Análise proteômica, molecular e funcional de potenciais adesinas de Escherichia coli associada à sepse humana (SEPEC)

Detalhes bibliográficos
Autor(a) principal: Conceição, Rogério Arcuri 1983-
Data de Publicação: 2014
Tipo de documento: Tese
Idioma: por
Título da fonte: Biblioteca Digital de Teses e Dissertações da Universidade Estadual de Campinas (UNICAMP)
Texto Completo: https://hdl.handle.net/20.500.12733/1623789
Resumo: Orientador: Tomomasa Yano
id UNICAMP-30_0b618c2121b3f4ae69b308fa8f2c21cc
oai_identifier_str oai::936679
network_acronym_str UNICAMP-30
network_name_str Biblioteca Digital de Teses e Dissertações da Universidade Estadual de Campinas (UNICAMP)
repository_id_str
spelling Análise proteômica, molecular e funcional de potenciais adesinas de Escherichia coli associada à sepse humana (SEPEC)Proteoimics, molecular and functional analysis of potential adhesins from human sepsis associated Escherichia coli (SEPEC)Escherichia coliAdesinas de Escherichia coliProteínas de membranaSepseEscherichia coliAdhesins, Escherichia coliMembrane proteinsAdesãoInvasão celularSepsisAdhesionCell invasionOrientador: Tomomasa YanoTese (doutorado) - Universidade Estadual de Campinas, Instituto de BiologiaResumo: Estudos preliminares sobre adesão e invasão mostraram que 100% de 49 amostras de Escherichia coli associada à sepse humana (SEPEC) foram capazes de aderir e invadir células Vero (Rim de macaco verde africano) e Huvec (Veia umbilical humana). Em análise genotípica, foi observada uma alta prevalência dos genes fimH (98,0%) que codificam para a adesina da fimbria de tipo 1 (F1). No entanto, as cepas analisadas aderiram tanto na presença quanto na ausência de ?-D-manopiranosideo, um inibidor da adesão mediada pela F1. Por esse motivo foram analisadas as proteínas de membrana externa de SEPEC, com o objetivo de se avaliar potenciais fatores adesão e invasão dessas cepas. Por técnicas de proteômica, foram identificadas três proteínas de SEPEC com afinidade a glicoproteínas celulares: OmpA (Proteína de membrana A); FimA (Subunidade maior da fimbria do tipo 1) e YdeR (Subunidade menor da fimbria do tipo 9 - F9). Esses dados foram coerentes com a análise genotípica das amostras SEPEC, pois foi observada uma alta porcentagem dos genes que codificam para as três proteínas descritas anteriormente, sendo que 100% das amostras foram ompA+, 98,0% foram fimA+ e 100% foram ydeR+. Os ensaios de adesão e invasão de SEPEC (OmpA+/ F1+) em células Vero e Huvec mostraram que ?-D-manopiranosideo e GlcNAc, quando atuando juntos, agem como potentes inibidores da adesão e invasão, sugerindo que essas moléculas poderiam estar ocupando os sítios de ligação a carboidratos das duas adesinas F1 e/ou OmpA, respectivamente. Para confirmar essa hipótese, mutantes nulos para ?fimA (OmpA+/ F1-) e ?ompA (OmpA-/F1+) foram construídos, e os resultados de adesão e invasão bacteriana foram similares aos obtidos na presença dos inibidores: ?-D-manopiranosideo e GlcNAc. Mutante nulo para a proteína YdeR da fimbria F9 (OmpA+/ F1+), mostrou significativa redução da adesão e invasão bacteriana em células Vero e Huvec (p ? 0,05) somente na presença dos inibidores da adesão mediada por F1 e OmpA: ?-D-manopiranosideo e GlcNAc, respectivamente. Esses dados sugerem que F9 também contribui para a adesão e invasão de SEPEC. Juntos, nossos dados demonstram que os processos de adesão e invasão de SEPEC são dependentes de OmpA, F1 e F9, as quais podem ser complementares, e devem atuar sinergicamente para a adesão e invasão de SEPECAbstract: Our preliminary studies about bacterial adhesion and invasion showed 100% of 49 strains of human sepsis-associated Escherichia coli (SEPEC) were able to adhere and invade Vero (African green monkey kidney) and HUVEC (human umbilical vein) cells. In genotypic analysis, high prevalence of fimH (98.0%), gene encoding for the type 1 fimbrial adhesin was observed. However, all the strains analyzed were able to adhere and invade these cellular lineages both in the presence and absence of the type 1 fimbriae adherence-inhibitor ?