Leishmania infantum chagasi: estudo da atividade enzimática de uma Nucleotídeo Trifosfato Difosfohidrolase-2 (NTPDase-2) e clonagem de uma possível Serine/Arginine Protein Kinase (SRPK).

• Autor(a) principal: Abreu, Emílio Santana de
• Data de Publicação: 2019
• Tipo de documento: Dissertação
• Idioma: por
• Título da fonte: LOCUS Repositório Institucional da UFV
• Texto Completo: https://locus.ufv.br//handle/123456789/28659
• topic: Enzimas; Leishmaniose; Biologia Molecular

A leishmaniose é uma doença causada por protozoários do gênero leishmania sendo transmitidas por flebotomíneos. A doença pode se manifestar com lesões na pele e mucosas do indivíduo infectado ou pode atingir órgãos internos (leishmaniose visceral). A Leishmania infantum chagasi é um dos protozoários causadores de leishmaniose visceral com importante manifestação no Brasil. Neste contexto, o estudo de enzimas quinases como alvos de ação de medicamentos proporciona meios racionais para a pesquisa de novas drogas. Neste trabalho foram estudadas duas enzimas, uma apirase, NTPDase-2 e uma quinase SRPK de L. infantum chagasi. O objetivo deste estudo é padronizar a renaturação da LicNTPDase-2 e avaliar a atividade da enzima frente a diferentes nucleotídeos (ADP, UDP, GDP e ATP), verificar melhor atividade frente a diferentes pHs, temperaturas de 25ºC e 37ºC e verificar variações de sua estabilidade utilizando thermal shift. Também foi realizada a clonagem da SRPK de Leihsmania infantum chagasi para a realização de estudos bioquímicos e biológicos. Assim, neste estudo foi possível identificar que os tampões de 3, 4, 5 e 6 apresentaram melhora atividade enzimática, comparado com os tampões 1, 2 e 7, após 24 horas de renaturação de 2 ºC a 8 ºC. Dentre os tampões o tampão 4 apresentou o maior shift. Não ocorreu diferença significativa nos testes realizados a 25ºC e a 37ºC, assim como no teste para avalição de pH. Para as análises de nucleotídeos o UDP, GDP e ADP apresentaram melhora na atividade quando comparados com o ATP. Foi possível realizar a clonagem de LicSRPK predita nas análises de bioinformática em Leishmania infantum chagasi, sendo importante agora a realização de sequenciamento e ampliação de seus estudos.