Estudo e caracterização de peptídeos não-ribossomais produzidos por Streptomyces sp. CBMAI 2043 usando espectrometria de massas
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Data de Publicação: | 2022 |
Tipo de documento: | Tese |
Idioma: | por |
Título da fonte: | Biblioteca Digital de Teses e Dissertações da Universidade Estadual de Campinas (UNICAMP) |
Texto Completo: | https://hdl.handle.net/20.500.12733/8312 |
Resumo: | Orientador: Daniel Fabio Kawano |
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Estudo e caracterização de peptídeos não-ribossomais produzidos por Streptomyces sp. CBMAI 2043 usando espectrometria de massasStudy and characterization of non-ribosomal peptides produced by Streptomyces sp. CBMAI 2043 using mass spectrometryEspectrometria de massaMetabólitosSurugamidaMass spectrometryMetabolitesSurugamideOrientador: Daniel Fabio KawanoTese (doutorado) - Universidade Estadual de Campinas, Instituto de QuímicaResumo: Streptomyces são actinobacterias Gram-positivas que possuem alto conteúdo G+C. Esses micro-organismos, que são encontrados nos mais diversos ambientes, são extremamente importantes, uma vez que mais de 500 antibióticos são produzidos por linhagens de Streptomyces.1 O avanço de técnicas de sequenciamento do genoma, bem como as ferramentas de bioinformática e de edição de genes permitiu explorar o metabolismo secundário de diferentes linhagens de Streptomyces e outros micro-organismos. Além disso, o desenvolvimento da plataforma GNPS (Global Natural Products Social Molecular Networking) facilitou a correlação de moléculas e a descoberta de análogos estruturais. A linhagem de Streptomyces sp. CBMAI 2043 foi isolada de Citrus reticulata e o sequenciamento do genoma indicou a presença de 23 clusters biossintéticos, dentre os quais se encontram policetídeo sintases (PKS), peptídeo não ribossomal sintetase (NRPS), terpenos, sideróforos e lantipeptídeos. Neste trabalho realizou-se a exploração do metabolismo secundário da Streptomyces sp. CBMAI 2043 em busca de metabólitos e análogos cujo cluster está predito no genoma. Foram detectadas surugamidas e cinco novos análogos estruturais e algumas metodologias de clonagem foram usadas com a finalidade de confirmar a biossíntese dessas moléculas. Também buscou-se correlacionar o metabólito ao gene anotado como sendo gene das manopeptimicinas (cluster 12). Por fim, com a finalidade de atribuir o metabólito ao cluster 23, obteve-se um organismo heterólogo usando a linhagem S. coelicolor M1152 como hospedeiro, sendo possível relacionar o metabólito leucinostatina a esse clusterAbstract: Streptomyces are gram-positive actinobacteria that have high G+C content. These microorganisms, which are found in the most diverse environments, are extremely important, as more than 500 antibiotics are produced by Streptomyces strains.1 The advance of genome sequencing techniques, bioinformatics and editing tools of genes allowed to explore the secondary metabolism of different Streptomyces strains and other microorganisms. In addition, the development of the GNPS (Global Natural Products Molecular Networking) platform has facilitated the correlation of molecules and the discovery of structural analogs. The Streptomyces sp. CBMAI 2043 was isolated from Citrus reticulata and genome sequencing indicated the presence of 23 biosynthetic gene clusters, among which are polycetide synthasis (PKS), non-ribosomal peptide synthetase (NRPS), terpenes, siderophores and lantipeptides. In this work the exploitation of the secondary metabolism of Streptomyces sp. was performed. CBMAI 2043 in search of metabolites and analogues whose cluster is predicted in the genome. Surugamides were detected and five new structural analogs and some cloning methodologies were used to confirm the biosynthesis of these molecules. It was also sought to correlate the metabolite to the annotated gene as gene of mannopeptimycins (cluster 12). In order to assign the metabolite to cluster 23, a heterologist was obtained using the S. coelicolor M1152 host, and it is possible to relate the leucinostatin metabolite to this clusterDoutoradoQuímica OrgânicaDoutora em CiênciasCNPQ164664/2018-1[s.n.]Kawano, Daniel Fábio, 1980-Nunes, Paulo Sérgio GonçalvesAlves, Danilo AntoniniCatharino, Rodrigo RamosLancellotti, MarceloUniversidade Estadual de Campinas (UNICAMP). Instituto de QuímicaPrograma de Pós-Graduação em QuímicaUNIVERSIDADE ESTADUAL DE CAMPINASGonçalves, Ana Beatriz, 1994-20222022-12-02T00:00:00Zinfo:eu-repo/semantics/publishedVersioninfo:eu-repo/semantics/doctoralThesisapplication/pdf1 recurso online (69 p.) : il., digital, arquivo PDF.https://hdl.handle.net/20.500.12733/8312GONÇALVES, Ana Beatriz. Estudo e caracterização de peptídeos não-ribossomais produzidos por Streptomyces sp. CBMAI 2043 usando espectrometria de massas. 2022. 1 recurso online (69 p.) 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