Insights no co-cultivo de células tronco e progenitoras hematopoiéticas (HSPCs)

Detalhes bibliográficos
Autor(a) principal: Silva, Mayara Cristina Moreira, 1992-
Data de Publicação: 2020
Tipo de documento: Dissertação
Idioma: por
Título da fonte: Biblioteca Digital de Teses e Dissertações da Universidade Estadual de Campinas (UNICAMP)
Texto Completo: https://hdl.handle.net/20.500.12733/1639714
Resumo: Orientador: Marcus Alexandre Finzi Corat
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Este processo de renovação do sangue se dá o nome de hematopoese e ocorre de forma orquestrada dentro de um microambiente, denominado nicho, controlado por uma complexa sinalização através da comunicação entre diferentes tipos celulares encontrados na medula óssea através de citocinas, que regulam a quiescência, a proliferação e a diferenciação das HSPCs. Reproduzir toda esta complexidade in vitro para a expansão das HSPCs para terapia celular regenerativa é sem sombra de dúvidas um desafio a ser vencido. Nos dias atuais, inúmeras formas de cultivo celular de HSPCs foram propostas e são utilizadas em diferentes laboratórios, mas a eficiência de expansão para testes clínicos ainda são desanimadores. A fim de contribuir com esses estudos, analisamos neste trabalho o processo regenerativo da medula óssea recém danificada com radiação ionizante em períodos iniciais de recuperação após transplante de HSPCs rastreáveis pelo GFP+ e obtivemos alguns insights sobre o comportamento destas células na medula óssea. Verificamos também a resposta das células HSPCs quando cultivadas com diferentes tipos celulares e sem adição de qualquer citocina, analisando seu nível proliferativo, de apoptose e de diferenciação, a fim de entender a real contribuição destas células suportes as células HSPCs para propormos uma forma mais simples de expandir as HSPCs in vitro. Nossos resultados mostram que proteínas relacionadas a proliferação estão próximas ou até mesmo presentes nas células transplantadas GFP+, como o caso da proteína Jag-1 e isso pode estar relacionado com a rápida regeneração medular. Análises mais específicas com células Jag-1+ poderão mostrar seu potencial para expansão ex vivo de HSPCs. Analisando as células HSPCs quando cultivadas com os diferentes grupos de células suportes, vimos que as HSPCs cultivadas com o grupo com fibroblasto embrionário de camundongo (MEF) apresentaram melhores resultados nos ensaios de proliferação, diferenciação, morte e apoptose, mostrando assim que as células MEF contribuíram de forma positiva no cultivo das HSPCs e que apresentam um grande potencial para ser utilizado em co-cultivo na expansão de células progenitoras hematopoiéticasAbstract: The success of bone marrow transplants is possible due to the presence of stem cells and hematopoietic progenitors (HSPCs) in the bone marrow that allow blood cell renewal. This process of blood renewal is called hematopoiesis and is orchestrated within a microenvironment, called a niche, controlled by complex signaling through communication between different cell types found in the bone marrow through cytokines, which regulate quiescence, the proliferation and differentiation of HSPCs. Reproducing all this complexity in vitro for the expansion of HSPCs for regenerative cell therapy is undoubtedly a challenge to be met. Nowadays, many forms of cell culture of HSPCs have been proposed and are used in different laboratories, but the expansion efficiency for clinical trials is still disappointing. In order to contribute to these studies, we analyzed in this work the regenerative process of the newly damaged bone marrow with ionizing radiation in early recovery periods after transplantation of GFP + traceable HSPCs and gained some insight into the behavior of these cells in the bone marrow. We also verify the response of HSPCs cells when cultured with different cell types and without the addition of any cytokine, analyzing their proliferative, apoptosis and differentiation levels, in order to understand the real contribution of these support cells to HSPCs cells to propose a simpler form to expand HSPCs in vitro. Our results show that proliferation-related proteins are close to or even present in GFP + transplanted cells, such as the Jag-1 protein, and this may be related to rapid spinal cord regeneration. More specific analyzes with Jag-1 + cells may show their potential for ex vivo HSPC expansion. Analyzing HSPCs cells when cultured with the different support cell groups we found that HSPCs cultured with the mouse embryonic fibroblast (MEF) group showed better results in proliferation, differentiation, death and apoptosis assays, thus showing that MEF cells contributed positively to the cultivation of HSPCs and have great potential to be used in co-cultivation in the expansion of hematopoietic progenitor cellsMestradoClínica MédicaMestra em CiênciasCAPESFAPESP2017/14031-6[s.n.]Corat, Marcus Alexandre Finzi, 1975-Duarte, Adriana da Silva SantosCunha, Anderson Ferreira daUniversidade Estadual de Campinas (UNICAMP). Faculdade de Ciências MédicasPrograma de Pós-Graduação em Clínica MédicaUNIVERSIDADE ESTADUAL DE CAMPINASSilva, Mayara Cristina Moreira, 1992-20202020-01-31T00:00:00Zinfo:eu-repo/semantics/publishedVersioninfo:eu-repo/semantics/masterThesisapplication/pdf1 recurso online ( 59 p.) : il., digital, arquivo PDF.https://hdl.handle.net/20.500.12733/1639714SILVA, Mayara Cristina Moreira. Insights no co-cultivo de células tronco e progenitoras hematopoiéticas (HSPCs). 2020. 1 recurso online ( 59 p.) Dissertação (mestrado) - Universidade Estadual de Campinas, Faculdade de Ciências Médicas, Campinas, SP. Disponível em: https://hdl.handle.net/20.500.12733/1639714. 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