Dano ao sistema anti-inflamatório colinérgico pelo consumo de dieta hiperlipídica em modelo de colite experimental induzida por "dextran sulfate sodium" (DSS)

Detalhes bibliográficos
Autor(a) principal: Costa, Caroline Lobo, 1992-
Data de Publicação: 2023
Tipo de documento: Dissertação
Idioma: por
Título da fonte: Biblioteca Digital de Teses e Dissertações da Universidade Estadual de Campinas (UNICAMP)
Texto Completo: https://hdl.handle.net/20.500.12733/18135
Resumo: Orientadores: Marcio Alberto Torsoni, Adriana Souza Torsoni
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spelling Dano ao sistema anti-inflamatório colinérgico pelo consumo de dieta hiperlipídica em modelo de colite experimental induzida por "dextran sulfate sodium" (DSS)Damage to the cholinergic anti-inflammatory system by the consumption of a hight-fat diet in an experimental colitis model induced by dextran sulfate sodium (DSS)Receptor nicotínico de acetilcolina alfa7InflamaçãoDieta hiperlipídicaColitePermeabilidade intestinalAlpha7 nicotinic acetylcholine receptorInflammationDiet, high-fatColitisIntestinal permeabilityOrientadores: Marcio Alberto Torsoni, Adriana Souza TorsoniDissertação (mestrado) - Universidade Estadual de Campinas, Faculdade de Ciências AplicadasResumo: As doenças inflamatórias intestinais são de etiologia multifatorial. Os aspectos emocionais e nutricionais estão diretamente relacionados a evolução da doença. A presença de marcadores inflamatórios, como citocinas e infiltrados celulares, e alteração na permeabilidade intestinal são aspectos comuns de ambas as patologias. Estudos recentes têm empregado métodos de estímulo do nervo vago e ativação do receptor colinérgico nicotínico de acetilcolina do tipo 'alfa'7 (?7nAChR). O 'alfa'7nAChR, através da via JAK2-STAT3, é capaz de reduzir a expressão de citocinas inflamatórias em vários tipos celulares. Em estudos anteriores demonstramos que uma dieta rica em gordura saturada (HFD) e processos inflamatórios reduzem a expressão do receptor 'alfa'7nAChR, potencializando a resposta inflamatória. OBJETIVO: utilizando modelo animal C57BL/6J e com deleção do gene Chrna7 ('alfa'7nAChR) (camundongos 'alfa'7-/-), investigamos como o consumo de dieta hiperlipídica e o processo inflamatório da colite ulcerativa, participam da modulação da expressão do receptor 'alfa'7nAChR no intestino e o papel deste receptor na evolução da colite experimental em camundongos. MÉTODOS: Camundongos C57BL/6J (n=15/grupo) foram alocados em grupo controle (CT) ou HFD (45%) na 6ª semana de vida. As dietas foram oferecidas por 4 semanas. Em seguida, parte desses camundongos foi exposta ao Dextran Sulfate Sodium (DSS 2,5%) adicionado à água potável por 7 dias para induzir a colite. Assim, surgiram os grupos: CT, CT+DSS, HFD e HFD+DSS. Além disso, camundongos 'alfa'7-/- (n=5/grupo) foram divididos em grupo CT ou HFD (45%) na 6ª à 10a semana de vida. Células epiteliais do cólon e isoladas do cólon (IEC) foram coletadas para análise de Western Blotting e RT-qPCR. RESULTADOS: CT+DSS apresentou maior escore DAI no 4º e 7º dia e perda de peso corporal em comparação ao grupo HFD. O comprimento do cólon, houve redução no grupo HFD e CT+DSS, em relação ao grupo CT, bem como no grupo HFD+DSS em relação ao grupo HFD. As células epiteliais do cólon da HFD mostraram uma redução na expressão dos genes Tjp1, Occludin, TNF-a e Chrna7 em comparação com CT. Além disso, o consumo de HFD reduziu o conteúdo proteico de 'alfa'7nAChR, Claudin1, Claudin2 e Ocludina em comparação com CT. A permeabilidade intestinal no grupo HFD+DSS foi maior do que nos grupos CT+DSS e HFD. Camundongos KO'alfa'7 alimentados com HFD mostraram cólon curto, conteúdo reduzido de proteína Claudin2, bem como expressão dos genes Claudin4 e Tjp1 em comparação com CT. CONCLUSÃO: Assim, HFD encurta o cólon independente da colite, mas exacerba a permeabilidade intestinal em animais com colite. A redução do receptor 'alfa'7nAChR em células epiteliais pode estar potencializando uma resposta inflamatória em camundongos C57BL/6J expostos à HFD. Em camundongos KO'alfa'7 com HFD mostraram encurtamento do cólon, conteúdo proteico de Claudin2 reduzido, bem como expressão gênica de Claudin4 e Tjp1Abstract: Inflammatory bowel diseases have a multifactorial etiology. Emotional and nutritional aspects are directly related to the evolution of the disease. The presence of inflammatory markers, such as cytokines and cellular infiltrates, and changes in