Extração, purificação e estudo cinetico de fumarase de coração de bovino

Detalhes bibliográficos
Autor(a) principal: Barrichello, Tereza de Lourdes Scarpari, 1942-
Data de Publicação: 1974
Tipo de documento: Tese
Idioma: por
Título da fonte: Biblioteca Digital de Teses e Dissertações da Universidade Estadual de Campinas (UNICAMP)
Texto Completo: https://hdl.handle.net/20.500.12733/1593771
Resumo: Orientador : Ladaslav Sodek
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spelling Extração, purificação e estudo cinetico de fumarase de coração de bovinoBioquímicaOrientador : Ladaslav SodekTese (doutorado) - Universidade Estadual de Campinas, Faculdade de Odontologia de PiracicabaResumo: A extração e purificação de fumarase de coração de "bovino foi feita pelo método de MASSEY, com modificação, -que consistiu no uso de gel de fosfato de cálcio em coluna cromatográfica para purificar o enzima. Este processo permitiu purificar o enzima 18 vezes em relação à fase anterior,ao invés de 3,1 vezes como o obtido por MASSEY. 0 número total de purificação foi da ordem de 116 vezes em relação ao extrato cru. A atividade enzímica foi medida espectrofotometricamente, a 300 nm. Com o enzima purificado foi desenvolvido estudo -cinético que permitiu determinar: Que as constantes de Michaelis (determinadas pelo processo gráfico de Lineweaver-Burk) foram iguais a 2,0 mM para fumarato e 6,7mM para L-malato, utilizados numa faixa de concentração que variou de 2 x 10" M a 1 x 10 M e de 2 x 10 M a 2 x 10 -TI, respectivamente; que a velocidade inicial da reação aumentou -proporcionalmente à concentração do enzima e à temperatura a 40°C; que o pH ótimo para a reação foi igual a 7"0;que citrato de sódio 0,05M agiu como inibidor competitivo da fumarase. Foram determinadas as constantes de dissociação para ambos os substratos, fumarato (Ki = 12,5mm)e L-malato (Ki = 18,3mM), utilizados numa faixa de concentração que variou de 2 x 10"2M a 1 x 10~5M e de 2 x 10"2M a 2 x 10 ^M, respectivamente;que energia de ativação (A) foi igual a -8006,25 cal/mol, determinada pela equação de Arrenhius; que a constante de equilíbrio da reação determinada a 25°C foi igual a 4,07;que a energia livre padrão( /\ F° ) foi igual a -830,96 cal/mol que a entalpia C (/\ H°) foi igual a -2196 cal/molAbstract: Not informedDoutoradoBioquímica[s.n.]Sodek, Ladaslav, 1941-Universidade Estadual de Campinas (UNICAMP). Faculdade de Odontologia de Piracicaba (FOP)Programa de Pós-Graduação em CiênciasUNIVERSIDADE ESTADUAL DE CAMPINASBarrichello, Tereza de Lourdes Scarpari, 1942-1974info:eu-repo/semantics/publishedVersioninfo:eu-repo/semantics/doctoralThesisapplication/pdf81f. : il.https://hdl.handle.net/20.500.12733/1593771BARRICHELLO, Tereza de Lourdes Scarpari. Extração, purificação e estudo cinetico de fumarase de coração de bovino. 1974. 81f. Tese (doutorado) - Universidade Estadual de Campinas, Faculdade de Odontologia de Piracicaba, Piracicaba, SP. Disponível em: https://hdl.handle.net/20.500.12733/1593771. Acesso em: 2 set. 2024.https://repositorio.unicamp.br/acervo/detalhe/280351porreponame:Biblioteca Digital de Teses e Dissertações da Universidade Estadual de Campinas (UNICAMP)instname:Universidade Estadual de Campinas (UNICAMP)instacron:UNICAMPinfo:eu-repo/semantics/openAccess2019-08-13T10:29:02Zoai::280351Biblioteca Digital de Teses e DissertaçõesPUBhttp://repositorio.unicamp.br/oai/tese/oai.aspsbubd@unicamp.bropendoar:2019-08-13T10:29:02Biblioteca Digital de Teses e Dissertações da Universidade Estadual de Campinas (UNICAMP) - Universidade Estadual de Campinas (UNICAMP)false
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