Estudo da periodontite crônica e da exposição de LPS de P. Gingivalis a fibroblastos gengivais e queratinócitos, na modulação da expressão de genes reguladores de eventos epigenéticos

Detalhes bibliográficos
Autor(a) principal: Camargo, Gláucia de 1985-
Data de Publicação: 2012
Tipo de documento: Dissertação
Idioma: por
Título da fonte: Biblioteca Digital de Teses e Dissertações da Universidade Estadual de Campinas (UNICAMP)
Texto Completo: https://hdl.handle.net/20.500.12733/1617734
Resumo: Orientador: Marcelo Rocha Marques
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A presença de alguns tipos de lipopolissacarídeos (LPS), derivados de bactérias no sítio periodontal doente, pode iniciar uma sinalização por meio das células do tecido gengival, que culminará com um microambiente com diferentes células do sistema imune e com uma alteração no padrão de expressão de citocinas inflamatórias. Já foi evidenciado que no tecido gengival de pacientes com periodontite crônica, genes que codificam receptores celulares para o LPS, podem sofrer alterações epigenéticas. O objetivo deste estudo foi avaliar se a periodontite crônica e o LPS bacteriano derivado de P. gingivalis podem modular a expressão gênica de alguns fatores reguladores de eventos epigenéticos. Biópsias de tecido gengival inflamado e sem inflamação foram coleados de pacientes com periodontite crônica e de pacientes saudáveis respectivamente, o RNA total foi extraído e a expressão dos genes DNMT1 (DNA metiltransferase 1), DNAMT3a (DNA metiltransferase 3a), histona demetilase JMJD3 e histona demetilase UTX foram analisadas por meio de RT-PCR quantitativo. Fibroblastos gengivais humanos derivados de cultura primária, e queratinócitos (HaCaT) foram expostos a LPS de P. gingivalis ou ao veículo do LPS, e foram avaliadas a viabilidade celular por meio do teste MTT e a expressão gênica de DNMT1, DNMT3a, JMJD3 e UTX por meio de RT-PCR quantitativo. As análises dos resultados demonstraram que nem a periodontite e nem o LPS exposto a fibroblastos gengivais foram capazes de modular a expressão dos genes estudados. Contudo, o LPS promoveu a diminuição da expressão de DNMT1, DNMT3a e JMJD3 nas células HaCaT. Pode-se concluir que LPS derivado P. gingivalis pode modular, em queratinócitos, a expressão gênica de algumas enzimas promotoras de eventos epigenéticosAbstract: The aim of this study was to assess whether P. gingivalis LPS can modulate, in culture of the human keratinocytes and human gingival fibroblasts, gene expression levels of the some enzymes that promote epigenetic events. In addition, the same enzymes were evaluated in sample from healthy and periodontitis affected individuals. Primary gingival fibroblast culture and keratinocytes (HaCaT) were treated with medium containing P. gingivalis LPS or P. gingivalis LPS vehicle for 24hs. After this period, cell viability were assessed by MTT test, and total RNA were extracted to evaluate gene expression levels of the enzymes: DNMT1 (DNA methyltransferase 1), DNMT3a (DNA methyltransferase 3a), histone demethylases JMJD3 and UTX, by qRT-PCR. To evaluate the gene expression in healthy and periodontitis affected individuals, total RNA was extracted from biopsies of gingival tissue from sites with (periodontitis) or without periodontitis (healthy), and gene expression of DNMT1, DNAMT3a, JMJD3 and UTX were evaluated by qRT-PCR. No significant differences were found in the gene expression analysis between healthy gingival tissues and gingival tissue from periodontitis sites. The results showed that LPS downregulated DNMT1 (p<0.05), DNMT3a (p<0.05) and JMJD3 (p<0.01) gene expression in HaCaT cells, but no modulation was found to gingival fibroblasts. P. gingivalis LPS exposure to keratinocytes, downregulates gene expression of the enzymes that promote epigenetic eventsMestradoHistologia e EmbriologiaMestre em Biologia Buco-Dental[s.n.]Marques, Marcelo Rocha, 1976-Brito Junior, Rui Barbosa deAndia, Denise CarletoUniversidade Estadual de Campinas. Faculdade de Odontologia de PiracicabaPrograma de Pós-Graduação em Biologia Buco-DentalUNIVERSIDADE ESTADUAL DE CAMPINASCamargo, Gláucia de 1985-2012info:eu-repo/semantics/publishedVersioninfo:eu-repo/semantics/masterThesisapplication/pdf32 f. : il.https://hdl.handle.net/20.500.12733/1617734CAMARGO, Gláucia de. Estudo da periodontite crônica e da exposição de LPS de P. Gingivalis a fibroblastos gengivais e queratinócitos, na modulação da expressão de genes reguladores de eventos epigenéticos. 2012. 32 f. Dissertação (mestrado) - Universidade Estadual de Campinas, Faculdade de Odontologia de Piracicaba., Piracicaba, SP. Disponível em: https://hdl.handle.net/20.500.12733/1617734. Acesso em: 15 mai. 2024.https://repositorio.unicamp.br/acervo/detalhe/858061porreponame:Biblioteca Digital de Teses e Dissertações da Universidade Estadual de Campinas (UNICAMP)instname:Universidade Estadual de Campinas (UNICAMP)instacron:UNICAMPinfo:eu-repo/semantics/openAccess2017-02-18T06:37:12Zoai::858061Biblioteca Digital de Teses e DissertaçõesPUBhttp://repositorio.unicamp.br/oai/tese/oai.aspsbubd@unicamp.bropendoar:2017-02-18T06:37:12Biblioteca Digital de Teses e Dissertações da Universidade Estadual de Campinas (UNICAMP) - Universidade Estadual de Campinas (UNICAMP)false
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