Isolamento, expansão e caracterização de células-tronco do tecido adiposo de equinos

Detalhes bibliográficos
Autor(a) principal: Bravo, Martha de Oliveira
Data de Publicação: 2012
Outros Autores: Moraes, Júlia Miranda de, Dumont, Cinthia Beatriz da Silva, Filgueiras, Richard Rocha, Hashimoto, Hetielle Harumi, Godoy, Roberta Ferro de
Tipo de documento: Artigo
Idioma: por
Título da fonte: Repositório Institucional da UnB
Texto Completo: http://repositorio.unb.br/handle/10482/17245
Resumo: Devido aos excelentes resultados obtidos em pesquisas com células-tronco e suas aplicabilidades promissoras, a terapia com estas células encontra-se em momento de máxima ascensão, estimulando assim, inúmeras pesquisas. A fim de padronizar o cultivo e avaliar a viabilidade de células-tronco mesenquimais do tecido adiposo de equinos visando a terapia celular nesta espécie, conduziu-se um estudo de isolamento, cultivo e caracterização de tais células. Para tal, foi realizada coleta de tecido adiposo de cinco equinos sem raça definida, com aproximadamente cinco anos. Em seguida, o tecido foi refrigerado e transportado ao laboratório, onde foi realizado o protocolo de cultivo celular durante aproximadamente 14 dias. Após o término deste procedimento, uma alíquota de células foi encaminhada para a realização do teste de quantificação e viabilidade celular com Azul de Tripan 1%, sendo outra porção destinada à confirmação da linhagem de célula tronco mesenquimal por meio de imunofenotipagem com os anticorpos monoclonais anti-CD11b, anti-CD45, anti-CD90 e anti-CD105, e de diferenciação celular em linhagem condrogênica, adipogênica e osteogênica. Houve diferenciação celular e marcação positiva dos antígenos de superfície CD44 e MHCI e negativa dos CD45 e CD11b, confirmando-se a origem mesenquimal e não hematopoiética. A viabilidade celular média obtida das células-tronco mesenquimais foi de 92,83% considerada satisfatória. Portanto, a utilização deste protocolo para obtenção de células-tronco mesenquimais do tecido adiposo se mostrou uma opção confiável e viável para utilização na terapia celular em equinos. _________________________________________________________________________________ ABSTRACT
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spelling Bravo, Martha de OliveiraMoraes, Júlia Miranda deDumont, Cinthia Beatriz da SilvaFilgueiras, Richard RochaHashimoto, Hetielle HarumiGodoy, Roberta Ferro de2014-12-05T10:10:46Z2014-12-05T10:10:46Z2012BRAVO, Martha de Oliveira, et al. Isolamento, expansão e caracterização de células-tronco do tecido adiposo de equinos. Ars Veterinaria, Jaboticabal, SP, v. 28, n. 2, p. 66-74, 2012. Disponível em: <http://www.arsveterinaria.org.br/index.php/ars/about/submissions#copyrightNotice>. Acesso em: 14 ago. 2014.http://repositorio.unb.br/handle/10482/17245Devido aos excelentes resultados obtidos em pesquisas com células-tronco e suas aplicabilidades promissoras, a terapia com estas células encontra-se em momento de máxima ascensão, estimulando assim, inúmeras pesquisas. A fim de padronizar o cultivo e avaliar a viabilidade de células-tronco mesenquimais do tecido adiposo de equinos visando a terapia celular nesta espécie, conduziu-se um estudo de isolamento, cultivo e caracterização de tais células. Para tal, foi realizada coleta de tecido adiposo de cinco equinos sem raça definida, com aproximadamente cinco anos. Em seguida, o tecido foi refrigerado e transportado ao laboratório, onde foi realizado o protocolo de cultivo celular durante aproximadamente 14 dias. Após o término deste procedimento, uma alíquota de células foi encaminhada para a realização do teste de quantificação e viabilidade celular com Azul de Tripan 1%, sendo outra porção destinada à confirmação da linhagem de célula tronco mesenquimal por meio de imunofenotipagem com os anticorpos monoclonais anti-CD11b, anti-CD45, anti-CD90 e anti-CD105, e de diferenciação celular em linhagem condrogênica, adipogênica e osteogênica. Houve diferenciação celular e marcação