Nanopartículas a base de poli(beta-amino éster) para entrega de material genético em células do epitélio pigmentado de retina (ARPE-19)

Detalhes bibliográficos
Autor(a) principal: Campese, Guilherme Capiraço, 1991-
Data de Publicação: 2019
Tipo de documento: Dissertação
Idioma: por
Título da fonte: Biblioteca Digital de Teses e Dissertações da Universidade Estadual de Campinas (UNICAMP)
Texto Completo: https://hdl.handle.net/20.500.12733/1637703
Resumo: Orientador: Marcelo Bispo de Jesus
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spelling Nanopartículas a base de poli(beta-amino éster) para entrega de material genético em células do epitélio pigmentado de retina (ARPE-19)Poly(beta-amino ester) based nanoparticles for gene delivery in retinal pigmented epithelium cells (ARPE-19)Epitélio pigmentado da retinaPolímerosTransfecçãoTecnicas de transferencia de genesNanopartículas poliméricasRetinal pigment epitheliumPolymersTransfectionGene transfer techniquesPolymeric nanoparticlesOrientador: Marcelo Bispo de JesusDissertação (mestrado) - Universidade Estadual de Campinas, Instituto de BiologiaResumo:Doenças associadas à retina são as maiores causas de deficiência visual mundialmente, sendo que destas uma gama possui carácter genético. O olho é especialmente propício para a aplicação de intervenções terapêuticas de cunho genético, por ter um relativo fácil acesso, uma estrutura fechada e presença da barreira hemato-retiniana. Possibilitando assim de ser explorado o desenvolvimento de vetores não-virais capazes de alterar a composição genética das células da retina. Ainda assim, a falta de compreensão sobre os mecanismos de transfecção, sua correlação com a estrutura química dos vetores e suas propriedades nanotoxicológicas tem sido um gargalo na aplicação desses vetores. Neste trabalho foram sintetizados e testados vetores não-virais poliméricos, feitos a partir de Poli(ß-Amino éster), um polímero biodegradável, sensível ao pH, de fácil síntese, para a entrega de material genético em células do epitélio pigmentado de retina ARPE-19. Utilizando uma metodologia de detecção múltipla, nossos resultados indicam uma expressiva capacidade de transfecção e baixa toxicidade dos complexos poliméricos. Além disso, demonstramos que a razão mássica por si não é suficiente para explicar a eficiência de transfecção dos complexos e que a divisão celular é um dos eventos chave para uma alta eficiência de transfecção. Sendo assim, este trabalho lança luz sobre os mecanismos de transfecção de complexos poliméricos feitos de Poli(ß-amino éster) contribuindo para o avanço no campo de terapias genéticas da câmara posterior do olhoAbstract: Diseases associated with the retina are one of the major causes for visual impairment worldwide of which a variety is genetic. The eye is especially suited for gene therapy interventions due to its relatively easy access, a closed structure and the presence of the blood-retinal barrier. Thus, allowing the development of non-viral vectors capable of altering the genetic profile of retinal cells. However, the lack of understanding about the transfection mechanisms, its correlation with their chemical structure and their nanotoxicological properties has been the bottleneck in the application of those vectors. In this work, polymeric non-viral vectors, made from poly(ß-Amino ester), a biodegradable, pH-sensitive polymer of easy synthesis were synthesized and tested for the delivery of genetic material to retinal pigmented epithelium cells ARPE-19. Using a multiple detection approach, we found an expressive transfection efficiency and low toxicity of the polyplexes. In addition, we have demonstrated that the mass ratio by itself is not enough to explain the transfection efficiency of the polyplexes and that cell division is one of the key events for high transfection rates. Thus, this work sheds light on the mechanisms of transfection of polyplexes made of poly(ß-amino ester) contributing to the advancement in the field of gene therapy interventions of the posterior chamber of the eyeMestradoBioquímicaMestre em Biologia Funcional e MolecularFAPESP2016/16259-1[s.n.]Jesus, Marcelo Bispo de, 1980-Ferreira, Carmen VeríssimaPessine, Francisco Benedito TeixeiraUniversidade Estadual de Campinas. Instituto de BiologiaPrograma de Pós-Graduação em Biologia Funcional e MolecularUNIVERSIDADE ESTADUAL DE CAMPINASCampese, Guilherme Capiraço, 1991-20192019-02-06T00:00:00Zinfo:eu-repo/semantics/publishedVersioninfo:eu-repo/semantics/masterThesisapplication/pdf1 recurso online (83 p.) : il., digital, arquivo PDF.https://hdl.handle.net/20.500.12733/1637703CAMPESE, Guilherme Capiraço. Nanopartículas a base de poli(beta-amino éster) para entrega de material genético em células do epitélio pigmentado de retina (ARPE-19). 2019. 1 recurso online (83 p.) Dissertação (mestrado) - Universidade Estadual de Campinas, Instituto de Biologia, Campinas, SP. Disponível em: https://hdl.handle.net/20.500.12733/1637703. Acesso em: 15 mai. 2024.https://repositorio.unicamp.br/acervo/detalhe/1095824Requisitos do sistema: Software para leitura de arquivo em PDFporreponame:Biblioteca Digital de Teses e Dissertações da Universidade Estadual de Campinas (UNICAMP)instname:Universidade Estadual de Campinas (UNICAMP)instacron:UNICAMPinfo:eu-repo/semantics/openAccess2019-12-09T11:55:10Zoai::1095824Biblioteca Digital de Teses e DissertaçõesPUBhttp://repositorio.unicamp.br/oai/tese/oai.aspsbubd@unicamp.bropendoar:2019-12-09T11:55:10Biblioteca Digital de Teses e Dissertações da Universidade Estadual de Campinas (UNICAMP) - Universidade Estadual de Campinas (UNICAMP)false
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