Desenvolvimento e validação de um teste rápido indireto para diagnóstico de COVID 19 usando proteínas quiméricas

• Autor(a) principal: Lopes, Letícia Alves
• Data de Publicação: 2022
• Tipo de documento: Dissertação
• Idioma: por
• Título da fonte: LOCUS Repositório Institucional da UFV
• Texto Completo: https://locus.ufv.br//handle/123456789/30443; https://doi.org/10.47328/ufvbbt.2022.711
• topic: COVID-19 (Doença) - Diagnóstico; Métodos rápidos (Microbiologia); Marcadores bioquímicos; Biologia Molecular

SARS-CoV-2 foi o nome dado ao vírus responsável pela maior pandemia deste século. A doença causada por este vírus foi denominada COVID-19. Esta situação demonstrou a dependência do Brasil quanto a insumos para o combate à pandemia. Desta forma, devido à escassez de testes nacionais e à necessidade de importação de insumos para fazer kits de diagnóstico, nosso grupo de pesquisa iniciou o desenvolvimento de kit de diagnóstico rápido nacional para COVID-19. Para isso, foram desenhadas duas proteínas quiméricas contendo regiões que codificam as proteínas N e S, que são diretamente ligadas à antigenicidade e infecciosidade do vírus. Tais proteínas foram denominadas Quimera e Quimera Gold. Neste trabalho, foram realizados testes com propósito produzir, estabilizar e fazer a validação destas proteínas como antígenos no diagnóstico indireto de COVID-19. As proteínas purificadas foram validadas por ensaio de ELISA e utilizadas em teste rápido imunocromatográfico. A proteína Quimera teve baixa adsorção ao ouro coloidal, utilizado para revelar o teste rápido. Ao final, foi produzido um protótipo de kit de diagnóstico rápido, no qual verificamos a capacidade desses antígenos em detectar a presença de anticorpos IgM e IgG em amostras de pacientes com COVID-19. Considerando o conjunto de amostras biológicas, obteve-se uma sensibilidade igual a 57% e especificidade de 91%, o que representa concordância geral de 77,8% em relação ao RT-PCR, para IgG e IgM. Já em comparação com outros testes rápidos disponíveis comercialmente no Brasil e regularizados na Anvisa, o mesmo apresentou co- sensibilidade de 78% e co-especificidade de 100%, o que representa 93% de concordância geral. Com estes resultados esperamos contribuir para a nacionalização de insumos e de kits de diagnóstico indireto de COVID-19, proporcionando uma emancipação para o Brasil no que diz respeito ao diagnostico, e promovendo para a sociedade uma melhor qualidade de vida. Palavras-chave: COVID 19. Teste rápido indireto. LFIA. Quimera. Quimera Gold.