positiva dos antígenos de superfície CD44 e MHCI e negativa dos CD45 e CD11b, confirmando-se a origem mesenquimal e não hematopoiética. A viabilidade celular média obtida das células-tronco mesenquimais foi de 92,83% considerada satisfatória. Portanto, a utilização deste protocolo para obtenção de células-tronco mesenquimais do tecido adiposo se mostrou uma opção confiável e viável para utilização na terapia celular em equinos. _________________________________________________________________________________ ABSTRACTDue to the excellent results of stem cell research and its promising applicability, the therapy with these cells is undergoing a period of maximum visibility and numerous studies. In order to standardize the culture and to evaluate the viability of mesenchymal stem cells from adipose tissue of horses, aiming at cell therapy in this species, a study of isolation, expansion and characterization was conducted. For this, adipose tissue was collected from five crossbred horses aged approximately five years old. Subsequently, the tissue was immediately refrigerated and transported to the laboratory where the isolation and culture protocol, lasting approximately 14 days, was performed. After the end of this procedure, a cell pellet was obtained and resuspended in PBS. A portion of material obtained by centrifugation was collected and the cells were stained with 1% Trypan Blue for quantification and assessment of cell viability. Another sample was collected to confirm the lineage of stem cells by flow cytometry using monoclonal against the surface markers CD11b, CD45, CD90 and CD105; and by cellular differentiation assays to chondrogenic, adipogenic and osteogenic lineages. The isolated cells differentiated in the three lineages and showed positive staining for CD90 and CD105 and negative staining for CD11b and CD45, confirming the isolation of stem cells of mesenchymal origin. The average cell viability obtained was 92.83% and thus satisfactory. Therefore, the use of this protocol to obtain mesenchymal stem cells from adipose tissue was deemed to be a promising option for cell therapy in horses.Faculdade de Agronomia e Medicina Veterinária (FAV)Faculdade de Ciências Agrárias e Veterinárias - FCAVArs Veterinaria - Permite-se a reprodução total ou parcial dos trabalhos, desde que seja indicada explicitamente a fonte de referência. Fonte: http://www.arsveterinaria.org.br/index.php/ars/about/submissions#copyrightNotice. Acesso em: 14 ago. 2014.info:eu-repo/semantics/openAccessIsolamento, expansão e caracterização de células-tronco do tecido adiposo de equinosIsolation, expansion, and characterization of equine adipose-derived stem cellsinfo:eu-repo/semantics/publishedVersioninfo:eu-repo/semantics/articleCélulas-tronco - veterináriaCitometria de fluxoEquino - morfologiaporreponame:Repositório Institucional da UnBinstname:Universidade de Brasília (UnB)instacron:UNBORIGINALARTIGO_IsolamentoExpansaoCaracterizacao.pdfARTIGO_IsolamentoExpansaoCaracterizacao.pdfapplication/pdf618025http://repositorio2.unb.br/jspui/bitstream/10482/17245/1/ARTIGO_IsolamentoExpansaoCaracterizacao.pdfb60b9cd025f2fc1d624cf2b1503c00f4MD51open accessLICENSElicense.txtlicense.txttext/plain277http://repositorio2.unb.br/jspui/bitstream/10482/17245/2/license.txt259ee5a64d0ea05679d99de4ea1fde42MD52open access10482/172452023-09-01 13:21:22.95open accessoai:repositorio2.unb.br:10482/17245TGljZW5zZSBncmFudGVkIGJ5IExhcmlzc2EgU3RlZmFuZSBWaWVpcmEgUm9kcmlndWVzIChsYXJpc3Nhcm9kcmlndWVzQGJjZS51bmIuYnIpIG9uIDIwMTQtMDgtMTRUMTc6MTE6MTlaIChHTVQpOgoKU3VibWlzc8OjbyBlZmV0aXZhZGEgcG9yIGludGVncmFudGUgZGEgZXF1aXBlIGRvIFJlcG9zaXTDs3JpbyBJbnN0aXR1Y2lvbmFsIGRhIFVuQiBkZSBhY29yZG8gY29tIGxpY2Vuw6dhIGNvbmNlZGlkYSBwZWxvIGF1dG9yIGUvb3UgZGV0ZW50b3IgZG9zIGRpcmVpdG9zIGF1dG9yYWlzLg==Biblioteca Digital de Teses e DissertaçõesPUBhttps://repositorio.unb.br/oai/requestopendoar:2023-09-01T16:21:22Repositório Institucional da UnB - Universidade de Brasília (UnB)false
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