Expressão e caracterização citotóxica de uma protease clonada da glândula de Bothrops pauloensis
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Data de Publicação: | 2017 |
Tipo de documento: | Trabalho de conclusão de curso |
Idioma: | por |
Título da fonte: | Repositório Institucional da UFU |
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Expressão e caracterização citotóxica de uma protease clonada da glândula de Bothrops pauloensisExpression and cytotoxic characterization of a protease cloned from the venom gland of Bothrops pauloensisSerinoproteaseProteína recombinantePichia pastorisSerineproteaseRecombinant proteinAntitumoralAntitumorCNPQ::CIENCIAS BIOLOGICAS::BIOQUIMICA::BIOLOGIA MOLECULARTrabalho de Conclusão de Curso (Graduação)Existem no Brasil duas famílias de serpentes peçonhentas: Elapidae e Viperidae. Dentre as serpentes peçonhentas encontradas no território brasileiro, a espécie Bothrops pauloensis se destaca na região do Triângulo Mineiro. Essa serpente é caracterizada por apresentar aparelho inoculador de peçonha, que quando inoculada na presa leva a diversas alterações no organismo, principalmente no sistema hemostático. Os estudos relacionados ao mecanismo de ação de toxinas da peçonha de serpentes contribuiu para a elaboração de novos fármacos. Diversas toxinas de serpentes foram caracterizadas com a capacidade de inibir a proliferação celular e promover a morte de células tumorais. Entretanto, pouco se sabe sobre o modo de ação de serinoproteases em células tumorais. As serinoproteases de peçonha de serpentes (SVSPs) são glicoproteínas com estrutura semelhante à tripsina e são pouco expressas em peçonhas da espécie B. pauloensis. Dessa forma, o uso de tecnologias como a expressão heteróloga de proteínas possibilita a obtenção de proteína com modificações pós-traducionais e em escala industrial. O objetivo deste trabalho foi realizar a expressão da proteína recombinante (rBpSP-I) de B. pauloensis em Pichia pastoris, a purificação em cromatografia de afinidade em resina de Ni-NTA Superflow e, posteriormente, a caracterização bioquímica e funcional, pelas atividades coagulante, fibrinogenolítica e citotóxica sobre células tumorais (HL-60, HepG2, MCF7) e não tumorais (PBMC). A serinoprotease apresenta enorme potencial biotecnológico, pois apresentou citotoxicidade significativa frente às células tumorais, o que nunca foi descrito na literatura. Além disso, a proteína recombinante não apresentou citotoxicidade significativa às células do PBMC, o que pode sugerir que sua ação seja direcionada a células cancerígenas.Universidade Federal de UberlândiaBrasilBiotecnologiaLopes, Daiana Silvahttp://lattes.cnpq.br/8269548743726759Rodrigues, Renata Santoshttp://lattes.cnpq.br/2516569970975669Gimenes, Sarah Natalie Cirilohttp://lattes.cnpq.br/1455875323767991Costa, Tassia Rafaellahttp://lattes.cnpq.br/9523155473412511Oliveira, Marília de Freitas2018-04-09T20:32:14Z2018-04-09T20:32:14Z2017-08-14info:eu-repo/semantics/publishedVersioninfo:eu-repo/semantics/bachelorThesisapplication/pdfOLIVEIRA, Marília de Freitas. Expressão e caracterização citotóxica de uma protease clonada da glândula de Bothrops pauloensis. 2017. 47 f. Trabalho de Conclusão de Curso (Graduação em Biotecnologia) - Universidade Federal de Uberlândia, Uberlândia, 2017.https://repositorio.ufu.br/handle/123456789/21113porinfo:eu-repo/semantics/openAccessreponame:Repositório Institucional da UFUinstname:Universidade Federal de Uberlândia (UFU)instacron:UFU2018-04-09T20:32:14Zoai:repositorio.ufu.br:123456789/21113Repositório InstitucionalONGhttp://repositorio.ufu.br/oai/requestdiinf@dirbi.ufu.bropendoar:2018-04-09T20:32:14Repositório Institucional da UFU - Universidade Federal de Uberlândia (UFU)false |
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