Efeito de uma matricriptina derivada do colágeno I na trombose e remodelamento vascular na aorta abdominal de camundongos : Effect of a collagen I derived matricryptin in thrombosis and vascular remodeling on mice abdominal aorta
Autor(a) principal: | |
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Data de Publicação: | 2018 |
Tipo de documento: | Dissertação |
Idioma: | por |
Título da fonte: | Biblioteca Digital de Teses e Dissertações da Universidade Estadual de Campinas (UNICAMP) |
Texto Completo: | https://hdl.handle.net/20.500.12733/1634758 |
Resumo: | Orientador: Cristina Pontes Vicente |
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Efeito de uma matricriptina derivada do colágeno I na trombose e remodelamento vascular na aorta abdominal de camundongos : Effect of a collagen I derived matricryptin in thrombosis and vascular remodeling on mice abdominal aortaEffect of a collagen I derived matricryptin in thrombosis and vascular remodeling on mice abdominal aortaPeptídeos bioativosRemodelação vascularMatriz extracelularColágenoBirrefringênciaBioactive peptidesVascular remodelingExtracellular matrixCollagenBirefringenceOrientador: Cristina Pontes VicenteDissertação (mestrado) - Universidade Estadual de Campinas, Instituto de BiologiaResumo: As matricriptinas são fragmentos proteicos derivados da quebra proteolítica da matriz extracelular (MEC) com atividade biológica e que podem regular diversos processos envolvidos no remodelamento da MEC. Lindsey et al. (2015) descreveram uma matricriptina derivada da quebra do colágeno I (peptídeo p1158/59) que apresentou um efeito positivo no remodelamento da MEC cardíaca pós-infarto. O objetivo de nosso estudo foi analisar o efeito do peptídeo p1158/59 na trombose, formação da neoíntima e remodelamento da MEC vascular da aorta abdominal de camundongos C57BL/6. Para tal, utilizamos uma lesão química mediada por cloreto férrico para induzir a lesão vascular e analisamos os seguintes grupos: controle (sem lesão), 2 dias após a lesão, 14 dias após a lesão, 2 dias e 14 dias após a lesão + tratamento com o peptídeo. Nos grupos tratados, aplicamos intravenosamente 24 µg/animal/dia do peptídeo diluído em água MiliQ. Depois, foram analisados o tamanho do trombo, a formação de neoíntima, a presença de ICAM-1, LY6G e elastina por imunofluorescência, a atividade das gelatinases por zimografia in situ e a organização das fibras colágenas na parede da aorta por microscopia de polarização. Também analisamos, in vitro, o efeito de p1158/59 na agregação plaquetária no plasma humano e investigamos o papel do peptídeo no tempo de formação do trombo, medido por uma sonda Doppler na artéria carótida lesionada, e na coagulação, através dos testes de TTPa e TP ex vivo, utilizando o plasma destes animais. A proliferação das células musculares lisas (SMCs) vasculares foi analisada por MTT. O tratamento com p1158/59 aumentou o tamanho do trombo e a atividade das gelatinases 2 dias após a lesão vascular, mas não alterou os demais parâmetros avaliados neste trabalho, quando comparado ao grupo 2 dias após a lesão sem tratamento. Além disso, o peptídeo aumentou o tamanho da neoíntima e a birrefringência do colágeno, diminuindo a atividade das gelatinases 14 dias após a lesão, provavelmente por induzir a migração das SMCs e aumentar a deposição e organização do colágeno. Assim, concluímos que o peptídeo p1158/59 induziu um remodelamento vascular negativo da MEC, induzindo a formação de neoíntima, diferente dos resultados benéficos observados por Lindsey et al. (2015) no remodelamento cardíaco. Portanto, a atividade desta molécula como agente remodelador da MEC no sistema cardiovascular pode variar de acordo com o tecido, método de aplicação e finalidade do seu usoAbstract: Matricryptins are protein fragments proteolytically released from extracellular matrix (ECM) with