Sangue de cordão umbilical e placentário como fonte para concentrado de hemácias : comparação de métodos de processamento e perfil de citocinas e fatores de crescimento

Detalhes bibliográficos
Autor(a) principal: Risso, Mariane Aparecida, 1993-
Data de Publicação: 2023
Tipo de documento: Tese
Idioma: por
Título da fonte: Biblioteca Digital de Teses e Dissertações da Universidade Estadual de Campinas (UNICAMP)
Texto Completo: https://hdl.handle.net/20.500.12733/15912
Resumo: Orientadores: Ângela Cristina Malheiros Luzo, Elenice Deffune
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spelling Sangue de cordão umbilical e placentário como fonte para concentrado de hemácias : comparação de métodos de processamento e perfil de citocinas e fatores de crescimentoUmbilical cord blood as a source of red blood cells : comparison of processing methods and cytokines and growth factors profileSangue fetalTransfusão de eritrócitosControle de qualidadeCitocinasMedicina regenerativaFetal bloodErythrocyte transfusionControl qualityCytokinesRegenerative medicineOrientadores: Ângela Cristina Malheiros Luzo, Elenice DeffuneTese (doutorado) - Universidade Estadual de Campinas, Faculdade de Ciências MédicasResumo: Introdução: A utilização do Sangue de Cordão Umbilical e Placentário (SCUP) surgiu como fonte alternativa para o transplante de células progenitoras hematopoiéticas (CPHs). Entretanto, com o passar dos anos, novas práticas foram adotadas em transplante de CPHs, e uma baixa utilização do SCUP vem sendo observada. Novas aplicações para o SCUP têm sido exploradas, entre elas a utilização do SCUP como fonte de concentrado de hemácias (CH) para fins transfusionais. Objetivos: Comparar dois métodos de processamento, um manual e um automatizado, para a obtenção de CH-SCUP; avaliar os parâmetros de controle de qualidade das unidades de CH-SCUP obtidas com as unidades de CH de doadores adultos aliquotados (CH-A), e quantificar as citocinas e fatores de crescimento (FCs) no sobrenadante dos CH-SCUP e CH-A. Materiais e Métodos: 24 unidades de SCUP foram desleucocitadas e processadas em dois diferentes métodos: manual (P1 / n=12) e automático (P2 / n=12). Eles foram comparados com cinco unidades de CH-A aliquotados em unidades pediátricas. Os CH-SCUP e os CH-A foram armazenadas por 14 dias e tiveram seus parâmetros hematológicos, bioquímicos e microbiológicos analisados em D1, D7 e D14. As dosagens de FCs e citocinas foram realizadas por imunoensaios single-plex e multiplex em amostras do sobrenadante dos CH-SCUP e CH-A. Resultados: O volume médio das unidades de CH-SCUP processadas foi de 45mL para P1 e 39mL para P2; a média do hematócrito atingiu 57% para P1 e 59% para P2. CH-A registrou um volume médio de 44mL. Parâmetros hematológicos e bioquímicos analisados em CH-SCUP e CH-A apresentaram comportamentos semelhantes durante o tempo de armazenamento. Foram identificadas citocinas e FCs com características pró-inflamatórias e imunomoduladoras, sendo que todas as concentrações, exceto para insulina, foram maiores nos CH-SCUP (P1 e P2) do que em CH-A. Fator de crescimento derivado de plaquetas (PDGF) AB/BB e Trombospodina-2 não foram observados no sobrenadante dos CH-A. Não houve diferença significativa (p>0,05) nas concentrações de FCs e citocinas entre os resultados registrados para ambos os protocolos de processamento de CH-SCUP (P1vs.P2). Conclusão: Os resultados obtidos enfatizam o grande potencial do SCUP como uma fonte alternativa promissora na produção de CH. Além disso, sugerem que o CH-SCUP tem a capacidade de disponibilizar mais fatores de crescimento e citocinas do que o CH-A em terapias transfusionais. A exploração do plasma sobrenadante de SCUP amplia também suas aplicações na medicina regenerativa. O entendimento das características do processamento do SCUP abre perspectivas para futuras abordagens clínicas e amplia as possibilidades terapêuticas disponíveisAbstract: Background: Cord Blood (CB) has emerged as an alternative source for hematopoietic stem cell transplantation. However, over the years, new practices have been adopted in hematopoietic stem cell transplantation, and low utilization of CB has been observed. New applications for CB have been explored, including its use as a source of red blood cells (RBCs) for transfusion purposes. Objectives: A rigorous evaluation of two processing methods - manual and automatic - to derive RBCs from cord blood (U-RBCs) was carried out. The objective was to compare the quality control parameters of the U-RBC units obtained with those of aliquoted adult donor RBC units (A-RBCs). Furthermore, the levels of cytokines and growth factors (GFs) presented in the supernatant of both U-RBCs and A-RBCs were also measured and compared. Materials and Methods: 24 CB units were leukoreduced and processed using two different methods: manual (P1 / n=12) and automatic (P2 / n=12). They were compared with five units of fractionated A-RBC in pediatric units. U-RBCs and A-RBCs were stored for 14 days, and their hematological, biochemical, and microbiological parameters were measured on D1, D7, and D14. The concentrations of GFs and cytokines were measured by single-plex and multiplex immunoassays in samples of the supernatant of U-RBCs and A-RBCs. Results: The mean volume of processed U-RBC units was 45mL for P1 and 39mL for P2; the mean hematocrit reached 57% for P1 and 59% for P2. A-RBCs recorded a mean volume of 44mL. Hematological and biochemical parameters analyzed in both U-RBCs and A-RBCs showed similar behaviors during the storage time. Cytokines and GFs with pro-inflammatory and immunomodulatory profiles were identified, in all samples, and, except for insulin, being higher in U-RBCs (P1 and P2) than in A-RBCs. Platelet-derived growth factor (PDGF) AB/BB and Thrombospondin-2 were not observed in the supernatant of A-RBCs. There was no significant difference (p>0.05) in GF and cytokine concentrations between the results obtained for both U-RBC processing protocols (P1 vs. P2). Conclusions: The results obtained emphasize the great potential of CB as a promising alternative source for RBC production. Additionally, they suggest that U-RBCs can provide more GFs and cytokines than A-RBCs in transfusion therapies. Exploring the supernatant plasma of U-RBCs also extends its applications in regenerative medicine. Understanding the characteristics of CB processing opens perspectives for future clinical approaches and broadens the available therapeutic possibilitiesAbertoDoutoradoCirurgia TranslacionalDoutora em CiênciasFAPESP2016/25281-0CAPES001[s.n.]Luzo, Angela Cristina Malheiros, 1958-Deffune, EleniceNunes, Helga CaputoCarvalho, Marcelo Addas deRocha, Vanderson GeraldoUniversidade Estadual de Campinas (UNICAMP). Faculdade de Ciências MédicasPrograma de Pós-Graduação em Ciências da CirurgiaUNIVERSIDADE ESTADUAL DE CAMPINASRisso, Mariane Aparecida, 1993-20232023-10-06T00:00:00Zinfo:eu-repo/semantics/publishedVersioninfo:eu-repo/semantics/doctoralThesisapplication/pdf1 recurso online (90 p.) : il., digital, arquivo PDF.https://hdl.handle.net/20.500.12733/15912RISSO, Mariane Aparecida. 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