Papel da emerina na biologia de células C2C12

Detalhes bibliográficos
Autor(a) principal: Buitrago Mejia, Angela Julieth, 1992-
Data de Publicação: 2019
Tipo de documento: Dissertação
Idioma: por
Título da fonte: Biblioteca Digital de Teses e Dissertações da Universidade Estadual de Campinas (UNICAMP)
Texto Completo: https://hdl.handle.net/20.500.12733/1639843
Resumo: Orientador: Silvio Roberto Consonni
id UNICAMP-30_0131e0d0a839b858f7113ef12c8ca0e4
oai_identifier_str oai::1157154
network_acronym_str UNICAMP-30
network_name_str Biblioteca Digital de Teses e Dissertações da Universidade Estadual de Campinas (UNICAMP)
repository_id_str
spelling Papel da emerina na biologia de células C2C12Emerina's role in C2C12 cell biologyDistrofia muscular de Emery-DreifussCitoesqueletoFilamentos de actinaMembrana nuclearMioblastosMuscular dystrophy, Emery-DreifussCytoskeletonActin filamentNuclear membranesMyoblastsOrientador: Silvio Roberto ConsonniDissertação (mestrado) - Universidade Estadual de Campinas, Instituto de BiologiaResumo: Em células musculares, a transdução de sinais mecânicos da membrana sarcoplasmática ao núcleo e regulação da arquitetura nuclear são dependentes do complexo de ligação do nucleoesqueleto e citoesqueleto (LINC, do inglês linker of nucleoskeleton and cytoskeleton) ¿ composto pelas proteínas integrais das membranas interna e externa do envoltório nuclear ¿ que conecta e transmite as forças mecânicas do citoesqueleto ao núcleo através do envoltório. Os principais componentes do complexo LINC na membrana externa do envoltório nuclear são as proteínas nesprinas que se ligam ao citoesqueleto e ainda interagem com a porção C-terminal das proteínas domínio-SUN e Emerina na membrana interna do envoltório nuclear. Este conjunto de proteínas interage com as laminas A/C, que constituem a lâmina nuclear em contato com a cromatina. Assim, mutações nos genes que codificam as proteínas laminas A/C e Emerina resultam em doenças de espectro amplo, mas com fenótipos distintos, comumente referidas como laminopatias (ou envelopatias) nucleares, tais como: distrofia muscular de Emery-Dreifuss, distrofia muscular das cinturas e distrofia muscular congênita. A distrofia muscular de Emery-Dreifuss ligada ao X, causada por mutações no gene EMD que codifica a Emerina, clinicamente é caracterizada pelo enfraquecimento do músculo estriado esquelético progressivo, cardiomiopatia dilatada, arritmias cardíacas e contratura dos tendões. Assim, tendo em vista que a Emerina está envolvida em muitos processos celulares e intranucleares por meio de interações com vários parceiros moleculares, nosso estudo buscou compreender o papel da Emerina na biologia dos mioblastos C2C12. Para resolver essa questão, nós usamos o modelo de cultura celular in vitro e tecnologia de silenciamento gênico por shRNA para suprimir a expressão de Emerina e avaliar a morfologia das células C2C12 e expressão de genes relacionados ao citoesqueleto e fatores de transcrição. Nossa hipótese indica que a Emerina, quando ausente ou mutada poderia alterar o funcionamento, morfologia e composição dos mioblastos C2C12. A primeira parte deste estudo demostrou que o silenciamento gênico estabeleceu satisfatoriamente um modelo de estudo corroborado pelos resultados de imunofluorescência, microscopia eletrônica de transmissão, quantificação de área nuclear e taxa de proliferação entre os grupos shGFP (controle) e shEMD. A segunda parte deste estudo demonstrou variação na expressão de genes relacionados diretamente à interação com Emerina e ao citoesqueleto, o que corrobora a participação da Emerina na dinâmica celular de mecanotransdução. Em conclusão, nosso trabalho forneceu dados científicos de morfologia e expressão gênica que permitiram analisar o sucesso do silenciamento gênico e alterações fenotípicas dos mioblastos shEMD em estudo integrado entre alterações no núcleo celular e seus efeitos celulares e moleculares. Como perspectiva futura, por meio do uso deste modelo celular, tem-se a possibilidade de se compreender os efeitos da ausência de Emerina no ciclo celular de mioblastos e efeitos na sua diferenciaçãoAbstract: In muscle