Arrabidaea chica Verl : estabecimento de parâmetros de secagem e biodisponibilidade, para desenvolvimento de formulações mucoadesivas = Arrabidaea chica Verl : stablishment of drying and bioavailability parameters for development of mucoadhesive formulation

Detalhes bibliográficos
Autor(a) principal: Sousa, Ilza Maria de Oliveira, 1963-
Data de Publicação: 2019
Tipo de documento: Tese
Idioma: por
Título da fonte: Biblioteca Digital de Teses e Dissertações da Universidade Estadual de Campinas (UNICAMP)
Texto Completo: https://hdl.handle.net/20.500.12733/1639847
Resumo: Orientador: Mary Ann Foglio
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Os efeitos do uso de N2 e Ar como gases atomizadores no processo de secagem dos extratos foram comparados. O tipo de gás utilizado não alterou significativamente a cor. No entanto, o meio de secagem influenciou o teor de 3-desoxianocianinas presentes no extrato de A. chica, utilizando o ar como gás atomizador, apresentando redução da carajurina (37,5%) com aumento concomitante do teor de luteolina (24,1%). Ao avaliar os parâmetros do perfil químico por cromatografia líquida LC-MS / MS-ESI (+/-), sua atividade antioxidante in vitro, citotoxicidade e migração celular ambos os processos de secagem preservaram o perfil farmacológico das amostras. A atividade antioxidante também foi semelhante à IC50 (445,60 ± 12,73 e 466,99 ± 46,11). No teste de migração celular em células HaCat, observou-se que o extrato de folhas de A. chica secas com fluxo de ar (5 ?g / mL) promoveu fechamento da ferida em 78% (12 horas) e que as secas com fluxo de N2 levaram ao fechamento inferior, correspondente para 49% (12 horas), enquanto o controle positivo (meio RPMI com 5% soro fetal bovino) apresentou fechamento de 98% (12 horas). A avaliação antimicrobiana de Staphylococcus aureus dos extratos secos produziu efeito semelhante para ambos, com CIM (concentração inibitória mínima) a 0,39 mg / mL. A partir deste extrato padronizada de A. chica por spray drying foi desenvolvido uma formulação de filme mucoadesivo para uso na cavidade bucal. Os filmes foram preparados utilizando PVA (álcool polivinílico), sendo avaliadas as características físico-químicas, propriedades mecânicas e capacidade de mucoadesão. Estudos de citotoxicidade utilizando fibroblastos HGF-1 e queratinócitos HaCat também foram realizados. A atividade antioxidante e antifúngica dos filmes foi investigada contra diversas cepas de Candida. Os resultados mostraram a presença de nanopartículas de 200 a 300nm, potencial Zeta negativo (-11,13mV) apresentando PDI de 0,14, com atividade antioxidante DPPH IC50 393,37µg/mL, FRAP IC50 1,77µg/mL, superóxido IC50 104,9µg/mL; H2O2 IC50 394,8µg/mL e HOCl IC50 6,01µg/mL atividade antifúngica para diversas linhagens de Candidas na faixa de 14,5 a 58,5 µg/mL. A biodisponibilidade dos extratos brutos padronizados foi avaliada em ratos Spragle-Dawler. Os animais receberam tratamento oral com doses de 50mg/kg, dose única e 100mg/kg de extrato bruto de A. chica (EB), doses repetidas por sete dias. O teor de carajurina e luteolina foram avaliados no plasma por LC-MS-MS. Constatou-se a presença de luteolina intacta no plasma nos primeiros 15 minutos após a administração oral do extrato bruto padronizado, apresentando tempo de concentração máxima Tmáx aos 30 minutos e Cmáx 2,56ng/mL doses repetidas. A exposição plasmática de carajurina (antocianina), apresentou concentração plasmática abaixo do limite de quantificação do equipamento. As concentrações mais elevadas de carajurina detectada na urina demonstram que o extrato foi metabolizado e excretado. Portanto, o processo de secagem com fluxo de ar manteve as atividades biológicas do extrato de A. chica seco com N2. A. chica incorporadas no filme mucoadesivo não afetou a viabilidade das células HGF-1 e para as linhagens de HaCat, sendo adequado ao uso como cicatrizante bucal. Estes resultados são extremamente relevantes, pois constituem a primeira referência à absorção dos compostos antociânicos presentes na espécie A. chicaAbstract: Arrabidaea chica (Bonpl.) B. Verl. (Bignoniaceae) is a plant widely used in folk medicine in Brazil. This study reports the pharmacological action of spray-dried standard extracts produced on an industrial scale (Air) and laboratory scale (N2), as well as their viability of production. Effects of the use of N2 and Air as atomizing gases in the extracts drying process were compared. The type of gas used