia Barbosa Ladeira de [UNIFESP] |
dc.subject.por.fl_str_mv |
Paracoccidioides brasiliensis Ciclofilinas Calcineurina Alisporivir |
topic |
Paracoccidioides brasiliensis Ciclofilinas Calcineurina Alisporivir |
description |
Objetivo: O objetivo principal deste trabalho foi elucidar as possíveis funções das ciclofilinas na biologia do Paracoccidioides brasiliensis através de experimentos in vitro e in silico. Métodos: Os métodos in vitro foram realizados em três experimentos em duplicata de culturas de células de leveduras de P. brasiliensis com três grupos (CTR, CsA e Debio) a 37°C. Foram realizados experimentos de Perfil de crescimento celular utilizando a densidade óptica ao longo dos dias de cultura, experimentos de análise de estabilidade farmacológica e coloração dos corpúsculos lipídicos. Os experimentos de transição morfológica também seguiram os grupos descritos acima, porém a temperatura de cultura foi de 25°C para 37°C após a divisão dos grupos de estudo. Foram realizadas análises das fases de transição morfológica e também a coloração com oil red O. O trabalho com análise de bancos de dados abertos foi realizada utilizando a ferramenta blastx, blastp do NCBI e a ferramenta Align do site uniprot.org. Resultados: As leveduras tratadas com CsA apresentaram crescimento significativamente inferior que o grupo CTR, enquanto o grupo Debio apresentou diferença sutil no crescimento quando comparado ao grupo CTR. A estabilidade farmacológica da CsA é alta mesmo em pouco tempo de exposição ao fármaco. A transição M-L foi afetada no grupo tratado com CsA, enquanto o grupo Debio apresentou resultados próximos ao CTR. A busca pelas ciclofilinas do gênero Paracoccidioides encontrou 10 ciclofilinas por isolado/espécie. Conclusão: A inibição da calcineurina e ciclofilinas pela CsA apresenta respostas biológicas mais expressivas ao P. brasiliensis, o que sugere um papel mais relevante da calcineurina no crescimento celular, manutenção dos CL e transição morfológica. Os fungos do gênero Paracoccidioides apresentam dez ciclofilinas homólogas entre si e possuem organização gênica idêntica, porém com regulação da expressão diferente. |
publishDate |
2022 |
dc.date.accessioned.fl_str_mv |
2022-12-19T19:00:03Z |
dc.date.available.fl_str_mv |
2022-12-19T19:00:03Z |
dc.date.issued.fl_str_mv |
2022-11-09 |
dc.type.status.fl_str_mv |
info:eu-repo/semantics/publishedVersion |
dc.type.driver.fl_str_mv |
info:eu-repo/semantics/masterThesis |
format |
masterThesis |
status_str |
publishedVersion |
dc.identifier.uri.fl_str_mv |
https://repositorio.unifesp.br/11600/66143 |
url |
https://repositorio.unifesp.br/11600/66143 |
dc.language.iso.fl_str_mv |
por |
language |
por |
dc.rights.driver.fl_str_mv |
info:eu-repo/semantics/openAccess |
eu_rights_str_mv |
openAccess |
dc.format.none.fl_str_mv |
85 f. |
dc.coverage.spatial.pt_BR.fl_str_mv |
São José dos Campos, SP |
dc.publisher.none.fl_str_mv |
Universidade Federal de São Paulo |
publisher.none.fl_str_mv |
Universidade Federal de São Paulo |
dc.source.none.fl_str_mv |
reponame:Repositório Institucional da UNIFESP instname:Universidade Federal de São Paulo (UNIFESP) instacron:UNIFESP |
instname_str |
Universidade Federal de São Paulo (UNIFESP) |
instacron_str |
UNIFESP |
institution |
UNIFESP |
reponame_str |
Repositório Institucional da UNIFESP |
collection |
Repositório Institucional da UNIFESP |
bitstream.url.fl_str_mv |
${dspace.ui.url}/bitstream/11600/66143/3/Disserta%c3%a7%c3%a3o%20Nat%c3%a1lia%20-%20Reposit%c3%b3rio%20%281%29.pdf ${dspace.ui.url}/bitstream/11600/66143/2/license.txt ${dspace.ui.url}/bitstream/11600/66143/4/Disserta%c3%a7%c3%a3o%20Nat%c3%a1lia%20-%20Reposit%c3%b3rio%20%281%29.pdf.txt ${dspace.ui.url}/bitstream/11600/66143/6/Disserta%c3%a7%c3%a3o%20Nat%c3%a1lia%20-%20Reposit%c3%b3rio%20%281%29.pdf.jpg |
bitstream.checksum.fl_str_mv |
eb46b8960d81a586cdca7624eaccc3ac f466a6707c2a202ef38bb4d1830cb8c6 cfc6036eb4d5e43ebab20f0d6e716ae5 ce82c376fe65fedab1d6086ddadd0897 |
bitstream.checksumAlgorithm.fl_str_mv |
MD5 MD5 MD5 MD5 |
repository.name.fl_str_mv |
Repositório Institucional da UNIFESP - Universidade Federal de São Paulo (UNIFESP) |
repository.mail.fl_str_mv |
|
_version_ |
1802764185519521792 |