Caracterização química de inibidores de serino proteases isoladas a partir da secreção cutânea de Pithecopus (Phyllomedusa) azureus (Amphibia, Anura, Phyllomedusidae)

Detalhes bibliográficos
Autor(a) principal: Magalhães, Ana Carolina Martins
Data de Publicação: 2016
Tipo de documento: Dissertação
Idioma: por
Título da fonte: Repositório Institucional da UnB
Texto Completo: https://repositorio.unb.br/handle/10482/36169
Resumo: Dissertação (mestrado)—Fundação Universidade de Brasília, Programa de Pós-Graduação em Biologia Animal, 2017.
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spelling Magalhães, Ana Carolina MartinsPires Júnior, Osmindo Rodrigues2020-01-17T21:50:12Z2020-01-17T21:50:12Z2020-01-172016-02-17MAGALHÃES, Ana Carolina Martins. Caracterização química de inibidores de serino proteases isoladas a partir da secreção cutânea de Pithecopus (Phyllomedusa) azureus (Amphibia, Anura, Phyllomedusidae). 2016. 61 f., il. Dissertação (Mestrado em Biologia Animal)—Universidade de Brasília, Brasília, 2017.https://repositorio.unb.br/handle/10482/36169Dissertação (mestrado)—Fundação Universidade de Brasília, Programa de Pós-Graduação em Biologia Animal, 2017.A família Phyllomedusidae se destaca entre os anfíbios por ser uma rica fonte de peptídeos antimicrobianos (PAMs), e esses peptídeos estão agrupadas em famílias de acordo com a similaridade: Dermaseptinas, Phylloseptinas, Plasticininas, Dermatoxinas e Phylloxinas. Além dos peptídeos antimicrobianos, existe outra classe de peptídeos importantes como os inibidores de proteases, que atuam ligando-se às proteases impedindo a sua função, e inativando-as. A secreção cutânea de Pithecopus (Phyllomedusa) azureus tem sido bastante investigada no que diz respeito à presença de compostos antimicrobianos, no entanto pouco se sabe a respeito de outras classes de moléculas presentes na secreção deste animal. Neste trabalho foi isolado um inibidor de tripsina a partir da secreção cutânea de P. azureus. Os resultados apresentaram um potente inibidor de tripsina (Ki=1nM), e inibição do tipo competitiva, que apresenta alta similaridade com PSKP-I de P. sauvagii. Esta proteína foi isolada e caracterizada por HPLC em duas etapas e sequenciamento de novo. A massa molecular do componente principal foi estabelecida por LC-MS/MS como 5898 Da. Além disso, este inibidor se mostrou bastante estável em diversos pHs e temperaturas apesar de perder atividade mesmo em baixas concentrações de DTT; no entanto, não apresentou atividade hemaglutinante ou antitumoral nas concentrações testadas. Este novo inibidor isolado a partir da secreção cutânea de um anfíbio amplia o conhecimento a respeito desta rica fonte de compostos com amplo potencial biotecnológico.Conselho Nacional de Desenvolvimento Científico e Tecnológico (CNPq).The Phyllomedusidae family stands out among amphibians as a rich source of antimicrobial peptides (AMPs), and these peptides are grouped into families according to similarity: Dermaseptins, Phylloseptins, Plasmininins, Dermatoxins and Phyllotoxins. In addition to antimicrobial peptides, there is another class of important peptides, such as protease inhibitors, that act by binding to proteases, preventing their function, and inactivating them. The cutaneous secretion of Pithecopus (Phyllomedusa) azureus has been well investigated with respect to the presence of antimicrobial compounds, however little is known about other classes of molecules present in the secretion of this animal. In this work, a trypsin inhibitor was isolated from cutaneous secretion of P. azureus. The results showed a potent inhibitor of trypsin (Ki = 1nM), and a competitive inhibition type, which shows high similarity with PSKP-I of P. sauvagii. This protein was isolated and characterized by two step HPLC and de novo sequencing. The molecular mass of the major component was established by LC-MS / MS as 5898 Da. In addition, this inhibitor proved to be quite stable at various pHs and temperatures despite losing activity even at low concentrations of DTT; However, did not present hemagglutinating or antitumor activity at the tested concentrations. This new inhibitor isolated from the cutaneous secretion of an amphibian increases the knowledge about this rich source of compounds with broad biotechnological potential.Instituto de Ciências Biológicas (IB)Programa de Pós-Graduação em Biologia AnimalA concessão da licença deste item refere-se ao termo de autorização impresso assinado pelo autor com as seguintes condições: Na qualidade de titular dos direitos de autor da publicação, autorizo a Universidade de Brasília e o IBICT a disponibilizar por meio dos sites www.bce.unb.br, www.ibict.br, http://hercules.vtls.com/cgi-bin/ndltd/chameleon?lng=pt&skin=ndltd sem ressarcimento dos direitos autorais, de acordo com a Lei nº 9610/98, o texto integral da obra disponibilizada, conforme permissões assinaladas, para fins de leitura, impressão e/ou download, a título de divulgação da produção científica brasileira, a partir desta data.info:eu-repo/semantics/openAccessCaracterização química de inibidores de serino proteases isoladas a partir da secreção cutânea de Pithecopus (Phyllomedusa) azureus (Amphibia, Anura, Phyllomedusidae)info:eu-repo/semantics/publishedVersioninfo:eu-repo/semantics/masterThesisAnfíbioPithecopus azureusPeptídeos antimicrobianosInibidores da tripisinaSecreção cutâneaporreponame:Repositório Institucional da UnBinstname:Universidade de Brasília (UnB)instacron:UNBORIGINAL2017_AnaCarolinaMartinsMagalhães.pdf2017_AnaCarolinaMartinsMagalhães.pdfapplication/pdf1303328http://repositorio2.unb.br/jspui/bitstream/10482/36169/1/2017_AnaCarolinaMartinsMagalh%c3%a3es.pdfc749c0c473cc801965a54378b0e9745cMD51open accessLICENSElicense.txtlicense.txttext/plain671http://repositorio2.unb.br/jspui/bitstream/10482/36169/2/license.txtbacfee268cc5d4f6aaa2e6e0066d38f5MD52open access10482/361692024-01-31 14:14:14.466open accessoai:repositorio2.unb.br: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Biblioteca Digital de Teses e DissertaçõesPUBhttps://repositorio.unb.br/oai/requestopendoar:2024-01-31T17:14:14Repositório Institucional da UnB - Universidade de Brasília (UnB)false
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