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Efeito do tratamento TKI-258 sobre a expressão gênica de seus receptores-alvo e ativação de suas efetoras GTPases Rho em carcinoma epidermoide oral in vitro.GTPase Cdc42.GTPase Rac1.GTPase RhoA.GTPase RhoB.Câncer oral.Cdc42 GTPase.Rac1 GTPase.RhoA GTPase.RhoB GTPase.Oral cancer.CNPQ::CIENCIAS DA SAUDE::MEDICINAO carcinoma epidermoide oral representa a maioria das lesões malignas da região de cabeça e pescoço. O comportamento de suas células é regulado pela ligação de moléculas extracelulares aos receptores da membrana celular, que iniciam vias de transdução de sinal. O TKI-258 é um inibidor tirosina-quinase que bloqueia os receptores de fatores de crescimento de fibroblastos (FGFRs), derivados de plaquetas (PDGFRs) e endoteliais vasculares (VEGFRs), o que o torna atraente para o tratamento dessa neoplasia. Este estudo visou avaliar o efeito do tratamento TKI-258 sobre a expressão gênica de seus receptores-alvo, a ativação de suas efetoras GTPases Rho e a organização da citoqueratina e da vimentina em carcinoma epidermoide oral in vitro. Células SCC-4 controle e tratadas com TKI-258 a 5 μM foram cultivadas por 24 horas para realização dos ensaios: expressão gênica de FGFR3b, VEGFR1, PDGFRα e PDGFRβ; imunofluorescência para RhoA, RhoB, Rac1 e Cdc42 em culturas tridimensionais; imunofluorescência para citoqueratina e vimentina. As diferenças foram consideradas significativas quando p<0,05. As células tratadas com TKI-258 apresentaram uma tendência de diminuição da expressão gênica de FGFR3b, VEGFR-1, PDGFRα e PDGFRβ. As GTPases RhoA e RhoB foram vistas externamente ao córtex de actina (forma ativa) em células-controle e tratadas com TKI-258. A GTPase Rac1 não foi vista externamente ao córtex de actina em células controle, mas estavam presentes nas células tratadas com TKI-258. Cedc42 ativa não foi vista nas células controle e tratadas. O percentual de células tratadas positivas reduziu para citoqueratina e foi similar para vimentina. Os resultados obtidos demonstraram que a inibição das vias de transdução de sinal com o tratamento com TKI-258 em células de carcinoma epidermoide oral in vitro leva a uma tendência de diminuição da expressão gênica de FGFR3b, VEGFR-1, PDGFRα, e PDGFRβ; no entanto, mantém as GTPases RhoA, RhoB e Rac1 na sua forma ativa. Além disso, reduz a quantidade de células positivas para a citoqueratina, enquanto a vimentina não é afetada.Oral squamous cell carcinoma represents the majority of malignant lesions of the head and neck region. The behavior of their cells is regulated by the binding of extracellular molecules to cell membrane receptors, which initiate signal transduction pathways. TKI-258 is a tyrosine kinase inhibitor that blocks the receptors of growth factors: fibroblasts (FGFRs), platelet derivatives (PDGFRs) and vascular endothelials (VEGFRs), which makes it attractive for the treatment of this neoplasm. This study aimed to evaluate the effect of TKI-258 treatment on the gene expression of its target receptors, the activation of its Rho GTPases effectors and the organization of cytokeratin and vimentin in oral squamous cell carcinoma in vitro. SCC-4 cells controlled and treated with TKI-258 at 5 μM were cultured for 24 hours for the following assays: gene expression of FGFR3b, VEGFR1, PDGFRα and PDGFRβ; immunofluorescence for RhoA, RhoB, Rac1 and Cdc42 in three-dimensional cultures; immunofluorescence to cytokeratin and vimentin. The differences were considered significant when p<0.05. The cells treated with TKI-258 showed a tendency to decrease gene expression of FGFR3b, VEGFR-1, PDGFRα and PDGFRβ. The RhoA and RhoB GTPases were seen externally to the actin cortex (active form) in control cells and treated with TKI-258. Rac1 was seen externally to the actin cortex (active form) in cells treated with TKI-258, but not in control cells. Cdc42 was not seen in control cells and treated with TKI-258. The percentage of positive treated cells decreased to cytokeratin and was similar for vimentin. The results showed that inhibition of signal transduction pathways with treatment with TKI-258 in oral squamous cell cells in vitro leads to a trend of decreased gene expression of FGFR3b, VEGFR-1, PDGFRα, and PDGFRβ. However, it keeps the RhoA, RhoB and Rac1 GTPases in their active form. Also, it reduces the amount of cells positive for cytokeratin, while vimentin is not affected.Fundação de Amparo a Pesquisa do Estado de Minas Gerais - FAPEMIGUniversidade Federal do Triângulo Mineiro - UFTMUniversidade Federal do Triângulo MineiroInstituto de Ciências da Saúde - ICS::Programa de Pós-Graduação em Ciências da SaúdeBrasilUFTMPrograma de Pós-Graduação em Ciências da SaúdeCREMA, Virgínia Oliveira66127211620http://lattes.cnpq.br/2599388555203811MORAES, Glênio Fernandes2024-01-22T14:30:16Z2023-07-052024-01-22T14:30:16Z2023-07-05info:eu-repo/semantics/publishedVersioninfo:eu-repo/semantics/masterThesisapplication/pdfhttp://bdtd.uftm.edu.br/handle/123456789/1628porinfo:eu-repo/semantics/openAccessreponame:Biblioteca Digital de Teses e Dissertações da UFTMinstname:Universidade Federal do Triangulo Mineiro (UFTM)instacron:UFTM2024-01-23T02:02:47Zoai:bdtd.uftm.edu.br:123456789/1628Biblioteca Digital de Teses e Dissertaçõeshttp://bdtd.uftm.edu.br/PUBhttp://bdtd.uftm.edu.br/oai/requestbdtd@uftm.edu.br||bdtd@uftm.edu.bropendoar:2024-04-24T09:59:36.239456Biblioteca Digital de Teses e Dissertações da UFTM - Universidade Federal do Triangulo Mineiro (UFTM)false
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