Expressão, purificação e avaliação da inibição da atividade fosfolipásica A2 do inibidor recombinante rγCdcPLI de Crotalus durissus collilineatus

Detalhes bibliográficos
Autor(a) principal: Gonçalves, Marina Neves
Data de Publicação: 2019
Tipo de documento: Trabalho de conclusão de curso
Idioma: por
Título da fonte: Repositório Institucional da UFU
Texto Completo: https://repositorio.ufu.br/handle/123456789/30003
Resumo: Trabalho de Conclusão de Curso (Graduação)
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spelling Expressão, purificação e avaliação da inibição da atividade fosfolipásica A2 do inibidor recombinante rγCdcPLI de Crotalus durissus collilineatusInibidores de PLA2Fosfolipases A2CNPQ::CIENCIAS BIOLOGICASTrabalho de Conclusão de Curso (Graduação)As enzimas PLA2 de peçonhas de serpentes são muito investigadas dada a grande variedade de seus efeitos farmacológicos, como cardiotoxicidade, anticoagulação, neurotoxicidade, miotoxicidade, ativação e/ou inibição da agregação plaquetária, edema, convulsão, hipotensão e hemorragia. Desta forma questionamentos da resistência das próprias serpentes sobre o efeito deletério dessas enzimas em seu organismo, traz novas perspectivas sobre os inibidores em seu sangue. Os inibidores de PLA2s oriundos do plasma de serpentes têm sido estudados demonstrando um alto potencial terapêutico em patologias nas quais as PLA2s protagonizam em vários eventos moleculares. Assim, este trabalho teve como objetivo expressar, purificar e avaliar a inibição de um inibidor recombinante do tipo gama isolado do soro da serpente Crotalus durissus collilinetaus expresso em um sistema heterologo utilizando E. coli. Para a sua purificação foi utilizado dois passos cromatográficos um de troca iônica utilizando a resina Q-Sepharose Fast Flow e o outro por afinidade pela afinidade em coluna NHS imobilizada com PLA2 BnSP-7, sendo o grau de pureza avaliado por HPLC e Eletroforese em gel de poliacrilamida com agentes desnaturantes (SDS-PAGE 12,5%). O perfil cromatográfico na troca ionica apresentou 6 frações (Q1 a Q6). As frações Q4 e Q5 apresentaram uma banda na faixa de 25kDa correspondente a massa molecular do inibidor nativo. O inibidor purificado apresenta um potencial inibitório sobre a atividade PLA2 da peçonha de B. pauloensis semelhante ao inibidor nativo. No entanto novos estudos são necessários para se traçar um melhor perfil de inibição frente a diferentes classes de PLA2s bem como diferentes atividades biológicas induzidas por estas, tais como a atividade miotóxica, edematogênica, inibição da agregação plaquetária, etc.Universidade Federal de UberlândiaBrasilCiências BiológicasGimenes, Sarah Natalie Cirilohttp://lattes.cnpq.br/1455875323767991Ávila, Veridiana de Melo Rodrigueshttp://lattes.cnpq.br/6372375421254490Rodrigues, Renata SantosCV: http://lattes.cnpq.br/2516569970975669Borges, Isabela PachecoCV: http://lattes.cnpq.br/3769923109592078Gonçalves, Marina Neves2020-10-04T23:17:21Z2020-10-04T23:17:21Z2019-06-24info:eu-repo/semantics/publishedVersioninfo:eu-repo/semantics/bachelorThesisapplication/pdfGONÇALVES, Marina Neves. Expressão, purificação e avaliação da inibição da atividade fosfolipásica A2 do inibidor recombinante rγCdcPLI de Crotalus durissus collilineatus. 2019. 44 f. Trabalho de Conclusão de Curso (Graduação em Ciências Biológicas) – Universidade Federal de Uberlândia, Uberlândia, 2020.https://repositorio.ufu.br/handle/123456789/30003porinfo:eu-repo/semantics/openAccessreponame:Repositório Institucional da UFUinstname:Universidade Federal de Uberlândia (UFU)instacron:UFU2023-12-26T20:23:06Zoai:repositorio.ufu.br:123456789/30003Repositório InstitucionalONGhttp://repositorio.ufu.br/oai/requestdiinf@dirbi.ufu.bropendoar:2023-12-26T20:23:06Repositório Institucional da UFU - Universidade Federal de Uberlândia (UFU)false
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