Ação do veneno de bothrops lanceolatus (fer de lance) na junção neuromuscular e no musculo esqueletico de camundongos

Detalhes bibliográficos
Autor(a) principal: Araujo, Lia Lobo de
Data de Publicação: 2005
Tipo de documento: Dissertação
Idioma: por
Título da fonte: Biblioteca Digital de Teses e Dissertações da Universidade Estadual de Campinas (UNICAMP)
Texto Completo: https://hdl.handle.net/20.500.12733/1601250
Resumo: Orientador: Marcos Dias Fontana
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spelling Ação do veneno de bothrops lanceolatus (fer de lance) na junção neuromuscular e no musculo esqueletico de camundongosNeostigminaAnimais venenososCobraOrientador: Marcos Dias FontanaDissertação (mestrado) - Universidade Estadual de Campinas, Faculdade de Ciências MédicasResumo: As serpentes venenosas ou peçonhentas vulnerantes (inoculam oveneno na presa) correspondem a 450 espécies das 3000 conhecidas. Os venenos de serpentes do gênero Bothrops induzem efeitos locais intensos tais como dor, edema, hemorragia e necrose. Nesse trabalho investigamos a ação do veneno de Bothrops lanceolatus (espécie encontrada na Ilha da Martinica, América Central) na junção neuromuscular e no músculo esquelético de camundongos, a uma dose pré-estabelecida de 20 Jlg/ml (dose que apresentou efeitos mais constantes e nítidos com o mesmo padrão de resposta, depois de testarmos doses de 15 á 60 Jlg/ml) . Nas preparações nervo ftênico-diaftagma de camundongos, com estimulação elétrica indireta, o veneno de Bothrops lanceolatus induziu aumento inicial das contrações musculares e o aparecimento de contrações espontâneas (efeitos pré-sinápticos) seguido por bloqueio neuromuscular de 70 % em 182,6 :t 15,7 min (n=4). A Neostigmina (Neo, 5,8JlM) e a 4- aminopiridina (4AP, 53 JlM) antagonizaram o bloqueio produzido pelo veneno, nessa preparação, sendo que com a Neo o antagonismo foi parcial (64,4% :t 9,2) (n=5) e com a 4AP o antagonismo foi total (n=5). Utilizando-se a estimulação elétrica direta, o veneno na dose estudada não alterou a amplitude da resposta contrátil (n=4), confirmando que sua ação provavelmente se dá na junção neuromuscular e não nas fibras musculares da preparação. Nas preparações diafragma cronicamente desnervado de camundongos (n=4), a contratura induzida pela adição de acetilcolina (Ach, 36 JlM) foi inibida pelo veneno, sugerindo uma ação nos receptores colinérgicos nicotínicos pós-sinápticos . o estudo dos Potenciais Bioelétricos nas preparações nervo frênicodiafragma de camundongos, revelou ausência de alterações no estudo do potencial de membrana (n=4), portanto na dose estudada o veneno não possui ação despolarizante sobre a fibra muscular do diafragma de camundongo. Quanto ao estudo do potencial de placa terminal em miniatura (pptm), observou-se um progressivo decréscimo na amplitude e na freqüência dos potenciais até seu total desaparecimento. Esse bloqueio é totalmente revertido tanto pela neostigmina (5,8flM) (em 11,6 :!:3,6 min) (n=4) como pela 4-aminopiridina (53flM) (em 5,6 :!:0,6 min) (n=4) . Isso vem confirmar, mais uma vez, que a ação do veneno tem grande probabilidade de ocorrer na região pós-sináptica, nos receptores colinérgicos nicotínicos. Foram realizados também, experimentos com a preparação biventer cérvicis de pintainho (n=8), para comparar os resultados com aqueles obtidos com a preparação diafragma cronicamente desnervado de camundongo (que desenvolve a neoformação de receptores ao longo de toda fibra muscular, semelhante ás fibras das aves). A contratura induzida de acetilcolina (36 flM) também foi inibida pelo veneno, confirmando os resultados