Caracterização do perfil proteômico de fibroblastos gengivais a partir de pacientes com Síndrome de Chediak-Higashi clássica e atípica

Detalhes bibliográficos
Autor(a) principal: Almeida, Amanda Bandeira de, 1991-
Data de Publicação: 2021
Tipo de documento: Tese
Idioma: por
Título da fonte: Biblioteca Digital de Teses e Dissertações da Universidade Estadual de Campinas (UNICAMP)
Texto Completo: https://hdl.handle.net/20.500.12733/1640933
Resumo: Orientador: Francisco Humberto Nociti Júnior
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spelling Caracterização do perfil proteômico de fibroblastos gengivais a partir de pacientes com Síndrome de Chediak-Higashi clássica e atípicaCharacterization of the proteomic profile of gingival fibroblasts obtained from patients with classic and atypical Chediak-Higashi SyndromeSíndrome de Chediak-HigashiChediak-Higashi syndromeOrientador: Francisco Humberto Nociti JúniorTese (doutorado) - Universidade Estadual de Campinas, Faculdade de Odontologia de PiracicabaResumo: A síndrome de Chediak-Higashi (CHS) é uma condição autossômica recessiva rara, que ocorre como resultado de mutações no gene regulador do transporte lisossomal (LYST). Sua classificação é baseada na idade em que a doença se apresenta: durante a infância (clássica), ou na fase adolescência/adulta (atípica). Neste contexto, a hipótese deste estudo é que mutações patológicas no gene LYST levam às alterações proteicas em fibroblastos gengivais de pacientes com CHS. Com isso, o objetivo desse trabalho foi verificar o perfil proteomico de pacientes com CHS. No total, dez indivíduos tiveram fibroblastos gengivais coletados para análise proteômica, três pertencentes ao grupo controle, três com as formas de CHS clássica e quatro com CHS atípica. Para este estudo foram utilizadas populações de culturas primárias de fibroblastos gengivais humanos obtidos a partir de biópsias do tecido gengival, enzimaticamente digeridos de pacientes com e sem CHS. Foram obtidos extrato de proteínas de membrana, e estes utilizados para análise proteômica. Os resultados obtidos foram submetidos aos testes estatísticos, considerando nível de significância de 5%. Obteve-se 198 proteínas específicas do grupo controle, 448 proteínas dos dois tipos de CHS e 897 proteínas em comum nos grupos com e sem CHS. Na comparação entre CHS atípica e clássica observa-se um total de 256 proteínas exclusivas ao grupo CHS atípico, 299 proteínas exclusivas ao grupo CHS clássica e 790 proteínas expressas nos dois grupos. As proteínas que apresentaram diferença estatística entre os grupos CHS incluem proteínas relacionadas ao sistema imune, angiogênese e fenótipo neurológico. Essas proteínas foram: STIM1 (Stromal interaction molecule 1), TRPM4 (Transient receptor potential cation channel subfamily M member 4), MFGE8 (Milk fat globule-EGF factor 8 protein), HTRA1 (Serine protease), NRP1 (Neuropilin-1), EDIL3 (EGF like repeats and discoidin domains 3), PTK7 (Tyrosine-protein kinase-like 7), UQCRQ (Ubiquinol-cytochrome c reductase), SQSTM1 (Sequestosome-1), DYNC1H1 (Cytoplasmic dynein 1 heavy chain 1) e CLIC 4 (Chloride intracellular channel 4). Com isso, concluiu-se que diferenças proteicas das CHS clássicas e atípicas podem resultar em fenótipos distintos e que podem interferir funcionalmente em fibroblastos gengivaisAbstract: Chediak-Higashi syndrome (CHS) is a rare autosomal recessive condition that occurs as a result of mutations in the lysosomal transport regulatory gene (LYST). Its classification is based on the age at which the disease appears: during childhood (classic), or in the adolescent / adult phase (atypical). In this context, the hypothesis of this study is that pathological mutations in the LYST gene lead to protein changes in gingival fibroblasts in patients with CHS. Thus, the objective of this work was to verify the proteomic profile of patients with CHS. In total, ten individuals had gingival fibroblasts collected for proteomic analysis, three belonging to the control group, three with the classic CHS forms and four with atypical CHS. For this study, populations of primary cultures of human gingival fibroblasts obtained from biopsies of gingival tissue, enzymatically digested from patients with and without CHS, were used. Membrane protein extracts were obtained and used for proteomic analysis. The results obtained were submitted to statistical tests, considering a significance level of 5%. 198 specific proteins were obtained from the control group, 448 proteins from the two types of CHS and 897 proteins in common in the groups with and without CHS. In the comparison between atypical and classical CHS, a total of 256 proteins exclusive to the atypical CHS group, 299 proteins exclusive to the classical CHS group and 790 proteins expressed in the two groups are observed. The proteins that showed a statistical difference between the CHS groups include proteins related to the immune system, angiogenesis and neurological phenotype. These proteins were: STIM1 (Stromal interaction molecule 1), TRPM4 (Transient receptor potential cation channel subfamily M member 4), MFGE8 (Milk fat globule-EGF factor 8 protein), HTRA1 (Serine protease), NRP1 (Neuropilin-1), EDIL3 (EGF like repeats and discoidin domains 3), PTK7 (Tyrosine-protein kinase-like 7), UQCRQ (Ubiquinol-cytochrome c reductase), SQSTM1 (Sequestosome-1), DYNC1H1 (Cytoplasmic dynein 1 heavy chain 1) and CLIC 4 (Chloride intracellular channel 4). Thus, it was concluded that protein differences from classic and atypical CHS can result in distinct phenotypes and that they can functionally interfere in gingival fibroblastsDoutoradoPeriodontiaDoutora em Clínica OdontológicaCAPES88882.329936/2019-01[s.n.]Nociti Junior, Francisco Humberto, 1967-Casarin, Renato Corrêa VianaMontalli, Victor Angelo MartinsAlmeida, Fausto Bruno dos ReisDuarte, Poliana MendesUniversidade Estadual de Campinas (UNICAMP). Faculdade de Odontologia de Piracicaba (FOP)Programa de Pós-Graduação em Clínica OdontológicaUNIVERSIDADE ESTADUAL DE CAMPINASAlmeida, Amanda Bandeira de, 1991-20212021-01-27T00:00:00Zinfo:eu-repo/semantics/publishedVersioninfo:eu-repo/semantics/doctoralThesisapplication/pdf1 recurso online (91 p.) : il., digital, arquivo PDF.https://hdl.handle.net/20.500.12733/1640933ALMEIDA, Amanda Bandeira de. Caracterização do perfil proteômico de fibroblastos gengivais a partir de pacientes com Síndrome de Chediak-Higashi clássica e atípica. 2021. 1 recurso online (91 p.) Tese (doutorado) - Universidade Estadual de Campinas, Faculdade de Odontologia de Piracicaba, Piracicaba, SP. Disponível em: https://hdl.handle.net/20.500.12733/1640933. 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