Interações de plaquetas de pacientes com anemia falciforme e células endoteliais de veia umbilical humana (HUVEC)

Detalhes bibliográficos
Autor(a) principal: Proença-Ferreira, Renata, 1980-
Data de Publicação: 2013
Tipo de documento: Tese
Idioma: por
Título da fonte: Biblioteca Digital de Teses e Dissertações da Universidade Estadual de Campinas (UNICAMP)
Texto Completo: https://hdl.handle.net/20.500.12733/1620967
Resumo: Orientadores: Nicola Amanda Conran Zorzetto, Fernando Ferreira Costa
id UNICAMP-30_6e780494fd742ed6f24e053ddb2eba11
oai_identifier_str oai::912028
network_acronym_str UNICAMP-30
network_name_str Biblioteca Digital de Teses e Dissertações da Universidade Estadual de Campinas (UNICAMP)
repository_id_str
spelling Interações de plaquetas de pacientes com anemia falciforme e células endoteliais de veia umbilical humana (HUVEC)Interactions between platelets from sickle cell anemia patients and human umbilical vein endothelial cellsAnemia falciforme - PlaquetasInflamaçãoMoléculas de adesão celularCélulas endoteliaisCitometria de fluxoSickle cell anemia , plateletsInflammationCell adhesion mleculesEndothelial cellsFlow cytometryOrientadores: Nicola Amanda Conran Zorzetto, Fernando Ferreira CostaTese (doutorado) - Universidade Estadual de Campinas, Faculdade de Ciências MédicasResumo: A anemia falciforme (AF) é uma doença causada por uma mutação de ponto (troca do aminoácido glutâmico pela valina), que resulta na síntese de uma hemoglobina anômala, a hemoglobina S (HbS). A principal causa de morbidade para portadores de AF é a vaso-oclusão, que resulta da adesão anormal de células vermelhas e brancas ao endotélio, e consequêntemente diminui o fluxo sanguíneo. As plaquetas de pacientes AF apresentam um aumento das suas propriedades adesivas, e por isso, sugere-se a sua participação no processo de vaso-oclusão. Nossos dados mostraram que essas plaquetas são capazes de ativarem células endoteliais, in vitro, em ensaios de co-culturas com células endoteliais de veia umbilical humana (HUVEC) com plaquetas. A expressão da molécula de adesão intercelular 1 (ICAM-1) e a da E-selectina das células HUVEC aumentou significativamente na sua superfície, após a sua co-incubação com plaquetas de pacientes AF. A ativação das moléculas de adesão depende do contato físico entre plaquetas e células HUVEC, pois a utilização de insertos de transwell inibiu significativamente a expressão de ICAM-1 e E-selectina na superfície das HUVEC. A co-incubação de plaquetas de pacientes AF com as células HUVEC resultou em uma maior produção e liberação de mediadores inflamatórios (citocinas); a interleucina 8 (IL-8) e da interleucina 1 beta (IL-1?) quantificadas do sobrenadante das co-culturas com essas células. As plaquetas desses pacientes possuem propriedades inflamatórias, pois liberaram mais fator plaquetário 4 (PF4), uma quimiocina pró-agregante, quantificada do sobrenadante de cultura dessas plaquetas, em relação às plaquetas de indivíduos saudáveis. O aumento na expressão das moléculas de adesão, integrina ?IIb?3 e P-selectina, na superfície das plaquetas de pacientes AF, podem indicar que há um aumento na sua ativação plaquetária, favorecendo a sua adesão ao endotélio inflamado. O fator nuclear-?B (NF-?B) é um fator de transcrição nuclear muito importante envolvido na ativação de genes, como genes que codificam de moléculas de adesão endotelial, e os nossos resultados de expressão gênica mostraram que há um aumento na expressão do gene NF?BIA (subunidade p50 do NF-?B), em associação com o aumento na expressão do gene ICAM1 (que codifica a molécula de adesão ICAM-1) em HUVEC, após co-cultura dessas células com plaquetas de pacientes AF. A presença do inibidor BAY 11-7082 (inibe a via de sinalização NF-?B), diminuiu a expressão das moléculas de adesão ICAM-1 e E-selectina na superfície das células HUVEC, quando co-incubadas com plaquetas de pacientes AF. Os nossos dados são importantes e corroboram com a nossa hipótese de que as plaquetas participam no processo de vaso-oclusão na anemia falciforme, pois apresentam a capacidade de ativar células endoteliais (in vitro) tornando-as inflamatórias e mais adesivas. Portanto, sugerimos que as plaquetas representam um importante alvo para novas abordagens terapêuticas na anemia falciformeAbstract: Sickle cell anemia (SCA) is a disease caused by a point mutation (causing the exchange of glutamic acid for valine), which