Efeito so sulfeto de hidrogênio ('H IND. 2 S') na resposta alérgica pulmonar de camundongos

Detalhes bibliográficos
Autor(a) principal: Benetti, Letícia Regina, 1987-
Data de Publicação: 2012
Tipo de documento: Dissertação
Idioma: por
Título da fonte: Biblioteca Digital de Teses e Dissertações da Universidade Estadual de Campinas (UNICAMP)
Texto Completo: https://hdl.handle.net/20.500.12733/1617324
Resumo: Orientador: Heloísa Helena de Araújo Ferreira
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spelling Efeito so sulfeto de hidrogênio ('H IND. 2 S') na resposta alérgica pulmonar de camundongosEffect of hydrogen sulfide (H IND. 2 S) in lung allergic response of miceSulfeto de hidrogênioEosinófilosAlergiaHydrogen sulfideEosinophilsAllergyOrientador: Heloísa Helena de Araújo FerreiraDissertação (mestrado) - Universidade Estadual de Campinas, Faculdade de Ciências MédicasResumo: Estudos têm demonstrado que o sulfeto de hidrogênio (H2S) tem um importante papel em vários aspectos da fisiologia e da patologia de diferentes doenças. Este estudo teve como objetivo investigar a ação do H2S nos marcadores de estresse oxidativo e sua interação com o oxido nítrico ('NO) na inflamação alérgica pulmonar de camundongos. Camundongos BALB/c foram sensibilizados com ovalbumina (OVA) e tratados com o doador de H2S, hidrosulfeto de sódio (NaHS), ou com o inibidor da oxido nítrico sinatase induzível (iNOS), 1400W, 30 minutos e 2h antes do desafio com OVA, respectivamente. Vinte e quatro, 48 e 96h após o desafio, os animais foram sacrificados e coletou-se o lavado broncoalveolar para contagem total e diferencial de leucócitos e dosagem dos níveis de NOx; os pulmões foram homogeneizados para análise da expressão das proteínas iNOS, MnSOD e Cu/ZnSOD por Western blotting e verificação dos níveis da 3-nitrotirosina (3-NT) por Slot blotting. A atividade da iNOS foi analisada pela conversão de L-arginina para L-citrulina. Os resultados demonstraram que o tratamento com NaHS inibiu a migração de neutrófilos para os pulmões de camundongos sensibilizados em 24h e 48h e de eosinófilos em 48h após o desafio alergênico, quando comparados com os camundongos controles (não tratados). De maneira semelhante, o tratamento com 1400W inibiu o influxo de eosinófilos para o pulmão dos camundongos alérgicos em 48h. O controles em 48h que foi inibida tanto pelo tratamento com NaHS como pelo 1400W. Neste período,desafio com OVA provocou aumento da expressão da iNOS nos pulmões dos animais observou-se aumento da atividade da NOS Ca -independente nos pulmões dos camundongos controles. O tratamento com 1400W, mas não com NaHS, provocou redução desta atividade. Quando comparados com os animais não desafiados, os níveis de NOx nos controles estavam aumentados em todos períodos estudados. Os tratamentos com 1400W e NaHS reduziram seus níveis em 48h e 96h, respectivamente. A expressão da 3-NT foi reduzida pelo 1400W em 48h, mas nenhum efeito foi observado com o NaHS. O desafio com OVA nos animais controles não alterou a expressão de MnSOD, mas provocou aumento da expressão da Cu/ZnSOD em 48h após o desafio com OVA. Neste período, o NaHS reduziu a expressão da MnSOD e o 1400W a expressão da Cu/ZnSOD. Estes resultados demonstram que o efeito anti-inflamatório do H2S na asma ao inibir a migração de eosinófilos e neutrófilos para os pulmões não é decorrente de mecanismos relacionados à via do 'NO. Se a redução da expressão da MnSOD verificada nos animais tratados com NaHS está relacionada à apoptose de eosinófilos e/ou neutrófilos e, consequentemente, à diminuição do conteúdo destas células no LBA precisa ser verificadoAbstract: Studies have shown that hydrogen sulfide (H2S) has an important role in various physiological and pathological aspects of different