did not significantly alter post-dry color. However, the drying medium influenced the content of 3-deoxyanthocyanines present in A. chica extract using air as an atomizing gas, presenting a reduction of carajurin (37.5%) with a concomitant increase in luteolin content (24.1%). By evaluating the chemical profile parameters by liquid chromatography LC-MS/MS- ESI (+/-) mode, the in vitro antioxidant activity, cytotoxicity, and in vitro healing, both drying processes preserved the pharmacological profile of the samples. The antioxidant activity was also similar IC50 (445.60 ± 12.73 and 466.99 ± 46.11). In the cell migration test with HaCat cells, the extract dried with air flow (5 ?g/mL) promoted wound closure in 78% (12 hours) whereas that dried with N2 flow led to lower closure, corresponding to 49% (12 hours), and the positive control (Fetal Bovine Serum 5%) presented 98% closure (12 hours) compared to the negative control (Fetal Bovine Serum 0.2%). The antimicrobial evaluation for Staphylococcus aureus of the dry extracts yielded similar effect for both gases, with MIC (minimum inhibitory concentration) at 0.39 mg/mL Therefore, the drying process with air flow maintained the same biological activities as that dried with N2. A mucoadhesive film formulation was developed for use in the oral cavity from A. chica standardized extract dried by spray drying under N2. The films were prepared using PVA (polyvinyl alcohol), being evaluated the physicochemical characteristics, mechanical properties and mucoadhesion capacity. Cytotoxicity studies using HGF-1 fibroblasts and HaCat keratinocytes were also performed. The antioxidant and antifungal activity of the films was investigated against several Candida strains. The results showed the presence of 200 to 300nm nanoparticles, negative Zeta potential (-11.13mV) with 0.14 PDI, with antioxidant activity DPPH IC50 393.37µg / mL, FRAP IC50 1.77µg / mL, superoxide IC50 104 9µg / mL; H2O2 IC50 394.8µg / mL and HOCl IC50 6.01µg / mL antifungal activity for several Candidas strains in the range 14.5 to 58.5 µg / mL The standardized crude extracts were evaluated for bioavailability in Sprague Dawley rats. The animals received oral treatment with 50mg / kg doses, single dose and 100mg / kg of crude A. chica (EB)extract, repeated doses for seven days. Carajurin and luteoline content were evaluated in plasma by LC-MS-MS In which we found the presence of intact luteoline in plasma within the first 15 minutes after oral administration of the standardized crude extract, with a maximum Tmax concentration time of 30 minutes and Cmax 2.56ng / mL using repeated doses. Plasma exposure of carajurin (anthocyanin) is limited due to low oral bioavailability and extensive metabolism, with plasma concentration below the equipment quantitation limit. Higher concentrations of carajurin in the urine demonstrated that the extract was metabolized and excreted. Therefore, the airflow drying process maintained the same biological activities of the dried A. chica extract with N2. A. chica incorporated into the mucoadhesive film did not affect the viability of HGF-1 cells and HaCat strains, being suitable for use as oral healing. These results are extremely relevant as they constitute the first reference to the absorption of anthocyanin compounds present in A. chicaDoutoradoCiências BiomédicasDoutora em Ciências MédicasFAPESP2015/08338-6[s.n.]Foglio, Mary Ann, 1960-Carneiro, Catarina Raposo DiasMariano, Fernanda VivianeChaud, Marco ViníciusAlencar, Severino Matias deUniversidade Estadual de Campinas (UNICAMP). Faculdade de Ciências MédicasPrograma de Pós-Graduação em Ciências MédicasUNIVERSIDADE ESTADUAL DE CAMPINASSousa, Ilza Maria de Oliveira, 1963-20192019-08-15T00:00:00Zinfo:eu-repo/semantics/publishedVersioninfo:eu-repo/semantics/doctoralThesisapplication/pdf1 recurso online (220 p.) : il., digital, arquivo PDF.https://hdl.handle.net/20.500.12733/1639847SOUSA, Ilza Maria de Oliveira. Arrabidaea chica Verl : estabecimento de parâmetros de secagem e biodisponibilidade, para desenvolvimento de formulações mucoadesivas = Arrabidaea chica Verl : stablishment of drying and bioavailability parameters for development of mucoadhesive formulation. 2019. 1 recurso online (220 p.) Tese (doutorado) - Universidade Estadual de Campinas, Faculdade de Ciências Médicas, Campinas, SP. Disponível em: https://hdl.handle.net/20.500.12733/1639847. 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