intestinal permeability are common aspects of both pathologies. Recent studies have employed methods of vagus nerve stimulation and activation of the 'alfa'7-type nicotinic acetylcholine receptor ('alfa'7nAChR) to reduce inflammatory process. The receptor 'alfa'7nAChR can reduce the expression of inflammatory cytokines through the JAK2-STAT3 pathway in several cell types. In previous studies we demonstrated that a diet rich in saturated fat (HFD) and inflammatory processes reduce the expression of the 'alfa'7nAChR, potentiating the inflammatory response. OBJECTIVE: using an animal model with deletion of Chrna7 gene ('alfa'7nAChR) ('alfa'7-/- mice), we investigated how the consumption of a high-fat diet and the inflammatory process of ulcerative colitis participate in the modulation of the expression of the 'alfa'7nAChR receptor in the intestine and the role of this receptor in the evolution of experimental colitis in mice. METHODS: C57BL/6J mice (n=15/group) were assigned to a control (CT) or HFD (45%) group at the 6th week of life. Diets were offered for 4 weeks. Then part of these mice was exposed to Dextran Sulfate Sodium (DSS 2.5%) added to drinking water for 7 days to induce colitis. Thus, the groups emerged: CT, CT+DSS, HFD and HFD+DSS. Furthermore, 'alfa'7-/- mice (n=5/group) were divided into CT or HFD (45%) group from the 6th to the 10th week of life. Colonic and isolated colonic epithelial cells (IEC) were collected for Western Blotting and RT-qPCR analysis. RESULTS: CT+DSS showed higher DAI score on the 4th and 7th day and body weight loss compared to the HFD group. Regarding the length of the colon, there was a reduction in the HFD and CT+DSS group, in relation to the CT group, as well as in the HFD+DSS group in relation to the HFD group. Colonic epithelial cells from HFD showed a reduction in the expression of Tjp1, Occludin, TNF-a and Chrna7 genes compared to CT. Furthermore, HFD consumption reduced the protein content of 'alfa'7nAChR, Claudin1, Claudin2 and Occludin compared to CT. Intestinal permeability in the HFD+DSS group was higher than in the CT+DSS and HFD groups. HFD-fed KO'alfa'7 mice showed a short colon, reduced Claudin2 protein content, as well as Claudin4 and Tjp1 gene expression compared to CT. CONCLUSION: HFD shortens the colon independent of colitis but exacerbates intestinal permeability in animals with colitis. The reduction of the 'alfa'7nAChR receptor in epithelial cells may be potentiating an inflammatory response in C57BL/6J mice exposed to HFD. In KO'alfa'7 mice with HFD presented colon shortening, reduced Claudin2 protein content, as well as Claudin4 and Tjp1 gene expressionAbertoMestradoCiências Nutricionais e MetabolismoMestra em Ciências da Nutrição e do Esporte e MetabolismoCAPES001[s.n.]Torsoni, Marcio Alberto, 1967-Torsoni, Adriana Souza, 1973-Simabuco, Fernando MoreiraBiazzo, Livia Aparecida D'Avila Bitencourt PascoalUniversidade Estadual de Campinas (UNICAMP). Faculdade de Ciências AplicadasPrograma de Pós-Graduação em Ciências da Nutrição e do Esporte e MetabolismoUNIVERSIDADE ESTADUAL DE CAMPINASCosta, Caroline Lobo, 1992-20232023-08-15T00:00:00Zinfo:eu-repo/semantics/publishedVersioninfo:eu-repo/semantics/masterThesisapplication/pdf1 recurso online (49 p.) : il., digital, arquivo PDF.https://hdl.handle.net/20.500.12733/18135COSTA, Caroline Lobo. Dano ao sistema anti-inflamatório colinérgico pelo consumo de dieta hiperlipídica em modelo de colite experimental induzida por "dextran sulfate sodium" (DSS). 2023. 1 recurso online (49 p.) Dissertação (mestrado) - Universidade Estadual de Campinas, Faculdade de Ciências Aplicadas, Limeira, SP. Disponível em: https://hdl.handle.net/20.500.12733/18135. Acesso em: 3 set. 2024.https://repositorio.unicamp.br/acervo/detalhe/1390008Cover: https://repositorio.unicamp.br/capa/capa?codigo=1390008Requisitos do sistema: Software para leitura de arquivo em PDFporreponame:Biblioteca Digital de Teses e Dissertações da Universidade Estadual de Campinas (UNICAMP)instname:Universidade Estadual de Campinas (UNICAMP)instacron:UNICAMPinfo:eu-repo/semantics/openAccess2024-06-12T17:05:58Zoai::1390008Biblioteca Digital de Teses e DissertaçõesPUBhttp://repositorio.unicamp.br/oai/tese/oai.aspsbubd@unicamp.bropendoar:2024-06-12T17:05:58Biblioteca Digital de Teses e Dissertações da Universidade Estadual de Campinas (UNICAMP) - Universidade Estadual de Campinas (UNICAMP)false
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