diseases. In this study, we verified the influence of H2S on oxidative stress and its interaction the nitric oxide ('NO) pathway in the allergic lung inflammation of mice. BALB/c mice were sensitized with ovalbumin (OVA) and treated the H2S donor, sodium hydrosulfide (NaHS), or with the inducible nitric oxide synthase (iNOS) inhibitor, 1400W, 30 minutes and 2h before OVA-challenge, respectively. Twenty-four, 48 and 96h after challenge, mice were sacrificed and the bronchoalveolar lavage (BAL) was collected to investigate the total and differential leukocyte counts and the NOx leveis. The lungs were homogenized to analyze the iNOS, MnSOD and Cu/ZnSOD protein expressions by Western blotting and the 3-nitrotyrosine (3-NT) leveis by Slot blotting. The iNOS activity was determined by conversion of L-arginine to L-citrulline. Results showed that NaHS-treatment of sensitized mice inhibited neutrophil migration at 24h and 48h, as well as the eosinophil influx to the lungs at 48h after allergen challenge when compared with control mice (untreated). Similarly, 1400W-treatment reduced the content of eosinophils in the BAL of allergic mice at 48 hours. OVA-challenge caused an increase in iNOS expression in the lungs of control mice at 48 hours, which was inhibited by NaHS or 1400W treatments. At this time, an increase in Ca+-independent NOS activity was observed in the lungs of control mice. The 1400W-treatment, but not NaHS-treatment, caused a reduction in this activity. When compared with non-challenged mice, NOx leveis were increased in coritrols at ali times studied. Treatment with 1400W or NaHS reduced their leveis at 48h and 96h, respectively. The 3-NT expression was reduced by 1400W at 48 hours, but no effect was observed with the NaHS-treatment. The OVA-challenge of control mice did not modify the MnSOD expression, but caused increased of Cu/ZnSOD expression at 48 hours. However, the NAHS reduced the MnSOD expression and 1400W inhibited the Cu/ZnSOD expression at this time. These results demonstrated that the anti-inflammatory effect of H2S in asthma by inhibiting eosinophils and neutrophil migration to the lungs is not due to mechanisms associated with 'NO pathway. If the reduced MnSOD expression observed in NaHS-treated mice is related with the eosinophil apoptosis and, consequently, decrease of inflammatory cells content in the BAL needs to be studiedMestradoFarmacologiaMestre em Farmacologia[s.n.]Ferreira, Heloísa Helena de AraújoZorzetto, Nicola Amanda ConranZanesco, AngelinaUniversidade Estadual de Campinas (UNICAMP). Faculdade de Ciências MédicasPrograma de Pós-Graduação em FarmacologiaUNIVERSIDADE ESTADUAL DE CAMPINASBenetti, Letícia Regina, 1987-2012info:eu-repo/semantics/publishedVersioninfo:eu-repo/semantics/masterThesisapplication/pdf85 f. : il.https://hdl.handle.net/20.500.12733/1617324BENETTI, Letícia Regina. Efeito so sulfeto de hidrogênio ('H IND. 2 S') na resposta alérgica pulmonar de camundongos. 2012. 85 f. Dissertação (mestrado) - Universidade Estadual de Campinas, Faculdade de Ciências Médicas, Campinas, SP. Disponível em: https://hdl.handle.net/20.500.12733/1617324. Acesso em: 3 set. 2024.https://repositorio.unicamp.br/acervo/detalhe/849974porreponame:Biblioteca Digital de Teses e Dissertações da Universidade Estadual de Campinas (UNICAMP)instname:Universidade Estadual de Campinas (UNICAMP)instacron:UNICAMPinfo:eu-repo/semantics/openAccess2017-02-18T06:33:30Zoai::849974Biblioteca Digital de Teses e DissertaçõesPUBhttp://repositorio.unicamp.br/oai/tese/oai.aspsbubd@unicamp.bropendoar:2017-02-18T06:33:30Biblioteca Digital de Teses e Dissertações da Universidade Estadual de Campinas (UNICAMP) - Universidade Estadual de Campinas (UNICAMP)false
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