Estudo dos mecanismos de resistência de "Xanthomonas citri subsp. citri" durante interação com amebas ambientais

Detalhes bibliográficos
Autor(a) principal: Moreira, Aline Francisca, 1993-
Data de Publicação: 2023
Tipo de documento: Dissertação
Idioma: por
Título da fonte: Biblioteca Digital de Teses e Dissertações da Universidade Estadual de Campinas (UNICAMP)
Texto Completo: https://hdl.handle.net/20.500.12733/17197
Resumo: Orientador: Cristina Elisa Alvarez Martinez
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spelling Estudo dos mecanismos de resistência de "Xanthomonas citri subsp. citri" durante interação com amebas ambientaisStudy of resistance mechanisms of "Xanthomonas citri subsp. citri" during interaction with environmetal amoebasSistemas de secreção tipo VIDictyostelium discoideumAcanthamoeba castellaniiType VI secretion systemsOrientador: Cristina Elisa Alvarez MartinezDissertação (mestrado) - Universidade Estadual de Campinas, Instituto de BiologiaResumo: Bactérias gram-negativas dotadas de mecanismos de resistência são capazes de superar pressões seletivas e assim habitar e colonizar diversos ambientes. Dentre esses mecanismos, os sistemas de secreção do tipo VI (SS6) exercem papel importante na virulência e na competição contra outros microrganismos no ambiente. O SS6 consiste em uma maquinaria multiproteica que atravessa o envelope bacteriano e secreta toxinas antibacterianas e proteínas efetoras antieucarióticas em células-alvo, podendo causar a lise de bactérias competidoras ou a colonização de hospedeiros. A bactéria "Xanthomonas citri" subsp. citri é um fitopatógeno gram-negativo que coloniza folhas e frutos de citros, causando uma doença denominada cancro cítrico. O SS6 de X. citri possui um papel fundamental no processo de escape da predação pela ameba social do solo "Dictyostelium discoideum", que se alimenta de bactérias através de um mecanismo de fagocitose. Desta forma, o SS6 permite o escape de predadores e, consequentemente, a sobrevivência e colonização em variados ambientes, como plantas e o solo. Além do SS6, outro componente que pode estar relacionado a resistência a predação é a goma xantana, um polissacarídeo extracelular envolvido na colonização de plantas hospedeiras e na formação de biofilme. O projeto teve como objetivo a compreensão dos mecanismos utilizados por X. citri durante a interação com as amebas ambientais "Dictyostelium discoideum" e "Acanthamoeba castellani", que possuem ciclos de vida bastante distintos. Para isso, foram realizados diferentes ensaios de co-cultivo bactéria-ameba, a fim de determinar a viabilidade das amebas na interação com a bactéria, assim como a internalização de X. citri. Os resultados obtidos demonstraram que o SS6 promove a inibição do desenvolvimento de D. discoideum, que é exacerbado pela presença da goma xantana. Além disto, foi possível avaliar a eficácia de diversos ensaios de co-incubação com a ameba A. castellanii. Os resultados obtidos indicaram que o ensaio de placa de fagocitose usado para avaliar a resistência a predação por D. discoideum não é informativo para A. castellanii. Além disto, ensaios de microscopia de fluorescência e coloração com azul de tripan indicaram que o SS6 promove morte de A. castellanii. Estudos futuros permitirão avaliar o efeito da morte promovida pelo SS6 na resistência das populações de X. citri frente a predação por esta ameba amplamente disseminada no ambienteAbstract: Gram-negative bacteria endowed with resistance mechanisms are able to overcome selective pressures and thus inhabit and colonize diverse environments. Among these mechanisms, the type VI secretion system (SS6) plays an important role in virulence and competition against other microorganisms in the environment. SS6 consists of a multiprotein machinery that crosses the bacterial envelope and secretes antibacterial toxins or anti-eukaryotic effectors, promoting lysis of competing bacteria or host colonization. The bacterium "Xanthomonas citri" subsp. citri is a gram-negative phytopathogen that colonizes citrus leaves and fruits, causing a disease called citrus canker. The SS6 of X. citri has a key role in the resistance to predation by the social soil amoeba "Dictyostelium discoideum", which feeds on bacteria by phagocytosis mechanism. Thus, the SS6 allows escape from predators and, consequently, survival and colonization in various environments, such as plants and soil. An additional component that may be involved in resistance to predation is the xanthan gum, an extracellular polysaccharide involved in host colonization and biofilm formation. The project aims to understand the mechanisms used by X. citri to resist predation during interaction with the environmental amoebae "Dictyostelium discoideum" and "Acanthamoeba castellani", which have very distinct life cycles. To this end, co-cultivation assays were performed to evaluate amoeba viability during interaction with the bacteria, as well as X. citri internalization and survival. Results showed that the SS6 inhibits D. discoideum development and this effect is exacerbated by the presence of xanthan gum. In addition, different assays were tested for their efficacy in determining the resistance of X. citri to predation by A. castellanii and the role of the SS6 and xanthan gum. Results indicated that the phagocytic plaque assays used to test resistance to D. discoideum predation is not suitable for A. castallanii. Moreover, fluorescence microscopy and trypan blue staining experiments suggested that the SS6 promotes killing of A. castellanii cells. Future studies will address the impact of this SS6-mediated killing activity on the resistance of X. citri populations to predation by A. castellanii cellsAbertoMestradoMicrobiologiaMestra em Genética e Biologia MolecularCAPES88887.514053/2020-00 ; 2018/01852-4; 22/06555-3FAPESP2019/17185-0[s.n.]Alvarez-Martinez, Cristina Elisa, 1976-Gadelha, Fernanda RamosFogaça, Andréa CristinaUniversidade Estadual de Campinas (UNICAMP). Instituto de BiologiaPrograma de Pós-Graduação em Genética e Biologia MolecularUNIVERSIDADE ESTADUAL DE CAMPINASMoreira, Aline Francisca, 1993-20232023-08-04T00:00:00Zinfo:eu-repo/semantics/publishedVersioninfo:eu-repo/semantics/masterThesisapplication/pdf1 recurso online (74 p.) : il., digital, arquivo PDF.https://hdl.handle.net/20.500.12733/17197MOREIRA, Aline Francisca. Estudo dos mecanismos de resistência de "Xanthomonas citri subsp. citri" durante interação com amebas ambientais. 2023. 1 recurso online (74 p.) Dissertação (mestrado) - Universidade Estadual de Campinas, Instituto de Biologia, Campinas, SP. Disponível em: https://hdl.handle.net/20.500.12733/17197. Acesso em: 3 set. 2024.https://repositorio.unicamp.br/acervo/detalhe/1380769Cover: https://repositorio.unicamp.br/capa/capa?codigo=1380769Requisitos do sistema: Software para leitura de arquivo em PDFporreponame:Biblioteca Digital de Teses e Dissertações da Universidade Estadual de Campinas (UNICAMP)instname:Universidade Estadual de Campinas (UNICAMP)instacron:UNICAMPinfo:eu-repo/semantics/openAccess2024-05-07T18:19:12Zoai::1380769Biblioteca Digital de Teses e DissertaçõesPUBhttp://repositorio.unicamp.br/oai/tese/oai.aspsbubd@unicamp.bropendoar:2024-05-07T18:19:12Biblioteca Digital de Teses e Dissertações da Universidade Estadual de Campinas (UNICAMP) - Universidade Estadual de Campinas (UNICAMP)false
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