Efeito da administração intermitente de hPTH(1-34) nos estágios iniciais de reparo alveolar após exodontia de molares de ratos

Detalhes bibliográficos
Autor(a) principal: Neves, Juliana dos Santos, 1982-
Data de Publicação: 2008
Tipo de documento: Tese
Idioma: por
Título da fonte: Biblioteca Digital de Teses e Dissertações da Universidade Estadual de Campinas (UNICAMP)
Texto Completo: https://hdl.handle.net/20.500.12733/1617400
Resumo: Orientadores: Pedro Duarte Novaes, Cristiane Ribeiro Salmon
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spelling Efeito da administração intermitente de hPTH(1-34) nos estágios iniciais de reparo alveolar após exodontia de molares de ratosEffect of intermittent administration of hPTH(1-34) on the early stages of alveolar wound healing after rat molar extractionHormônio paratireóideoDesenvolvimento ósseoMorfometriaParathyroid hormoneBone growthMorphometryOrientadores: Pedro Duarte Novaes, Cristiane Ribeiro SalmonTese (doutorado) - Universidade Estadual de Campinas, Faculdade de Odontologia de PiracicabaResumo: A administração intermitente do hormônio paratireóideo (PTH) promove um aumento da massa óssea, sendo atualmente utilizado no tratamento de osteoporose. Entretanto, poucos estudos têm avaliado os efeitos do PTH sobre o metabolismo do osso alveolar, e mais especificamente, no processo de reparo desta estrutura, podendo este surtir um efeito favorável na cicatrização da ferida alveolar. Considerando-se que o padrão de cicatrização da ferida do alvéolo de molares de ratos é similar ao de humanos e a sua relevância clínica, este estudo teve como objetivo analisar o efeito da administração intermitente do PTH sobre o reparo alveolar após exodontia de molares de ratos. Ratas Wistar de 200g tiveram seus primeiros molares inferiores extraídos e receberam injeções subcutâneas de 40 ?g/kg de hPTH(1-34) (grupo PTH) ou solução veículo (grupo controle) em dias intemitentes após a exodontia. Os animais foram sacrificados aos 3, 5, 7 e 11 dias após a cirurgia. Análises histomorfométricas do volume de osso recém-formado, número de osteoblastos e osteoclastos TRAP-positivos foram realizadas em cortes histológicos seriados. O Ligante do receptor ativador do fator nuclear ?? (RANKL), Sialoproteína óssea (BSP) e Osteopontina (OPN) foram localizadas no alvéolo em cicatrização por imunohistoquímica. A expressão dos genes de Colágeno 1 (Col1?1), Fosfatase alcalina (Alp), Fator de crescimento insulínico (Igf-1), Osteocalcina (Ocn), Bsp, Opn, Osteoprotegerina (Opg) e Rankl, foi analisada por qRT-PCR. A presença de osso recém-formado foi notada em alvéolos a partir de 5 dias de reparo em ambos os grupos. O volume de osso recém-formado foi significativamente maior no grupo PTH nos períodos de 5, 7 e 11 dias (p<0.05), acompanhado de um número maior de osteoblastos aos 5 dias de reparo (p<0.05). No grupo controle houve um aumento gradual na expressão de todos os genes estudados, com exceção de OPN, nos períodos após a cirurgia. De um modo geral, a expressão de Col1?1, Alp, Igf-1 e Ocn foi maior no grupo PTH nos períodos iniciais, seguido por um decréscimo significativo aos 7 dias de reparo comparado ao grupo controle. A expressão de Bsp foi similar em ambos os grupos, enquanto a expressão de Opn foi menor vi no grupo PTH aos 7 e 11 dias de reparo, com estas proteínas apresentando a mesma distribuição nas trabéculas ósseas em formação no interior do alvéolo. O número de osteoclastos TRAP-positivos foi similar em ambos os grupos em todos os períodos avaliados, assim como o padrão de marcação para RANKL. Entretanto, a razão dos genes Rankl:Opg foi maior no grupo PTH aos 11 dias de reparo, sugerindo que o PTH pode favorecer a osteoclastogênese a partir deste período. Conclui-se que o tratamento intermitente com hPTH (1-34) teve um efeito anabólico sobre o processo de reparo do osso alveolar de forma pontual aos 5 dias, estimulando o aumento no número de osteoblastos e da expressão de genes