biological activity that can regulate several processes involved on ECM remodeling. Lindsey et al. (2015) described a collagen I matricryptin (called peptide p1158/59) that showed a positive effect on cardiac ECM remodeling post-infarct. The aim of this study was to analyze the effect of p1158/59 on thrombosis, neointimal formation and vascular remodeling of C57BL/6 mice abdominal aorta ECM. We induced chemical vascular injury using ferric chloride and analyzed the following groups: control (no lesion), 2 days after injury, 14 days after injury, 2 days and 14 days after injury + treatment. In the treated groups, we applied 24 µg/animal/day of peptide diluted in MiliQ water. We analyzed thrombus size, the formation of neoíntima, the presence of ICAM-1, LY6G and elastin by immunofluorescence, the activity of gelatinases by zimography in situ, and collagen fibers organization on the aorta wall using polarization microscopy. We also analyzed in vitro the effect of p1158/59 on platelet aggregation in human plasma and we investigated the role of the peptide on thrombus time formation, measured by a Doppler probe in the injured carotid artery, and in the coagulation, using TTPa and TP ex vivo (using the plasma of these animals). The vascular smooth muscle cells (SMCs) proliferation was analyzed by MTT. The treatment with p1158/59 increased the thrombus size and gelatinases activity 2 days after vascular lesion, but it did not alter the other parameters evaluated on this work when compared to group 2 days after injury. Moreover, the peptide increased neointima size and collagen birefringence and decreased the activity of gelatinases 14 days after injury, probably by inducing the migration of SMCs and improving collagen deposition and organization. Thus, we conclude that the peptide p1158/59 induced a negative vascular ECM remodeling, promoting neointimal formation, different of the beneficial results observed by Lindsey et al. (2015) on cardiac remodeling. Therefore, the use of this molecule as an ECM remodeling agent in the cardiovascular system may vary according to the tissue, method of application and purpose of its useMestradoBiologia CelularMestra em Biologia Celular e EstruturalCNPQ131858/2016-5[s.n.]Vicente, Cristina Pontes, 1965-Pimentel, Edson RosaAntunes, EdsonUniversidade Estadual de Campinas (UNICAMP). Instituto de BiologiaPrograma de Pós-Graduação em Biologia Celular e EstruturalUNIVERSIDADE ESTADUAL DE CAMPINASDal Pozzo, Caroline Fernanda Sanches, 1994-20182018-07-12T00:00:00Zinfo:eu-repo/semantics/publishedVersioninfo:eu-repo/semantics/masterThesisapplication/pdf1 recurso online (131 p.) : il., digital, arquivo PDF.https://hdl.handle.net/20.500.12733/1634758DAL POZZO, Caroline Fernanda Sanches. Efeito de uma matricriptina derivada do colágeno I na trombose e remodelamento vascular na aorta abdominal de camundongos: Effect of a collagen I derived matricryptin in thrombosis and vascular remodeling on mice abdominal aorta. 2018. 1 recurso online (131 p.) Dissertação (mestrado) - Universidade Estadual de Campinas, Instituto de Biologia, Campinas, SP. Disponível em: https://hdl.handle.net/20.500.12733/1634758. Acesso em: 3 set. 2024.https://repositorio.unicamp.br/acervo/detalhe/1061576Requisitos do sistema: Software para leitura de arquivo em PDFporreponame:Biblioteca Digital de Teses e Dissertações da Universidade Estadual de Campinas (UNICAMP)instname:Universidade Estadual de Campinas (UNICAMP)instacron:UNICAMPinfo:eu-repo/semantics/openAccess2018-11-26T11:23:47Zoai::1061576Biblioteca Digital de Teses e DissertaçõesPUBhttp://repositorio.unicamp.br/oai/tese/oai.aspsbubd@unicamp.bropendoar:2018-11-26T11:23:47Biblioteca Digital de Teses e Dissertações da Universidade Estadual de Campinas (UNICAMP) - Universidade Estadual de Campinas (UNICAMP)false |
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