Mecanismos de sinalização celular envolvidos nos processos de proliferação e propagação de Ehrlichia canis in vitro

Detalhes bibliográficos
Autor(a) principal: Levenhagen, Marcelo Arantes
Data de Publicação: 2011
Tipo de documento: Dissertação
Idioma: por
Título da fonte: Repositório Institucional da UFU
Texto Completo: https://repositorio.ufu.br/handle/123456789/16668
Resumo: Ehrlichia canis, etiologic agent of Canine Monocytic Ehrlichiosis, is an obligatory intracellular bacteria that lodges itself in monocytes and macrophages. In this study we analyzed the role of the cytoskeleton, specifically actin and microtubules, some components of the signaling pathway IP3/DAG: phospholipase C (PLC), protein kinase (PTK) and calcium channels as well as the role of iron in the processes of proliferation and propagation of E. canis in DH82 cells. For each of these components different inhibitory drugs were used: Cytochalasin D (inhibits actin polymerization), Nocodazole (inhibits microtubule polymerization), Neomycin (PLC inhibitor), Genistein (PTK inhibitor), Verapamil hydrochloride (blocker calcium channel) and Deferoxamine (iron chelator). Regarding to proliferation process, we observed a significant decrease in the total number of bacteria in treated cells. Except for Genistein (29.86%) and Nocodazole (38.53%), the percentage of infected cells was significantly lower compared with the control (33.23%). As for the propagation process, except for Nocodazole, there was a decrease in the total number of bacteria after treatment. In relation to infected cells percentage, no significant difference were seen in treated cells with Cytochalasin D (44.72%) and Deferoxamine (56.53%) when compared to controls (51.67%). Regarding Nocodazole was evidenced significant increase in the percentage of infected cells (64.75%). These results suggest that E. canis proliferation and spread are sensitive to tested drugs, demonstrating that actin filaments polymerization, compared to microtubules, as well as the components envelopment of signaling pathway IP3/DAG (PLC, PTK and calcium channels) analyzed and iron are essential to bacterial multiplication
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For each of these components different inhibitory drugs were used: Cytochalasin D (inhibits actin polymerization), Nocodazole (inhibits microtubule polymerization), Neomycin (PLC inhibitor), Genistein (PTK inhibitor), Verapamil hydrochloride (blocker calcium channel) and Deferoxamine (iron chelator). Regarding to proliferation process, we observed a significant decrease in the total number of bacteria in treated cells. Except for Genistein (29.86%) and Nocodazole (38.53%), the percentage of infected cells was significantly lower compared with the control (33.23%). As for the propagation process, except for Nocodazole, there was a decrease in the total number of bacteria after treatment. In relation to infected cells percentage, no significant difference were seen in treated cells with Cytochalasin D (44.72%) and Deferoxamine (56.53%) when compared to controls (51.67%). Regarding Nocodazole was evidenced significant increase in the percentage of infected cells (64.75%). These results suggest that E. canis proliferation and spread are sensitive to tested drugs, demonstrating that actin filaments polymerization, compared to microtubules, as well as the components envelopment of signaling pathway IP3/DAG (PLC, PTK and calcium channels) analyzed and iron are essential to bacterial multiplicationMestre em Imunologia e Parasitologia AplicadasEhrlichia canis, agente etiológico da Erliquiose Monocítica Canina, é uma bactéria intracelular obrigatória que se aloja em monócitos e macrófagos. Nesse estudo analisamos o papel do citoesqueleto, especificamente filamentos de actina e microtúbulos, de alguns componentes da Via de Sinalização celular IP3/DAG: fosfolipase C (PLC), proteína quinase (PTK) e canais de cálcio, além do ferro nos processos de proliferação e propagação de E. canis em células DH82. Para cada um desses componentes utilizamos diferentes drogas inibitórias: Citocalasina D (inibe a polimerização de filamentos de actina); Nocodazol (inibe a polimerização dos microtúbulos); Neomicina (inibidor de PLC); Genisteína (inibidor de PTK); Cloridrato de Verapamil (bloqueador de canal de cálcio) e Deferoxamina (quelante de ferro). Quanto ao Processo de Proliferação, observou-se diminuição significativa do número total de bactérias nas células tratadas. Exceto para Genisteína (29.86%) e Nocodazol (38.53%), a porcentagem de células infectadas apresentou-se significativamente menor em comparação ao controle (33.23%). Quanto ao Processo de Propagação, exceto para Nocodazol, houve uma queda do número total de bactérias após o tratamento. Quanto à porcentagem de células infectadas, não houve diferença significativa para as células tratadas com Citocalasina D (44.72%) e Deferoxamina (56.53%) em relação ao controle (51.67%). Em relação ao Nocodazol, foi evidenciado aumento significativo na porcentagem de células infectadas (64.75%). Esses resultados sugerem que os processos de proliferação e propagação de E. canis são sensiveis às drogas testadas, demonstrando que a polimerização do filamentos de actina, em comparação aos microtúbulos, bem como a participação dos componentes da Via de Sinalização IP3/DAG (PLC, PTK e canais de cálcio) analisados e do ferro são essenciais à multiplicação bacteriana.Universidade Federal de UberlândiaBRPrograma de Pós-graduação em Imunologia e Parasitologia AplicadasCiências BiológicasUFUBeletti, Marcelo Emíliohttp://buscatextual.cnpq.br/buscatextual/visualizacv.do?id=K4703947D5Silva, Marcoshttp://buscatextual.cnpq.br/buscatextual/visualizacv.do?id=K4727002Y2Silva, Cláudio Vieira dahttp://buscatextual.cnpq.br/buscatextual/visualizacv.do?id=K4704340J2Levenhagen, Marcelo Arantes2016-06-22T18:46:36Z2011-05-232016-06-22T18:46:36Z2011-03-17info:eu-repo/semantics/publishedVersioninfo:eu-repo/semantics/masterThesisapplication/pdfapplication/pdfLEVENHAGEN, Marcelo Arantes. Mecanismos de sinalização celular envolvidos nos processos de proliferação e propagação de Ehrlichia canis in vitro. 2011. 53 f. Dissertação (Mestrado em Ciências Biológicas) - Universidade Federal de Uberlândia, Uberlândia, 2011.https://repositorio.ufu.br/handle/123456789/16668porinfo:eu-repo/semantics/openAccessreponame:Repositório Institucional da UFUinstname:Universidade Federal de Uberlândia (UFU)instacron:UFU2016-06-23T07:40:03Zoai:repositorio.ufu.br:123456789/16668Repositório InstitucionalONGhttp://repositorio.ufu.br/oai/requestdiinf@dirbi.ufu.bropendoar:2016-06-23T07:40:03Repositório Institucional da UFU - Universidade Federal de Uberlândia (UFU)false
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