cells, the transduction of mechanical signals from the sarcoplasmic reticulum membrane to the nucleus and regulation of nuclear architecture are dependent on the linker of nucleoskeleton and cytoskeleton (LINC) complex - composed of the integral proteins within the inner and the outer nuclear membranes ¿ that connects and transmits the mechanical forces of the cytoskeleton to the nucleus through the nuclear envelope. The main components of the LINC complex on the outer membrane of the nuclear envelope are the Nesprin proteins that bind to the cytoskeleton and still interact with the C-terminal portion of the SUN-domain and Emerin proteins on the inner membrane of the nucleus. This set interacts with lamin A/C, proteins that constitute the nuclear lamin in contact with the chromatin. Thus, mutations in the genes which encode the lamin A/C and Emerin proteins result in broad spectrum diseases, but with distinct phenotypes, commonly referred to as nuclear laminopathies (or envelopathies), such as: Emery-Dreifuss muscular dystrophy, limb-girdle muscular dystrophy and congenital muscular dystrophy. Emery¿Dreifuss muscular dystrophy linked to X, caused by mutations in the EMD gene that encodes Emerin, is clinically characterized by weakening of progressive skeletal striated muscle, dilated cardiomyopathy, cardiac arrhythmias, and tendon contracture. Thus, because Emerin is involved in many cellular and intranuclear processes through interactions with several molecular partners, our study sought to understand the role of Emerin in the biology of C2C12 myoblasts. To address this issue, we used the in vitro cell culture model and shRNA gene silencing technology to suppress emerin expression and to evaluate C2C12 cell morphology and expression of genes related to cytoskeleton and transcription factors. Our hypothesis indicates that Emerin, when it is absent or mutated, could alter the operation, morphology and composition of C2C12 myoblasts. The first part of this study demonstrated that gene silencing satisfactorily established a study model corroborated by the results of immunofluorescence, transmission electron microscopy, nuclear area quantification, and proliferation rate between the shGFP (control) and shEMD groups. The second part of this study demonstrated variation in the expression of genes directly related to the interaction with emerin and the cytoskeleton, which corroborates the participation of Emerin in the cellular dynamics of mechanotransduction. In conclusion, our work provided scientific data on morphology and gene expression that allowed us to analyze the success of gene silencing and phenotypic changes of shEMD myoblasts in an integrated study between alterations in the cell nucleus and its cellular and molecular effects. As a future perspective, through the use of this cellular model, one has the possibility to understand the effects of the absence of Emerin in the cell cycle of myoblasts and effects in its differentiationMestradoBiologia CelularMestra em Biologia Celular e EstruturalCAPES001CNPQ169732/2017-7[s.n.]Consonni, Sílvio Roberto, 1986-Marin, Talita MiguelGonçalves, Danieli CristinaUniversidade Estadual de Campinas (UNICAMP). Instituto de BiologiaPrograma de Pós-Graduação em Biologia Celular e EstruturalUNIVERSIDADE ESTADUAL DE CAMPINASBuitrago Mejia, Angela Julieth, 1992-20192019-07-30T00:00:00Zinfo:eu-repo/semantics/publishedVersioninfo:eu-repo/semantics/masterThesisapplication/pdf1 recurso online ( 79 p.) : il., digital, arquivo PDF.https://hdl.handle.net/20.500.12733/1639843BUITRAGO MEJIA, Angela Julieth. Papel da emerina na biologia de células C2C12. 2019. 1 recurso online ( 79 p.) Dissertação (mestrado) - Universidade Estadual de Campinas, Instituto de Biologia, Campinas, SP. Disponível em: https://hdl.handle.net/20.500.12733/1639843. Acesso em: 3 set. 2024.https://repositorio.unicamp.br/acervo/detalhe/1157154Requisitos do sistema: Software para leitura de arquivo em PDFporreponame:Biblioteca Digital de Teses e Dissertações da Universidade Estadual de Campinas (UNICAMP)instname:Universidade Estadual de Campinas (UNICAMP)instacron:UNICAMPinfo:eu-repo/semantics/openAccess2020-10-26T16:17:49Zoai::1157154Biblioteca Digital de Teses e DissertaçõesPUBhttp://repositorio.unicamp.br/oai/tese/oai.aspsbubd@unicamp.bropendoar:2020-10-26T16:17:49Biblioteca Digital de Teses e Dissertações da Universidade Estadual de Campinas (UNICAMP) - Universidade Estadual de Campinas (UNICAMP)false