-D-mannopiranoside. Consequently, the outer membrane proteins of SEPEC were analyzed in order to find potential adhesion and invasion factors expressed by these strains. Through proteomic techniques, three proteins with affinity to cellular glycoproteins were identified: OmpA (Membrane Protein A); FimA (major subunit of type 1 fimbriae - F1) and YdeR (minor subunit of type 9 fimbriae - F9). These data were consistent with the genotypic analysis of SEPEC strains because a high percentage of the genes encoding these three proteins was observed, being that ompA+ (100%) fimA+ (98%) and ydeR+ (100%). Assays of adhesion and invasion of SEPEC (OmpA+ / F1+) in Vero and HUVEC cells showed that ?-D-manopiranosideo and GlcNAc, when acting together, act as potent inhibitors of adhesion and invasion, suggesting that these molecules could be occupying sites of carbohydrate-binding displayed by adhesins from both F1 and/or OmpA, respectively. To confirm this hypothesis, null mutants ?fimA (OmpA+/F1-) and ?ompA (OmpA-/F1+) were constructed, and the phenotypic results of bacterial adhesion and invasion were similar to those obtained in the presence of inhibitors ?-D-mannopiranoside and GlcNAc. The mutant ?ydeR (OmpA+ / F1+), null mutant for YdeR protein of F9 fimbriae, showed a significant reduction in bacterial adhesion and invasion in Vero and HUVEC (p ? 0.05) just in the presence of inhibitors of cell adhesion mediated by F1 and OmpA. These data suggest that F9 also can contribute to the adhesion and invasion of SEPEC in Vero and HUVEC cells. Hold together, our data demonstrated that adhesion and invasion of SEPEC are OmpA, F1 and F9 dependents, which can be complementary and express synergistic activity leading to enhancing the ability of adhesion and invasion in SEPEC strainsDoutoradoMicrobiologiaDoutor em Genética e Biologia Molecular[s.n.]Yano, Tomomasa, 1941-Alvarez-Martinez, Cristina ElisaDias da Silveira, WanderleyKnöbl, TerezinhaPiazza, Roxane Maria FontesUniversidade Estadual de Campinas. Instituto de BiologiaPrograma de Pós-Graduação em Genética e Biologia MolecularUNIVERSIDADE ESTADUAL DE CAMPINASConceição, Rogério Arcuri 1983-2014info:eu-repo/semantics/publishedVersioninfo:eu-repo/semantics/doctoralThesisapplication/pdf78 f. : il.https://hdl.handle.net/20.500.12733/1623789CONCEIÇÃO, Rogério Arcuri. Análise proteômica, molecular e funcional de potenciais adesinas de Escherichia coli associada à sepse humana (SEPEC). 2014. 78 f. Tese (doutorado) - Universidade Estadual de Campinas, Instituto de Biologia, Campinas, SP. Disponível em: https://hdl.handle.net/20.500.12733/1623789. Acesso em: 15 mai. 2024.https://repositorio.unicamp.br/acervo/detalhe/936679porreponame:Biblioteca Digital de Teses e Dissertações da Universidade Estadual de Campinas (UNICAMP)instname:Universidade Estadual de Campinas (UNICAMP)instacron:UNICAMPinfo:eu-repo/semantics/openAccess2017-02-18T07:28:20Zoai::936679Biblioteca Digital de Teses e DissertaçõesPUBhttp://repositorio.unicamp.br/oai/tese/oai.aspsbubd@unicamp.bropendoar:2017-02-18T07:28:20Biblioteca Digital de Teses e Dissertações da Universidade Estadual de Campinas (UNICAMP) - Universidade Estadual de Campinas (UNICAMP)false
dc.title.none.fl_str_mv Análise proteômica, molecular e funcional de potenciais adesinas de Escherichia coli associada à sepse humana (SEPEC)
Proteoimics, molecular and functional analysis of potential adhesins from human sepsis associated Escherichia coli (SEPEC)
title Análise proteômica, molecular e funcional de potenciais adesinas de Escherichia coli associada à sepse humana (SEPEC)
spellingShingle Análise proteômica, molecular e funcional de potenciais adesinas de Escherichia coli associada à sepse humana (SEPEC)