relacionados a diferenciação e produção de matriz por estas células, causando consequentemente, um aumento no volume de osso recém-formado no interior do alvéoloAbstract: The intermittent administration of parathyroid hormone (PTH) promotes an increase in bone mass, and it is currently used to treat osteoporosis. However, few studies have evaluated the effects of PTH on the metabolism of the alveolar bone, and more specifically in the repair process of this structure, which may have a positive effect on alveolar wound healing. Considering that the pattern of the alveolar wound healing post molar extraction in rats is similar to that of the humans and its clinical relevance, this study aimed to analyze the effect of intermittent PTH administration on alveolar wound healing after extraction of rat molars. Wistar rats (200g) had their first molars extracted and received subcutaneous injections of 40 ?g/kg of hPTH (1-34) (PTH group) or vehicle solution (control group) in alternated days after the extraction. The animals were sacrificed at 3, 5, 7 and 11 days after surgery. Histomorphometric analysis of the volume of newly formed bone, number of osteoblasts and TRAP-positive osteoclasts were performed on serial histological sections. Receptor activator of nuclear factor ?? ligand (RANKL), bone sialoprotein (BSP) and osteopontin (OPN) were localized at the healing socket by immunohistochemistry. Collagen 1 (Col1?1), alkaline phosphatase (Alp), insulin growth factor (Igf-1), osteocalcin (Ocn), Bsp, Opn, osteoprotegerin (Opg) and Rankl gene expression was assessed by qRT-PCR. Newly formed bone was observed in sockets from 5 days of repair in both groups. The volume of newly formed bone was significantly higher in PTH group at 5, 7 and 11 days of repair (p <0.05). In the control group there was a gradual increase in the expression of all genes studied, except for Opn, through the periods of healing. Overall, the expression of Col1?1, Alp, Igf-1 and Ocn in the PTH group was higher at the initial periods, followed by a significant down-regulation at 7 days of repair compared to the control group. Bsp expression was similar in both groups, while Opn expression was down-regulated by PTH at 7 and 11 days of repair. Both proteins showed the same distribution on the forming trabeculae in the socket. The number of TRAP-positive osteoclasts was similar in both groups in all periods of repair, as well as the labeling pattern for RANKL. However, viii Rankl:Opg ratio was higher in the PTH group at 11 days of repair, suggesting that PTH may promote osteoclastogenesis from this period. In conclusion, the intermittent treatment with hPTH-(1-34) had an anabolic effect on the alveolar wound healing specifically at 5 days of repair, stimulating an increase on the osteoblast number and on the expression of genes related to the differentiation and production of bone matrix by these cells, thereby resulting in increased volume of newly formed bone in the healing socketDoutoradoHistologia e EmbriologiaDoutor em Biologia Buco-Dental[s.n.]Novaes, Pedro Duarte, 1960-Salmon, Cristiane Ribeiro, 1975-Polacow, Maria Luiza OzoresSilva, Adriana Fernandes daSilverio, Karina GonzalesMarques, Marcelo RochaUniversidade Estadual de Campinas (UNICAMP). Faculdade de Odontologia de Piracicaba (FOP)Programa de Pós-Graduação em Biologia Buco-DentalUNIVERSIDADE ESTADUAL DE CAMPINASNeves, Juliana dos Santos, 1982-20122008-02-18T00:00:00Zinfo:eu-repo/semantics/publishedVersioninfo:eu-repo/semantics/doctoralThesisapplication/pdf55 f. : il.https://hdl.handle.net/20.500.12733/1617400NEVES, Juliana dos Santos. Efeito da administração intermitente de hPTH(1-34) nos estágios iniciais de reparo alveolar após exodontia de molares de ratos. 2012. 55 f. Tese (doutorado) - Universidade Estadual de Campinas, Faculdade de Odontologia de Piracicaba, Piracicaba, SP. Disponível em: https://hdl.handle.net/20.500.12733/1617400. 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