dc.title.none.fl_str_mv Papel da emerina na biologia de células C2C12
Emerina's role in C2C12 cell biology
title Papel da emerina na biologia de células C2C12
spellingShingle Papel da emerina na biologia de células C2C12
Buitrago Mejia, Angela Julieth, 1992-
Distrofia muscular de Emery-Dreifuss
Citoesqueleto
Filamentos de actina
Membrana nuclear
Mioblastos
Muscular dystrophy, Emery-Dreifuss
Cytoskeleton
Actin filament
Nuclear membranes
Myoblasts
title_short Papel da emerina na biologia de células C2C12
title_full Papel da emerina na biologia de células C2C12
title_fullStr Papel da emerina na biologia de células C2C12
title_full_unstemmed Papel da emerina na biologia de células C2C12
title_sort Papel da emerina na biologia de células C2C12
author Buitrago Mejia, Angela Julieth, 1992-
author_facet Buitrago Mejia, Angela Julieth, 1992-
author_role author
dc.contributor.none.fl_str_mv Consonni, Sílvio Roberto, 1986-
Marin, Talita Miguel
Gonçalves, Danieli Cristina
Universidade Estadual de Campinas (UNICAMP). Instituto de Biologia
Programa de Pós-Graduação em Biologia Celular e Estrutural
UNIVERSIDADE ESTADUAL DE CAMPINAS
dc.contributor.author.fl_str_mv Buitrago Mejia, Angela Julieth, 1992-
dc.subject.por.fl_str_mv Distrofia muscular de Emery-Dreifuss
Citoesqueleto
Filamentos de actina
Membrana nuclear
Mioblastos
Muscular dystrophy, Emery-Dreifuss
Cytoskeleton
Actin filament
Nuclear membranes
Myoblasts
topic Distrofia muscular de Emery-Dreifuss
Citoesqueleto
Filamentos de actina
Membrana nuclear
Mioblastos
Muscular dystrophy, Emery-Dreifuss
Cytoskeleton
Actin filament
Nuclear membranes
Myoblasts
description Orientador: Silvio Roberto Consonni
publishDate 2019
dc.date.none.fl_str_mv 2019
2019-07-30T00:00:00Z
dc.type.status.fl_str_mv info:eu-repo/semantics/publishedVersion
dc.type.driver.fl_str_mv info:eu-repo/semantics/masterThesis
format masterThesis
status_str publishedVersion
dc.identifier.uri.fl_str_mv https://hdl.handle.net/20.500.12733/1639843
BUITRAGO MEJIA, Angela Julieth. Papel da emerina na biologia de células C2C12. 2019. 1 recurso online ( 79 p.) Dissertação (mestrado) - Universidade Estadual de Campinas, Instituto de Biologia, Campinas, SP. Disponível em: https://hdl.handle.net/20.500.12733/1639843. Acesso em: 3 set. 2024.
url https://hdl.handle.net/20.500.12733/1639843
identifier_str_mv BUITRAGO MEJIA, Angela Julieth. Papel da emerina na biologia de células C2C12. 2019. 1 recurso online ( 79 p.) Dissertação (mestrado) - Universidade Estadual de Campinas, Instituto de Biologia, Campinas, SP. Disponível em: https://hdl.handle.net/20.500.12733/1639843. Acesso em: 3 set. 2024.
dc.language.iso.fl_str_mv por
language por
dc.relation.none.fl_str_mv https://repositorio.unicamp.br/acervo/detalhe/1157154
Requisitos do sistema: Software para leitura de arquivo em PDF
dc.rights.driver.fl_str_mv info:eu-repo/semantics/openAccess
eu_rights_str_mv openAccess
dc.format.none.fl_str_mv application/pdf
1 recurso online ( 79 p.) : il., digital, arquivo PDF.
dc.publisher.none.fl_str_mv [s.n.]
publisher.none.fl_str_mv [s.n.]
dc.source.none.fl_str_mv reponame:Biblioteca Digital de Teses e Dissertações da Universidade Estadual de Campinas (UNICAMP)
instname:Universidade Estadual de Campinas (UNICAMP)
instacron:UNICAMP
instname_str Universidade Estadual de Campinas (UNICAMP)
instacron_str UNICAMP
institution UNICAMP
reponame_str Biblioteca Digital de Teses e Dissertações da Universidade Estadual de Campinas (UNICAMP)
collection Biblioteca Digital de Teses e Dissertações da Universidade Estadual de Campinas (UNICAMP)
repository.name.fl_str_mv Biblioteca Digital de Teses e Dissertações da Universidade Estadual de Campinas (UNICAMP) - Universidade Estadual de Campinas (UNICAMP)
repository.mail.fl_str_mv sbubd@unicamp.br
_version_ 1809189166217428992

Registros relacionados