Serine/arginine protein kinase (SRPK) inhibition as a potential therapeutic strategy against leukemia cells

• Autor(a) principal: Siqueira, Raoni Pais
• Data de Publicação: 2018
• Tipo de documento: Tese
• Idioma: eng
• Título da fonte: LOCUS Repositório Institucional da UFV
• Texto Completo: http://www.locus.ufv.br/handle/123456789/18831
• topic: Inibidor de quinase; Leucemia; Serine/arginine; Serine/arginine protein kinase; Biologia Molecular

Serine/Arginine protein kinases (SRPKs) são componentes chave da maquinaria de splicing através da regulação por fosforilação das proteínas SR, as quais são cruciais para a seleção dos sítios de splicing alternativo. Entretanto, as SRPKs são frequentemente encontradas superexpressas ou com atividade alterada em diversos tipos de cânceres, inclusive em leucemias. Dessa forma, a busca por pequenas moléculas inibidores destas quinases são de potencial interesse para o delineamento de novas estratégias terapêuticas. Nesta tese, descreve­se a avaliação da inibição farmacológica de SRPKs pelo inibidor seletivo N­(2­ (piperidin­1­il)­5­(trifluorometil)fenil)isonicotinamida (SRPIN340) sobre a viabilidade de linhagens leucêmicas linfoides e mieloides. Além de mostrar atividade citotóxica significativa, o efeito dos tratamentos na regulação da fosforilação das proteínas SR e na alteração da expressão dos genes MAP2K1, MAP2K2, VEGF e FAS foram também identificados. Além disso, a inibição farmacológica de SRPKs foi capaz de desencadear eventos precoces e tardios de apoptose. Por último, estudos de fluorescência intrínseca de triptofano, docking molecular e dinâmica molecular foram analisados a fim de se obter informações estruturais acerca do complexo SRPK/SRPIN340. No segundo estudo, é descrita a síntese de uma série de vinte e duas trifluorometil arilamidas baseadas na estrutura molecular do SRPIN340, além da avaliação dos seus efeitos antileucêmicos. Alguns dos derivados apresentaram efeitos citotóxicos superiores contra linhagens de leucemia mieloide e linfoide em comparação com o SRPIN340. Em particular, os compostos N­(2­(4­bromofenilamino)­5­(trifluorometil)fenil)­2­cloronicotinamida (24), N­(2­(4­bromofenilamino)­5­(trifluorometil)fenil)nicotinamida (30), e N­(2­(4­ bromofenilamino)­5­(trifluorometil)fenil)benzamida (36) apresentaram valores de IC 50 na faixa de 6,0 – 35,7 μM (μmol L ­1 ). Estes três compostos também foram capazes de desencadear eventos de apoptose e autofagia, além de exibir efeito sinergístico em combinação com o agente quimioterápico vincristina. Além disso, o composto 30 se mostrou mais eficiente que o SRPIN340 na diminuição da fosforilação das proteínas SR bem como na diminuição da expressão de isoformas oncogênicas dos genes MAP2K1, MAP2K2, VEGF, e RON. Tomados conjuntamente, estes resultados sugerem que inibidores de SRPKs são capazes de suprimir o crescimento celular através da regulação dos eventos de splicing e podem ser considerados como ponto de partida importante para desenvolvimento de novas estratégias terapêuticas contra leucemias e outros tipos de cânceres.