Avaliação da atividade citotóxica, antitumoral, mutagênica, recombinogênica e genotóxica do [Cu(Dox)(Phen)]2+

• Autor(a) principal: Lopes, Jeyson Césary
• Data de Publicação: 2019
• Tipo de documento: Tese
• Idioma: por
• Título da fonte: Repositório Institucional da UFU
• Texto Completo: https://repositorio.ufu.br/handle/123456789/28648; http://dx.doi.org/10.14393/ufu.te.2019.2239
• topic: CNPQ::CIENCIAS BIOLOGICAS::GENETICA::MUTAGENESE; Complexo ternário de Cobre (II); Recombinação; Mutação; Drosophila melanogaster; Atividade antitumoral; Citotoxicidade; Genotoxicidade; Melanoma; Sarcoma; Copper(II) ternary complex; Recombination; Mutation; Antitumor activity; Cytotoxicity; Genotoxicity

O complexo ternário de Cobre(II), 1,10-fenantrolina e doxiciclina [Cu(dox)(phen)]2+, desenvolvido como um candidato a droga antitumoral, mostrou alta citotoxicidade e atividade de clivagem do DNA por mecanismo oxidativo e intercalação à molécula, sugerindo estudos que auxiliem na melhor compreensão de seu mecanismo de ação. Neste contexto, o objetivo do presente estudo foi investigar sua atividade citotóxica e potencial genotóxico em células tumorais e não-tumorais cultivadas in vitro e sua atividade antitumoral in vivo utilizando camundongos BALB/C inoculados com as linhagens celulares de sarcoma 180 e tumor de Ehrlich, bem como avaliar os efeitos mutagênicos e recombinogênicos do [Cu(dox)(phen)]2+ utilizando o teste para detecção de mutação e recombinação somática (SMART) em Drosophila melanogaster. O coeficiente de partição de [Cu(dox)(phen)]2+ foi determinado em sistema água octanol em pH 7,4. A avaliação da citotoxicidade foi realizada usando o ensaio de resazurina em três linhagens de células tumorigênicas (sarcoma TG180, sarcoma S180 e melanoma B16F10) e uma linhagem não tumorigênica (macrófagos RAW 264.7) em diferentes concentrações. A atividade genotóxica foi avaliada pelo Teste de Micronúcleo in vitro nas concentrações de 1; 0,25; 0,1; e 0,05μM. O teste de atividade antitumoral in vivo foi realizado utilizando sarcoma S180 nas concentrações de 5, 10 e 15 mg/Kg de animal e foi determinado o tempo de sobrevivência e alterações no peso de camundongos usando um modelo de tumor ascítico de Ehrlich nas concentrações de 1 e 8mg/Kg de animal. O teste SMART foi realizado com larvas de 72h nos cruzamentos padrão e de alta bioativação em três concentrações de [Cu(dox)(phen)]2+ (6,92; 13,84 ou 27,6mM). Foram analisados indivíduos trans-heterozigotos marcados e heterozigotos balanceados para determinar os eventos mutacionais e recombinogênicos ocorridos nas células. Os resultados obtidos em linhagens celulares mantidas in vitro indicaram que o composto apresenta moderado potencial citotóxico, com inibição de crescimento celular seletiva para células tumorais, especialmente B16F10. Seu mecanismo de ação principal parece ser por meio da geração de EROs. [Cu(dox)(phen)]2+ reduziu significativamente o tamanho do tumor implantado no modelo animal, sugerindo grande potencial antitumoral. [Cu(dox)(phen)]2+ é seletivamente citotóxico para B16F10 e mostrou elevado potencial quimioterápico in vivo contra sarcoma S180 e tumor ascítico de Ehrlich. Em relação aos efeitos mutagênicos e recombinogênicos foi verificado que [Cu(dox)(phen)]2+ aumentou significativamente as frequências de células mutantes em ambos os cruzamentos de D. melanogaster, principalmente por recombinação. Esses dados mostram que [Cu(dox)(phen)]2+ é um agente recombinogênico direto, independente da bioativação. Os resultados obtidos indicam que [Cu(dox)(phen)]2+ é um candidato promissor para o desenvolvimento de novas drogas quimioterápicas, uma vez que apresentou comportamento seletivo para células tumorais e possui seletividade satisfatória para atravessar a membrana e chegar ao DNA, seu principal alvo de ação.