Desenvolvimento e validação de método analítico para determinação de lactato em suor empregando eletroforese capilar com detecção condutométrica sem contato
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Data de Publicação: | 2024 |
Tipo de documento: | Dissertação |
Idioma: | por |
Título da fonte: | Biblioteca Digital de Teses e Dissertações da Universidade Estadual de Campinas (UNICAMP) |
Texto Completo: | https://hdl.handle.net/20.500.12733/18105 |
Resumo: | Orientador: Dosil Pereira de Jesus |
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Desenvolvimento e validação de método analítico para determinação de lactato em suor empregando eletroforese capilar com detecção condutométrica sem contatoDevelopment and validation of an analytical method for lactate determination in sweat using capillary electrophoresis with non-contact conductometric deteccionEletroforese capilarCapillary electrophoresisOrientador: Dosil Pereira de JesusDissertação (mestrado) - Universidade Estadual de Campinas, Instituto de QuímicaResumo: Esta dissertação apresenta o desenvolvimento e figuras de mérito de validação de um método analítico, empregando Eletroforese Capilar de Zona (do inglês, Capillary Zone Electrophoresis CZE) com detecção condutométrica sem contato (do inglês, Capacitively-Coupled Contactless Conductivity Detectors - C4D), para a determinação de lactato em suor. As separações eletroforéticas foram conduzidas empregando coluna capilar de sílica fundida, com comprimento total de 50 cm (42 cm efetivo) e diâmetro interno de 50 µm. O eletrólito de corrida foi composto por ácido morfolino-etano-sulfônico (MES) e Histidina (His) em concentração equimolar de 10 mmol L-1. Brometo de cetiltrimetilamônio (CTAB) na concentração de 0,2 mmol L-1 foi adicionado ao eletrólito de corrida, como inversor de fluxo eletrosmótico. Na validação do método, os parâmetros analisados foram linearidade, seletividade, efeito matriz, exatidão, precisão, limite de detecção e limite de quantificação. Nesta validação, amostras de suor artificial e suor humano foram utilizadas. A viabilidade do método proposto ficou evidenciada pela boa linearidade (R2 = 0,9979) e valores aceitáveis de recuperação (97 a 118 %). A concentração original de lactato determinada na amostra de suor artificial foi (8,6 ± 0,1) mmol L-1 e na amostra real (36 ± 1) mmol L-1. A diferença entre os coeficientes angulares das curvas analíticas, obtidas pelos métodos de calibração externa em solvente e por superposição de matriz, foi de - 0,35 %, indicando que não houve efeito matriz. Os limites de detecção e quantificação foram 3,1 e 10,3 µmol L-1, respectivamente. Pela primeira vez foi demonstrada o desenvolvimento e validação de um método analítico empregando CZE-C4D para a determinação de lactato em suor. Desta forma, o método proposto apresenta um potencial significativo para aplicações, tanto na área de estudos esportivos e fisiológicos, quanto na medicina diagnósticaAbstract: This dissertation describes the development and validation of an analytical method using Capillary Zone Electrophoresis (CZE) with capacitively-coupled contactless conductivity detection (C4D) to determine lactate in sweat. Separations were conducted using a fused silica capillary column with a total length of 50 cm (42 cm effective) and an internal diameter of 50 µm. The background electrolyte was composed of 2-(N-morpholino)ethanesulfonic acid (MES) and Histidine (His) at an equimolar concentration of 10 mmol L-1. Cetyltrimethylammonium bromide (CTAB) at a concentration of 0.2 mmol L-1 was added to the background electrolyte as an electroosmotic flow inverter. In the validation, the assessed parameters included linearity, selectivity, matrix effect, accuracy, precision, limit of detection, and limit of quantification. The validation of the method was performed using artificial and human sweat samples. The feasibility of the proposed method was demonstrated by the good linearity (R2 = 0.9979) and acceptable recovery values (97 to 118%) obtained. The original lactate concentration determined in the artificial sweat sample was (8.6 ± 0.1) mmol L-1, and in the real sample, it was (36 ± 1) mmol L-1. The difference between the angular coefficients between the calibration curves, obtained by the external calibration methods in solvent and matrix match, was -0.35%, indicating the absence of matrix effect. The detection and quantification limits were 3.1 and 10.3 µmol L-1, respectively. For the first time, the development and validation of an analytical method employing CE-C4D for lactate determination in sweat were demonstrated. Thus, the proposed method shows significant potential for applications in sports, physiology, and diagnostic medicine studiesAbertoMestradoQuímica AnalíticaMestre em QuímicaFAPESPCAPES001[s.n.]Jesus, Dosil Pereira de, 1974-Simionato, Ana Valéria ColnaghiOliveira, Marcone Augusto Leal deUniversidade Estadual de Campinas (UNICAMP). Instituto de QuímicaPrograma de Pós-Graduação em QuímicaUNIVERSIDADE ESTADUAL DE CAMPINASRocha, Kionnys Novaes, 1991-20242024-02-21T00:00:00Zinfo:eu-repo/semantics/publishedVersioninfo:eu-repo/semantics/masterThesisapplication/pdf1 recurso online (61 p.) : il., digital, arquivo PDF.https://hdl.handle.net/20.500.12733/18105ROCHA, Kionnys Novaes. Desenvolvimento e validação de método analítico para determinação de lactato em suor empregando eletroforese capilar com detecção condutométrica sem contato. 2024. 1 recurso online (61 p.) Dissertação (mestrado) - Universidade Estadual de Campinas, Instituto de Química, Campinas, SP. Disponível em: https://hdl.handle.net/20.500.12733/18105. Acesso em: 3 set. 2024.https://repositorio.unicamp.br/acervo/detalhe/1389917Cover: https://repositorio.unicamp.br/capa/capa?codigo=1389917Requisitos do sistema: Software para leitura de arquivo em PDFporreponame:Biblioteca Digital de Teses e Dissertações da Universidade Estadual de Campinas (UNICAMP)instname:Universidade Estadual de Campinas (UNICAMP)instacron:UNICAMPinfo:eu-repo/semantics/openAccess2024-06-12T10:47:03Zoai::1389917Biblioteca Digital de Teses e DissertaçõesPUBhttp://repositorio.unicamp.br/oai/tese/oai.aspsbubd@unicamp.bropendoar:2024-06-12T10:47:03Biblioteca Digital de Teses e Dissertações da Universidade Estadual de Campinas (UNICAMP) - Universidade Estadual de Campinas (UNICAMP)false |
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