Conceição, Rogério Arcuri 1983-
Escherichia coli
Adesinas de Escherichia coli
Proteínas de membrana
Sepse
Escherichia coli
Adhesins, Escherichia coli
Membrane proteins
Adesão
Invasão celular
Sepsis
Adhesion
Cell invasion
title_short Análise proteômica, molecular e funcional de potenciais adesinas de Escherichia coli associada à sepse humana (SEPEC)
title_full Análise proteômica, molecular e funcional de potenciais adesinas de Escherichia coli associada à sepse humana (SEPEC)
title_fullStr Análise proteômica, molecular e funcional de potenciais adesinas de Escherichia coli associada à sepse humana (SEPEC)
title_full_unstemmed Análise proteômica, molecular e funcional de potenciais adesinas de Escherichia coli associada à sepse humana (SEPEC)
title_sort Análise proteômica, molecular e funcional de potenciais adesinas de Escherichia coli associada à sepse humana (SEPEC)
author Conceição, Rogério Arcuri 1983-
author_facet Conceição, Rogério Arcuri 1983-
author_role author
dc.contributor.none.fl_str_mv Yano, Tomomasa, 1941-
Alvarez-Martinez, Cristina Elisa
Dias da Silveira, Wanderley
Knöbl, Terezinha
Piazza, Roxane Maria Fontes
Universidade Estadual de Campinas. Instituto de Biologia
Programa de Pós-Graduação em Genética e Biologia Molecular
UNIVERSIDADE ESTADUAL DE CAMPINAS
dc.contributor.author.fl_str_mv Conceição, Rogério Arcuri 1983-
dc.subject.por.fl_str_mv Escherichia coli
Adesinas de Escherichia coli
Proteínas de membrana
Sepse
Escherichia coli
Adhesins, Escherichia coli
Membrane proteins
Adesão
Invasão celular
Sepsis
Adhesion
Cell invasion
topic Escherichia coli
Adesinas de Escherichia coli
Proteínas de membrana
Sepse
Escherichia coli
Adhesins, Escherichia coli
Membrane proteins
Adesão
Invasão celular
Sepsis
Adhesion
Cell invasion
description Orientador: Tomomasa Yano
publishDate 2014
dc.date.none.fl_str_mv 2014
dc.type.status.fl_str_mv info:eu-repo/semantics/publishedVersion
dc.type.driver.fl_str_mv info:eu-repo/semantics/doctoralThesis
format doctoralThesis
status_str publishedVersion
dc.identifier.uri.fl_str_mv https://hdl.handle.net/20.500.12733/1623789
CONCEIÇÃO, Rogério Arcuri. Análise proteômica, molecular e funcional de potenciais adesinas de Escherichia coli associada à sepse humana (SEPEC). 2014. 78 f. Tese (doutorado) - Universidade Estadual de Campinas, Instituto de Biologia, Campinas, SP. Disponível em: https://hdl.handle.net/20.500.12733/1623789. Acesso em: 15 mai. 2024.
url https://hdl.handle.net/20.500.12733/1623789
identifier_str_mv CONCEIÇÃO, Rogério Arcuri. Análise proteômica, molecular e funcional de potenciais adesinas de Escherichia coli associada à sepse humana (SEPEC). 2014. 78 f. Tese (doutorado) - Universidade Estadual de Campinas, Instituto de Biologia, Campinas, SP. Disponível em: https://hdl.handle.net/20.500.12733/1623789. Acesso em: 15 mai. 2024.
dc.language.iso.fl_str_mv por
language por
dc.relation.none.fl_str_mv https://repositorio.unicamp.br/acervo/detalhe/936679
dc.rights.driver.fl_str_mv info:eu-repo/semantics/openAccess
eu_rights_str_mv openAccess
dc.format.none.fl_str_mv application/pdf
78 f. : il.
dc.publisher.none.fl_str_mv [s.n.]
publisher.none.fl_str_mv [s.n.]
dc.source.none.fl_str_mv reponame:Biblioteca Digital de Teses e Dissertações da Universidade Estadual de Campinas (UNICAMP)
instname:Universidade Estadual de Campinas (UNICAMP)
instacron:UNICAMP
instname_str Universidade Estadual de Campinas (UNICAMP)
instacron_str UNICAMP
institution UNICAMP
reponame_str Biblioteca Digital de Teses e Dissertações da Universidade Estadual de Campinas (UNICAMP)
collection Biblioteca Digital de Teses e Dissertações da Universidade Estadual de Campinas (UNICAMP)
repository.name.fl_str_mv Biblioteca Digital de Teses e Dissertações da Universidade Estadual de Campinas (UNICAMP) - Universidade Estadual de Campinas (UNICAMP)
repository.mail.fl_str_mv sbubd@unicamp.br
_version_ 1799138519179853824

Registros relacionados