Síntese de nanoestruturas de alumina contendo o peptídeo antimicrobiano BP100 para aplicações biotecnológicas

Detalhes bibliográficos
Autor(a) principal: Torres, Lívia Mara Fontes Costa
Data de Publicação: 2018
Tipo de documento: Tese
Idioma: por
Título da fonte: Repositório Institucional da UFVJM
Texto Completo: https://acervo.ufvjm.edu.br/items/25c8a842-43e6-40d9-9878-16067ebe751d
Resumo: Nanopartículas de alumina contendo peptídeos antimicrobianos podem ser uma estratégia promissora para modelar dispositivos nanoestruturados para uso em implantes e próteses, com interesse de substituição óssea, uma vez que a contaminação por patógenos pode ser reduzida. Neste trabalho, é apresentada a síntese de nanobioestruturas de alumina em morfologia fibrosa, bem como a sua funcionalização com o peptídeo BP100 através de três diferentes estratégias de síntese: (i) via formação de uma ligação amídica entre o grupo amino de nanopartículas funcionalizadas e a cadeia lateral do resíduo de ácido glutâmico do peptídeo; (ii) através de ligação de dissulfeto entre nanopartículas funcionalizadas com o grupo tiol e cadeia lateral de resíduos de cisteína do peptídeo e (iii) por meio da reação de cicloadição 1,3-dipolar entre as nanopartículas funcionalizadas com o grupo azido e a cadeia lateral de propargilglicina do resíduo de aminoácido do peptídeo. Das três rotas de síntese desenvolvidas neste trabalho, verificou-se que o maior grau de substituição foi alcançado nas nanopartículas formadas a partir da reação de cicloadição catalisada por cobre (I). O trabalho apresenta ainda ampla caracterização estrutural e fisco-química das nanopartículas funcionalizadas empregando-se técnicas como difração de raios-x, microscopia eletrônica de transmissão, espectroscopia na região do infravermelho por transformada de Fourier, ressonância magnética nuclear e outras técnicas físico-químicas. Os dados de atividade antimicrobiana das nanobioestruturas obtidas mostram que as nanopartículas de alumina são ativas apenas após a funcionalização com o peptídeo BP100. Além disso, os estudos conformacionais por dicroísmo circular e de interação por ressonância plasmônica de superfície revelaram que as cadeias peptídicas mesmo ligadas covalentemente às nanopartículas de alumina conseguem estabelecer uma interação peptídeo-membrana, a partir da qual perturbam a estrutura da membrana microbiana exercendo assim seus mecanismos de ação.
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Neste trabalho, é apresentada a síntese de nanobioestruturas de alumina em morfologia fibrosa, bem como a sua funcionalização com o peptídeo BP100 através de três diferentes estratégias de síntese: (i) via formação de uma ligação amídica entre o grupo amino de nanopartículas funcionalizadas e a cadeia lateral do resíduo de ácido glutâmico do peptídeo; (ii) através de ligação de dissulfeto entre nanopartículas funcionalizadas com o grupo tiol e cadeia lateral de resíduos de cisteína do peptídeo e (iii) por meio da reação de cicloadição 1,3-dipolar entre as nanopartículas funcionalizadas com o grupo azido e a cadeia lateral de propargilglicina do resíduo de aminoácido do peptídeo. Das três rotas de síntese desenvolvidas neste trabalho, verificou-se que o maior grau de substituição foi alcançado nas nanopartículas formadas a partir da reação de cicloadição catalisada por cobre (I). O trabalho apresenta ainda ampla caracterização estrutural e fisco-química das nanopartículas funcionalizadas empregando-se técnicas como difração de raios-x, microscopia eletrônica de transmissão, espectroscopia na região do infravermelho por transformada de Fourier, ressonância magnética nuclear e outras técnicas físico-químicas. Os dados de atividade antimicrobiana das nanobioestruturas obtidas mostram que as nanopartículas de alumina são ativas apenas após a funcionalização com o peptídeo BP100. Além disso, os estudos conformacionais por dicroísmo circular e de interação por ressonância plasmônica de superfície revelaram