results in the synthesis of an abnormal hemoglobin, hemoglobin S (HbS). The principal cause of morbidity in patients with SCA is vaso-occlusion, which results from the abnormal adhesion of red blood cells and white cells to blood vessel walls, leading to decreases in blood flow. Platelets from SCA patients present an increase in their adhesive properties and, therefore, we have previously suggested that they may participate in the vaso-occlusive process. Our current data show that platelets from SCA patients are able to activate endothelial cells, in vitro, in co-culture assays using Human Umbilical Vein Endothelial Cells (HUVEC) that were co-incubated with platelets from SCA patients. The expression of intercellular adhesion molecule 1 (ICAM-1) and E-selectin was significantly increased on the surface of HUVEC cells after their co-incubation with platelets from SCA patients (SCA platelets). The activation of adhesion molecule expression observed depended on the physical contact between platelets and HUVEC cells, as transwell inserts were able to significantly inhibit the expression of ICAM-1 and E-selectin on HUVEC following their culture in the presence of SCA platelets. The co-incubation of SCA platelets with HUVEC cells also resulted in a higher production and release of inflammatory mediators (cytokines), such as interleukin 8 (IL-8) and interleukin 1 beta (IL-1?) in the supernatant of these co-cultures. Platelets from SCA patients have inflammatory properties, releasing more platelet factor 4 (PF4), a pro-aggregating chemokine, than platelets from healthy subjects. The increased expression of the adhesion molecules, integrin ?IIb?3 and P-selectin, on the surface of platelets from SCA patients, may also indicate an increased platelet activation, favoring their adhesion to the inflamed endothelium. Nuclear factor-?B (NF-?B) is an important nuclear transcription factor involved in the activation of genes, including endothelial adhesion molecules genes. We found an increased gene expression of NF?BIA (encoding the p50 subunit of NF-kB), in association with increased gene expression of ICAM1 (encodes ICAM-1) in HUVEC, following the co-culture of these cells with platelets from SCA patients. The presence of the BAY 11-7082 inhibitor (inhibits the NF-?B signaling pathway) decreased the expressions of the ICAM-1 and E-selectin adhesion molecules on the surface of HUVEC cells when co-incubated with platelets from SCA patients. Our data corroborate our hypothesis that platelets probably participate in the process of vaso-occlusion in sickle cell anemia, since they have the ability to activate endothelial cells (in vitro), in turn, making them more inflammatory and adhesive. As such, we suggest that platelets represent an important target for new therapeutic approaches in sickle cell anemiaDoutoradoClínica MédicaDoutora em Clínica Médica[s.n.]Zorzetto, Nicola Amanda Conran, 1972-Costa, Fernando Ferreira, 1950-Ozelo, Margareth CastroDe Paula, Erich ViniciusGualandro, Sandra Fatima MenosiFigueiredo, Maria StellaUniversidade Estadual de Campinas (UNICAMP). Faculdade de Ciências MédicasPrograma de Pós-Graduação em Clínica MédicaUNIVERSIDADE ESTADUAL DE CAMPINASProença-Ferreira, Renata, 1980-2013info:eu-repo/semantics/publishedVersioninfo:eu-repo/semantics/doctoralThesisapplication/pdf171 p. : il.https://hdl.handle.net/20.500.12733/1620967PROENÇA-FERREIRA, Renata. Interações de plaquetas de pacientes com anemia falciforme e células endoteliais de veia umbilical humana (HUVEC). 2013. 171 p. Tese (doutorado) - Universidade Estadual de Campinas, Faculdade de Ciências Médicas, Campinas, SP. Disponível em: https://hdl.handle.net/20.500.12733/1620967. Acesso em: 3 set. 2024.https://repositorio.unicamp.br/acervo/detalhe/912028porreponame:Biblioteca Digital de Teses e Dissertações da Universidade Estadual de Campinas (UNICAMP)instname:Universidade Estadual de Campinas (UNICAMP)instacron:UNICAMPinfo:eu-repo/semantics/openAccess2017-02-18T07:04:59Zoai::912028Biblioteca Digital de Teses e DissertaçõesPUBhttp://repositorio.unicamp.br/oai/tese/oai.aspsbubd@unicamp.bropendoar:2017-02-18T07:04:59Biblioteca Digital de Teses e Dissertações da Universidade Estadual de Campinas (UNICAMP) - Universidade Estadual de Campinas (UNICAMP)false
dc.title.none.fl_str_mv Interações de plaquetas de pacientes com anemia falciforme e células endoteliais de veia umbilical humana (HUVEC)
