Potencial anti-inflamatório e antioxidante do extrato etanólico de raízes de Eriosema campestre var. macrophyllum (Grear) Fortunato
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Ottoni, Marcelo Henrique FernandesMelo, Gustavo Eustáquio Brito Alvim dePereira, Wagner de FátimaVillela, Daniel CamposKlein, AndréKassuya, Candida Aparecida LeiteSouza, Michaelle Geralda dos SantosPereira, Wagner de FátimaUniversidade Federal dos Vales do Jequitinhonha e Mucuri (UFVJM)Melo, Gustavo Eustáquio Brito Alvim de2022-03-28T18:11:00Z2022-03-28T18:11:00Z20212021-11-26OTTONI, Marcelo Henrique Fernandes. Potencial anti-inflamatório e antioxidante do extrato etanólico de raízes de Eriosema campestre var. macrophyllum (Grear) Fortunato. 2021. 124 p. Tese (Doutorado Multicêntrico em Ciências Fisiológicas) – Programa Multicêntrico de Pós-Graduação em Ciências Fisiológicas, Universidade Federal dos Vales do Jequitinhonha e Mucuri, Diamantina, 2021.https://acervo.ufvjm.edu.br/items/dcb7643d-4d1a-4b96-9290-ff06ba67f221O presente trabalho foi realizado com apoio da Coordenação de Aperfeiçoamento de Pessoal de Nível Superior - Brasil (CAPES) - Código de Financiamento 001.Na medicina popular, preparações etanólicas das raízes da planta Eriosema campestre var. macrophyllum, são utilizadas como agente anti-inflamatório. Estudos sugerem que o extrato etanólico de suas raízes possui atividade imunomoduladora, mas seu efeito sobre a inflamação aguda é desconhecido. Assim, o objetivo deste estudo foi avaliar o potencial terapêutico de EC-RA sobre elementos da resposta inflamatória aguda. Avaliamos a atividade antioxidante dos extratos etanólicos de partes aéreas (EC-AE) ou raízes (EC-RA) de E. campestre, pelos ensaios de Folin-Ciocauteau, de capacidade antioxidante total e de 2,2-difenil-2- picrilhidrazina (DPPH●). Realizaram-se ensaios in vitro com células RAW 264.7 estimuladas por lipopolissacarídeo bacteriano (LPS) por 24 horas. A partir de concentrações não citotóxicas obtidas pelo ensaio de 3-(4,5-dimetil-2-tiazolil)-2,5-difenil-2H-tetrazólio (MTT), foi testado o efeito de EC-RA sobre a produção de TNF, IL-6 e MCP-1, por ELISA, sobre a produção de óxido nítrico (NO) pelo método de Griess e sobre a fagocitose de zimosan-FITC por microscopia confocal. Investigou-se ainda a atividade anti-inflamatória de EC-RA administrado oralmente, utilizando os modelos de edema de pata induzido por carragenina em ratos Holtzman e de inflamação pulmonar induzida em camundongos C57Bl/6J pela instilação intranasal de LPS. Observamos que EC-AE e EC-RA apresentaram quantidade de compostos fenólicos e atividade antioxidante maiores em relação ao controle do solvente. EC-RA apresentou efeito inibitório sobre a produção de IL-6 [Controle não tratado (NT): 122,5 ± 11,9 pg/ml vs. EC-RA a 40μg/ml: 69,9 ± 7,2 pg/ml, p<0,05], e sobre MCP-1 (NT: 1879 ± 125 pg/ml vs. EC-RA a 10: 1345 ± 186 pg/ml; a 20: 1286 ± 75pg/ml; e a 40μg/ml: 804 ± 86pg/ml, p<0,05). Não foi observado efeito sobre a produção de TNF ou sobre a atividade fagocítica. Células tratadas com EC-RA produziram menos NO quando comparadas à cultura NT (NT: 7,61 ± 1,62μM vs EC-RA a 10: 4,13 ± 1,02μM; 20: 2,77 ± 1,08 μM; e 40μg/ml: 2,00 ± 0,98 μM). EC-RA diminuiu o edema de pata em ratos [% inibição do edema 6h após a indução: grupo veículo (VEÍC): 20,5 ± 18,47 vs EC-RA a 430mg/kg: 60,0 ± 29,74, p<0,05], e reduziu o número de leucócitos no lavado broncoalveolar de camundongos com inflamação pulmonar (VEÍC: 520,0 ± 115,4 x 103 células/ml vs EC-RA a 430mg/kg: 221,9 ± 27,06 x 103 céls./ml). Assim, nossos resultados sugerem uma ação biológica de EC-RA sobre parâmetros da resposta inflamatória aguda, possivelmente pela inibição de IL-6, MCP-1 e NO.Universidade Federal dos Vales do Jequitinhonha e Mucuri (UFVJM)Conselho Nacional de Desenvolvimento Científico e Tecnológico (CNPq)Coordenação de Aperfeiçoamento de Pessoal de Nível Superior (CAPES)Fundação de Amparo à Pesquisa do Estado de Minas Gerais (FAPEMIG)Tese (Doutorado) – Programa Multicêntrico de Pós-Graduação em Ciências Fisiológicas, Universidade Federal dos Vales do Jequitinhonha e Mucuri, 2021.In the folk medicine, ethanol preparations from the roots of the plant