que as cadeias peptídicas mesmo ligadas covalentemente às nanopartículas de alumina conseguem estabelecer uma interação peptídeo-membrana, a partir da qual perturbam a estrutura da membrana microbiana exercendo assim seus mecanismos de ação.Tese (Doutorado) – Programa de Pós-Graduação Multicêntrico em Química de Minas Gerais, Universidade Federal dos Vales do Jequitinhonha e Mucuri, 2018.Alumina nanoparticles containing antimicrobial peptides represent a promising strategy for the development of bioactive nanostructured devices for use in orthopedic and orthodontic implants, since pathogen contamination can be reduced. In this work, the synthesis of alumina nanobioestructures with fibrous morphology, as well as their functionalization with the BP100 peptide through three different synthesis strategies are presented: (i) via an amide bond formation between the amino group of functionalized nanoparticles and the side chain of the glutamic acid residue; (ii) by disulfide bonding between thiol groups of functionalized nanoparticles and the side chains of cysteine residues and (iii) through 1,3-dipolar cycloaddition reaction between azide group of nanoparticles functionalized and the side chain of propargylglycine amino acid residue. From the three synthetic routes developed in this work it was verified that the highest substitution degree was achieved in the nanoparticles formed from the copper(I)-catalyzed reaction. This work also presents an extensive set of structural and physic-chemical characterization of the functionalized nanoparticles by using techniques such as x-ray diffraction, transmission electron microscopy, Fourier transform infrared spectroscopy, nuclear magnetic resonance and other physico-chemical techniques. The antimicrobial activity assays for the nanobiostructures and alumina nanoparticles show significant activity only after functionalization with the BP100 peptide. In addition, interaction and conformational studies carried out by surface plasmon resonance and circular dichroism, respectively, revealed that peptide chains are able to establish interaction with phospholipidic bilayer in a helical conformation even covalently bound to alumina nanoparticles, from which result in microbial membrane disruption, exerting their mechanisms of action.porUFVJMA concessão da licença deste item refere-se ao à termo de autorização impresso assinado pelo autor, assim como na licença Creative Commons, com as seguintes condições: Na qualidade de titular dos direitos de autor da publicação, autorizo a Universidade Federal dos Vales do Jequitinhonha e Mucuri e o IBICT a disponibilizar por meio de seus repositórios, sem ressarcimento dos direitos autorais, de acordo com a Lei nº 9610/98, o texto integral da obra disponibilizada, conforme permissões assinaladas, para fins de leitura, impressão e/ou download, a título de divulgação da produção científica brasileira, e preservação, a partir desta data.info:eu-repo/semantics/openAccessSíntese de nanoestruturas de alumina contendo o peptídeo antimicrobiano BP100 para aplicações biotecnológicasinfo:eu-repo/semantics/publishedVersioninfo:eu-repo/semantics/doctoralThesisNanobioestruturaNanopartículaAluminaPeptídeo antimicrobianoBP100NanobiostructuredNanoparticleAntimicrobial peptidereponame:Repositório Institucional da UFVJMinstname:Universidade Federal dos Vales do Jequitinhonha e Mucuri (UFVJM)instacron:UFVJMTHUMBNAILlivia_mara_fontes_costa_torres.pdf.jpglivia_mara_fontes_costa_torres.pdf.jpgGenerated Thumbnailimage/jpeg2668https://acervo.ufvjm.edu.br//bitstreams/c4d56dec-2382-42b7-9f1e-f8db37ea3176/download8ebded1a7404020daeeb6890e7fe6b39MD57falseAnonymousREADORIGINALlivia_mara_fontes_costa_torres.pdflivia_mara_fontes_costa_torres.pdfapplication/pdf6645843https://acervo.ufvjm.edu.br//bitstreams/40043f39-c95a-428b-889c-76bcec3a129b/downloadbcc3b8b7848e3ef7e7295f07e08d903dMD51trueAnonymousREADCC-LICENSElicense_urllicense_urltext/plain; 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