Avaliação in vitro da atividade antihelmíntica da toxina BnSP-6 contra Strongyloides venezuelensis e seu rastreamento utilizando CdSe/CdS Magic Sized Quantum Dots

• Autor(a) principal: Rodrigues, Jessica Peixoto
• Data de Publicação: 2017
• Tipo de documento: Dissertação
• Idioma: por
• Título da fonte: Repositório Institucional da UFU
• Texto Completo: https://repositorio.ufu.br/handle/123456789/19768; http://doi.org/10.14393/ufu.di.2017.418
• topic: CNPQ::CIENCIAS BIOLOGICAS::IMUNOLOGIA; Imunologia; Strongyloides venezuelensis; Estrongiloidíase; PLA2; BnSP-6; CdSe/CdS MSQD

A estrongiloidíase é uma parasitose causada por helmintos do gênero Strongyloides. Atualmente, a ivermectina é o fármaco de escolha para o seu tratamento, no entanto, os casos de falha terapêutica em pacientes imunossuprimidos foram relatados. A busca de novos medicamentos é um tópico importante da pesquisa biomédica. As fosfolipases A2 (PLA2) são enzimas que têm demonstrado potencial farmacológico contra tumores e bactérias. Este estudo mostra a ação da BnSP-6, uma PLA2 derivada da peçonha de Bothrops pauloensis, contra Strongyloides venezuelensis empregando CdSe/CdS MagicSized Quantum Dots (MSQD) como marcador de rastreamento. As células intestinais humanas (Caco-2), larvas infectantes e fêmeas partenogenéticas de S. venezuelensis foram cultivadas e tratadas por 72 h com diferentes concentrações de BnSP-6. A citotoxicidade foi avaliada utilizando 3-(4,5- dimetiltiazol-2yl)-2,5-difenil brometo de tetrazolina (MTT). A autofagia e a apoptose celular foram avaliadas por marcação de fluorescência com monodansiilcadaverina (MDC) e iodeto de propídio (PI), respectivamente. Para verificar a localização tecidual de ação, a BnSP-6 foi bioconjugada com CdSe/CdS MSQDs. As larvas infectantes foram tratadas com o bioconjugado, e a marcação foi monitorada por microscopia de fluorescência. A BnSP-6 mostrou alta citotoxicidade (70%) contra o parasito em uma concentração 12 vezes menor à ivermectina, e citotoxicidade de 30% contra as células intestinais humanas (Caco-2) na maior concentração utilizada. A autofagia e a apoptose tardia foram verificadas em ambas as formas evolutivas do parasito. A microscopia de fluorescência indicou que o bioconjugado foi localizado no intestino da larva infectante após 24 horas, sugerindo absorção intestinal antes da ação citotóxica. Em suma, foi demonstrado que a BnSP-6 apresenta baixa citotoxicidade contra Caco-2, e é eficaz contra S. venezuelensis, sendo absorvida pelo intestino, induzindo autofagia e apoptose, indicando seu potencial como uma nova ferramenta para o tratamento da estrongiloidíase.