Estudo da autofagia em mucosa de reservatório ileal de pacientes com retocolite ulcerativa e polipose adenomatosa familiar : Autophagy evaluation in the ileal pouch of ulcerative colitis and familial adenomatous polyposis patients

Detalhes bibliográficos
Autor(a) principal: Paiva, Nielce Maria de, 1962-
Data de Publicação: 2018
Tipo de documento: Tese
Idioma: por
Título da fonte: Biblioteca Digital de Teses e Dissertações da Universidade Estadual de Campinas (UNICAMP)
Texto Completo: https://hdl.handle.net/20.500.12733/1635551
Resumo: Orientadores: Raquel Franco Leal, Marciani Milanski Rodrigues
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Bolsite é uma das complicações mais comuns após este procedimento nos pacientes com RCU. Defeitos na autofagia têm sido relatados em doenças inflamatórias intestinais. No entanto, não há estudos na mucosa do RI. Objetivo: Avaliar marcadores moleculares de autofagia na mucosa do RI de pacientes com RCU ou com PAF comparando-os com controle de íleo distal normal. Casuística e Método: Dezesseis pacientes submetidos à retocolectomia total e confecção do RI em "J", assintomáticos e com RI endoscopicamente normal foram avaliados. O grupo controle foi constituído por 8 pacientes com colonoscopia normal. As biópsias foram congeladas em nitrogênio líquido e os níveis proteicos e transcricionais dos marcadores de autofagia foram avaliados por meio de imunoblot de extrato proteico total e por PCR em Tempo Real (qPCR), respectivamente. A ausência de ileíte do RI foi determinada por parâmetros clínicos, histológicos e endoscópicos, de acordo com o Índice de Atividade da Ileíte do RI. O presente estudo foi aprovado pelo Comitê de Ética em Pesquisa da Unicamp e os participantes assinaram o termo de consentimento livre e esclarecido (TCLE). Utilizaram-se testes não paramétricos para a análise estatística. Nível de significância adotado foi p<0,05. Resultados: Houve uma diminuição significativa nos níveis transcricionais de ATG5, MAP1LC3A e BAX no grupo PAF (p<0,05). Encontrou-se também uma diminuição dos níveis proteicos de Beclin-1 nos pacientes com RCU ou PAF em comparação ao grupo controle (p<0,05). Embora os níveis de LC3-II por imunoblot estivessem maiores no grupo RCU, a colocalização LC3/p62 foi menor na análise quantitativa da imunofluorescência dos grupos RCU e PAF em comparação ao grupo controle (p<0,05). Corroborando com esses resultados, houve aumento dos níveis de p62 por imunoblot no grupo RCU. Conclusão: Esses achados indicam a modulação de marcadores da macroautofagia no RI, tanto de RCU quanto de PAF, o que pode contribuir com o processo inflamatório da mucosa nesses reservatóriosAbstract: Introduction: Total retocolectomy with ileal pouch-anal anastomosis (IPAA) is the surgery of choice for patients with ulcerative colitis (UC) that are refractory to clinical treatment and with familial adenomatous polyposis (FAP) with many rectal polyps. Pouchitis is one of the most common complications after this procedure in UC patients. Defects in autophagy have been reported in inflammatory bowel diseases. However, there are no studies on the ileal pouch (IP). Aim: To evaluate markers for autophagy in the IP mucosa of UC or FAP patients comparing them to controls with a normal distal ileum. Patients and Method: Sixteen patients with IP in "J" shape, asymptomatic and with endoscopically normal IP were evaluated. The control group consisted of eight patients with normal colonoscopy. The specimens were snap-frozen and the protein and transcriptional levels of autophagy markers were determined by immunoblot of total protein extract and by Real-Time PCR, respectively. The absence of pouchitis was assessed by clinical, histological and endoscopic parameters, according to the Pouchitis Disease Activity Index (PDAI). The Unicamp ethical committee approved the study and informed consent was signed by all participants. Non-parametric tests were applied for statistical analysis. The level of significance was p<0.05. Results: There was a significant decrease in the transcriptional levels of ATG5, MAP1LC3A and BAX in the FAP group. There was also a decrease in the protein level of Beclin-1 in the UC and FAP patients compared to the control group. Although the LC3-II levels by immunoblot were higher in the UC group, LC3/p62 co-localization were lower in the immunofluorescence analysis in the UC and FAP compared to the control group. Corroborating these results, there was an increase of p62 by immunoblot in the UC group. Conclusion: These findings indicated a modulation of macroautophagy markers in the IP, from both UC and FAP, which may contribute to the inflammatory process of the mucosa in the pouchDoutoradoCirurgia TranslacionalDoutora em Ciências[s.n.]Leal, Raquel Franco, 1977-Milanski, Marciane, 1972-Fagundes, João JoseRogério, FábioSobrado, Carlos WalterDegasperi, Giovanna RosaUniversidade Estadual de Campinas (UNICAMP). Faculdade de Ciências MédicasPrograma de Pós-Graduação em Ciências da CirurgiaUNIVERSIDADE ESTADUAL DE CAMPINASPaiva, Nielce Maria de, 1962-20182018-12-11T00:00:00Zinfo:eu-repo/semantics/publishedVersioninfo:eu-repo/semantics/doctoralThesisapplication/pdf1 recurso online (69 p.) : il., digital, arquivo PDF.https://hdl.handle.net/20.500.12733/1635551PAIVA, Nielce Maria de. Estudo da autofagia em mucosa de reservatório ileal de pacientes com retocolite ulcerativa e polipose adenomatosa familiar: Autophagy evaluation in the ileal pouch of ulcerative colitis and familial adenomatous polyposis patients. 2018. 1 recurso online (69 p.) Tese (doutorado) - Universidade Estadual de Campinas, Faculdade de Ciências Médicas, Campinas, SP. Disponível em: https://hdl.handle.net/20.500.12733/1635551. 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