Eriosema campestre var. macrophyllum, are used as anti-inflammatory agents. Previous studies suggest that the ethanol extract of E. campestre roots shows immunomodulatory activity, but its effect on acute inflammation is unknown. Thus, the aim of this study was to evaluate the therapeutic potential of EC-RA on elements of the acute inflammatory response. We evaluated the antioxidant activity of the ethanol extracts from aerial parts (EC-AE) or roots (EC-RA) of E. campestre, by using Folin-Ciocauteau, total antioxidant capacity and 2,2-diphenyl-2-picrylhydrazyl (DPPH●) assays. In vitro assays were performed with cultures of RAW 264.7 cells stimulated by bacterial lipopolysaccharide (LPS) for 24 hours. From non-cytotoxic concentrations obtained by the 3-(4,5-dimethyl-2-thiazolyl)-2,5-diphenyl-2H-tetrazolium (MTT) assay, it was tested the effect of EC-RA on the production of TNF, IL-6 and MCP-1 by ELISA assay, on the production of nitric oxide (NO) by Griess assay and on the phagocytosis of zymosan-FITC by confocal microscopy. It was also investigated the anti-inflammatory activity of EC-RA orally administrated to animals, using the carrageenan-induced paw edema model in Holtzman rats and pulmonary inflammation model induced in C57Bl/6J mice by the intranasal instillation of LPS. We observed that EC-AE and EC-RA presented higher amounts of phenolic compounds and antioxidant activity compared to solvent control. EC-RA showed inhibitory effect on IL-6 production [Untreated Control (UNT): 122.5 ± 11.9 pg/ml vs. EC-RA at 40μg/ml: 69.9 ± 7.2 pg/ml, p<0.05], and on MCP-1 (UNT: 1879 ± 125 pg/ml vs. EC-RA at 10: 1345 ± 186 pg/ml; at 20: 1286 ± 75pg/ml; and at 40μg/ml: 804 ± 86pg/ml, p<0.05). No effect on TNF production or on phagocytic activity was observed. Cells treated with EC-RA showed lower NO production when compared to UNT (UNT: 7.61 ± 1.62μM vs EC-RA at 10: 4.13 ± 1.02μM; 20: 2.77 ± 1.08 μM; and 40 μg/ml: 2.00 ± 0.98 μM). EC-RA decreased paw edema in rats [% inhibition of edema 6h after induction: Vehicle: 20.5 ± 18.47 vs EC-RA at 430mg/kg: 60.0 ± 29.74, p<0.05], and reduced the number of leukocytes in the bronchoalveolar lavage of mice with pulmonary inflammation (Vehicle: 520.0 ± 115.4 x 103 cells/ml vs EC-RA at 430mg/kg: 221.9 ± 27 .06 x 103 cells/ml). Thus, our results suggest a biological action of EC-RA on parameters of the acute inflammatory response, possibly by inhibiting IL-6, MCP-1 and NO.porUFVJMA concessão da licença deste item refere-se ao à termo de autorização impresso assinado pelo autor, assim como na licença Creative Commons, com as seguintes condições: Na qualidade de titular dos direitos de autor da publicação, autorizo a Universidade Federal dos Vales do Jequitinhonha e Mucuri e o IBICT a disponibilizar por meio de seus repositórios, sem ressarcimento dos direitos autorais, de acordo com a Lei nº 9610/98, o texto integral da obra disponibilizada, conforme permissões assinaladas, para fins de leitura, impressão e/ou download, a título de divulgação da produção científica brasileira, e preservação, a partir desta data.info:eu-repo/semantics/openAccessPotencial anti-inflamatório e antioxidante do extrato etanólico de raízes de Eriosema campestre var. macrophyllum (Grear) Fortunatoinfo:eu-repo/semantics/publishedVersioninfo:eu-repo/semantics/doctoralThesisFarmacologia de produtos naturaisPlanta medicinalEtnofarmacologiaPharmacology of natural productsMedicinal plantEthnopharmacologyreponame:Repositório Institucional da UFVJMinstname:Universidade Federal dos Vales do Jequitinhonha e Mucuri (UFVJM)instacron:UFVJMTHUMBNAILmarcelo_henrique_fernandes_ottoni.pdf.jpgmarcelo_henrique_fernandes_ottoni.pdf.jpgGenerated Thumbnailimage/jpeg2632https://acervo.ufvjm.edu.br//bitstreams/1673a909-eeef-492f-bdb1-4101c32fe776/download2d5fdac8b8b101801928d25ed37ed467MD57falseAnonymousREADORIGINALmarcelo_henrique_fernandes_ottoni.pdfmarcelo_henrique_fernandes_ottoni.pdfapplication/pdf2468503https://acervo.ufvjm.edu.br//bitstreams/1306d436-090a-4931-b7a7-c5bd155c30ff/downloadd4163956a2d1754e64e29180ef9c8a53MD51trueAnonymousREADCC-LICENSElicense_urllicense_urltext/plain; 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