Interactions between platelets from sickle cell anemia patients and human umbilical vein endothelial cells
title Interações de plaquetas de pacientes com anemia falciforme e células endoteliais de veia umbilical humana (HUVEC)
spellingShingle Interações de plaquetas de pacientes com anemia falciforme e células endoteliais de veia umbilical humana (HUVEC)
Proença-Ferreira, Renata, 1980-
Anemia falciforme - Plaquetas
Inflamação
Moléculas de adesão celular
Células endoteliais
Citometria de fluxo
Sickle cell anemia , platelets
Inflammation
Cell adhesion mlecules
Endothelial cells
Flow cytometry
title_short Interações de plaquetas de pacientes com anemia falciforme e células endoteliais de veia umbilical humana (HUVEC)
title_full Interações de plaquetas de pacientes com anemia falciforme e células endoteliais de veia umbilical humana (HUVEC)
title_fullStr Interações de plaquetas de pacientes com anemia falciforme e células endoteliais de veia umbilical humana (HUVEC)
title_full_unstemmed Interações de plaquetas de pacientes com anemia falciforme e células endoteliais de veia umbilical humana (HUVEC)
title_sort Interações de plaquetas de pacientes com anemia falciforme e células endoteliais de veia umbilical humana (HUVEC)
author Proença-Ferreira, Renata, 1980-
author_facet Proença-Ferreira, Renata, 1980-
author_role author
dc.contributor.none.fl_str_mv Zorzetto, Nicola Amanda Conran, 1972-
Costa, Fernando Ferreira, 1950-
Ozelo, Margareth Castro
De Paula, Erich Vinicius
Gualandro, Sandra Fatima Menosi
Figueiredo, Maria Stella
Universidade Estadual de Campinas (UNICAMP). Faculdade de Ciências Médicas
Programa de Pós-Graduação em Clínica Médica
UNIVERSIDADE ESTADUAL DE CAMPINAS
dc.contributor.author.fl_str_mv Proença-Ferreira, Renata, 1980-
dc.subject.por.fl_str_mv Anemia falciforme - Plaquetas
Inflamação
Moléculas de adesão celular
Células endoteliais
Citometria de fluxo
Sickle cell anemia , platelets
Inflammation
Cell adhesion mlecules
Endothelial cells
Flow cytometry
topic Anemia falciforme - Plaquetas
Inflamação
Moléculas de adesão celular
Células endoteliais
Citometria de fluxo
Sickle cell anemia , platelets
Inflammation
Cell adhesion mlecules
Endothelial cells
Flow cytometry
description Orientadores: Nicola Amanda Conran Zorzetto, Fernando Ferreira Costa
publishDate 2013
dc.date.none.fl_str_mv 2013
dc.type.status.fl_str_mv info:eu-repo/semantics/publishedVersion
dc.type.driver.fl_str_mv info:eu-repo/semantics/doctoralThesis
format doctoralThesis
status_str publishedVersion
dc.identifier.uri.fl_str_mv https://hdl.handle.net/20.500.12733/1620967
PROENÇA-FERREIRA, Renata. Interações de plaquetas de pacientes com anemia falciforme e células endoteliais de veia umbilical humana (HUVEC). 2013. 171 p. Tese (doutorado) - Universidade Estadual de Campinas, Faculdade de Ciências Médicas, Campinas, SP. Disponível em: https://hdl.handle.net/20.500.12733/1620967. Acesso em: 3 set. 2024.
url https://hdl.handle.net/20.500.12733/1620967
identifier_str_mv PROENÇA-FERREIRA, Renata. Interações de plaquetas de pacientes com anemia falciforme e células endoteliais de veia umbilical humana (HUVEC). 2013. 171 p. Tese (doutorado) - Universidade Estadual de Campinas, Faculdade de Ciências Médicas, Campinas, SP. Disponível em: https://hdl.handle.net/20.500.12733/1620967. Acesso em: 3 set. 2024.
dc.language.iso.fl_str_mv por
language por
dc.relation.none.fl_str_mv https://repositorio.unicamp.br/acervo/detalhe/912028
dc.rights.driver.fl_str_mv info:eu-repo/semantics/openAccess
eu_rights_str_mv openAccess
dc.format.none.fl_str_mv application/pdf
171 p. : il.
dc.publisher.none.fl_str_mv [s.n.]
publisher.none.fl_str_mv [s.n.]
dc.source.none.fl_str_mv reponame:Biblioteca Digital de Teses e Dissertações da Universidade Estadual de Campinas (UNICAMP)
instname:Universidade Estadual de Campinas (UNICAMP)
instacron:UNICAMP
instname_str Universidade Estadual de Campinas (UNICAMP)
instacron_str UNICAMP
institution UNICAMP
reponame_str Biblioteca Digital de Teses e Dissertações da Universidade Estadual de Campinas (UNICAMP)
collection Biblioteca Digital de Teses e Dissertações da Universidade Estadual de Campinas (UNICAMP)
repository.name.fl_str_mv Biblioteca Digital de Teses e Dissertações da Universidade Estadual de Campinas (UNICAMP) - Universidade Estadual de Campinas (UNICAMP)
repository.mail.fl_str_mv sbubd@unicamp.br
_version_ 1809189103011364864

Registros relacionados