Poder discriminatório das tecnicas de RAPD (Random Amplified Polymorphic DNA) e PFGE (Pulsed-field gel electrophoresis) para diferenciar Campylobacter jejuni isoladas de carcaças de frangos

• Autor(a) principal: Peres, Phelipe Augusto Borba Martins
• Data de Publicação: 2017
• Tipo de documento: Trabalho de conclusão de curso
• Idioma: por
• Título da fonte: Repositório Institucional da UFU
• Texto Completo: https://repositorio.ufu.br/handle/123456789/20305
• topic: CNPQ::CIENCIAS BIOLOGICAS; Avicultura; Dendrograma; Campilobacteriose; Tipagem Molecular; Aviculture; Molecular Typing; Campylobacteriosis; Dendrogram

Campylobacter jejuni é reconhecido como principal agente causador de gastroenterite de origem alimentar nos EUA e na Europa. A carne de frango representa o principal veículo de transmissão da doença aos humanos. Uma das maneiras de avaliar epidemiologicamente o micro-organismo são as técnicas de genotipagem como o PFGE e o RAPD, porém são poucos os estudos que comparam as técnicas em relação à eficiência na discriminação das cepas. Objetivou-se avaliar a similaridade genética de 44 cepas de C. jejuni isoladas de carcaças de frangos de estabelecimento sob sistema de inspeção federal (SIF). As amostras isoladas foram genotipadas pelos métodos PFGE utilizando a enzima SmaI e RAPD utilizando os primers 1290 e HLWL, isoladamente e em conjunto, para a posterior fotodocumentação para análise computacional, totalizando quatro dendrogramas. As análises dos dendrogramas formados basearam-se na comparação dos perfis distintos, clusters e clones formados. Os resultados obtidos mostraram que foram identificados oito perfis distintos e apenas um cluster/pulsotipo em comum para os quatro testes. As demais cepas apresentaram comportamento totalmente diferenciado, tornando difícil a comparação entre RAPD e PFGE. Além disso, ficou evidente que o primer 1290 não apresenta bom poder discriminatório, comprovando a necessidade de utilização de mais de um primer nessa técnica. De maneira geral, o RAPD apresentou maior poder discriminatório, porém vale considerar que a técnica apresenta baixa reprodutibilidade e que o PFGE é amplamente reconhecido como padrão-ouro.