obtidos nas preparações diafragma cronicamente desnervado, e sugerindo novamente que o veneno tenha uma ação nos receptores colinérgicos nicotínicos pós-sinápticos . Com esse trabalho concluímos que o veneno de Bothrops lanceolatus (20flglmI) provoca um bloqueio neuromuscular que é revertido parcialmente pela neostigmina e totalmente pela 4-aminopiridina e que não possui ação despolarizante nas fibras musculares. Embora esse veneno tenha apresentado tanto efeitos pré como pós-sinápticos, nos experimentos "in vitro", com a dose estudada, os efeitos pós-sinápticos são mais evidentesAbstract: Various Bothrops snake venoms cause neuromuscular blockade in avian and mammalian nerve-musc1e preparations in vitro. In this work, we examined the neuromuscular action of Bothrops lanceolatus venom in mouse phrenic nerve-diaphragm musc1epreparation. In indirectly stimulated mouse phrenic nerve diaphragm muscle preparations, B. lanceolatus venom (20 J!glmI) caused an initial facilitation of the musc1e contractions and induced spontaneous contractions followed by progressive neuromuscular blockade (70% in 182,6 :t 15,7 min , n=4) . Neostigmine (5,8 JiM) partially reversed this blockade (64.4% :t 9,2 , (n=5), whereas 4-aminopyridine (53 pM) totally reversed the blockade (n=5). In contrast, the twitch-tension responses in directly stimulated preparations were unaltered by the venom (20 J!glml) after 30min. In chronically denervated diaphragms, the contractile responses to acetylcholine (361JM) were inhibited by the venom (n=4) in 20/40min. Similar results was obtained using chick biventer cervicis preparations (n=4) in 20/60 mino Bothrops lanceolatus venom (20 J!glml) did cause membrane depolarization or alter the membrane resting potential in mouse hemi diaphragm preparations (n=4). However, the venom (20J!glmI) caused a progressive decrease in the amplitude and &equency of the miniature endplate potentials that eventually resulted in total blockade. This blockade was totally reversed by neostigmine 5,81JM(in 11,6 :t 3,6 min, n = 4) and 4-aminopyridine 53IJM(in 5,6 :t 0,6 min, n = 4). These results indicate that B. lanceolatus venom has pre and post-synaptic actionsMestradoMestre em Farmacologia[s.n.]Fontana, Marcos Dias, 1945-2005Antunes, EdsonBraga, Angélica de Fátima de AssunçãoFerreira, Eloisa HelenaUniversidade Estadual de Campinas (UNICAMP). Faculdade de Ciências MédicasPrograma de Pós-Graduação em FarmacologiaUNIVERSIDADE ESTADUAL DE CAMPINASAraujo, Lia Lobo de20052005-01-18T00:00:00Zinfo:eu-repo/semantics/publishedVersioninfo:eu-repo/semantics/masterThesisapplication/pdf113 p. : il.(Broch.)https://hdl.handle.net/20.500.12733/1601250ARAUJO, Lia Lobo de. Ação do veneno de bothrops lanceolatus (fer de lance) na junção neuromuscular e no musculo esqueletico de camundongos. 2005. 113 p. Dissertação (mestrado) - Universidade Estadual de Campinas, Faculdade de Ciências Médicas, Campinas, SP. Disponível em: https://hdl.handle.net/20.500.12733/1601250. Acesso em: 2 set. 2024.https://repositorio.unicamp.br/acervo/detalhe/359135porreponame:Biblioteca Digital de Teses e Dissertações da Universidade Estadual de Campinas (UNICAMP)instname:Universidade Estadual de Campinas (UNICAMP)instacron:UNICAMPinfo:eu-repo/semantics/openAccess2017-02-18T04:20:34Zoai::359135Biblioteca Digital de Teses e DissertaçõesPUBhttp://repositorio.unicamp.br/oai/tese/oai.aspsbubd@unicamp.bropendoar:2017-02-18T04:20:34Biblioteca Digital de Teses e Dissertações da Universidade Estadual de Campinas (UNICAMP) - Universidade Estadual de Campinas (UNICAMP)false
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