Caracterização e purificação de enzima amilolitica de Candida sp e sua aplicação

Detalhes bibliográficos
Autor(a) principal: Silva, Edilsa Rosa da
Data de Publicação: 1994
Tipo de documento: Dissertação
Idioma: por
Título da fonte: Biblioteca Digital de Teses e Dissertações da Universidade Estadual de Campinas (UNICAMP)
Texto Completo: https://hdl.handle.net/20.500.12733/1581784
Resumo: Orientador: Yong Kung Park
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spelling Caracterização e purificação de enzima amilolitica de Candida sp e sua aplicaçãoEnzimas amiloliticas - PurificaçãoOrientador: Yong Kung ParkDissertação (mestrado) - Universidade Estadual de Campinas, Faculdade de Engenharia de AlimentosResumo: A enzima amilolítica produzida por uma nova linhagem de levedura, classificada como Candida sp ATCC 90238, foi purificada e caracterizada. Este trabalho visou o aproveitamento de amido de milho para a produção de xarope de glicose e maltose. Estudou-se a sacarificação de amido, com a preparação bruta da enzima amilolítica de Candida sp, onde foi verificado a produção principalmente de glicose e maltose a temperaturas mais elevadas. A enzima foi purificada por fracionamento com sulfato de amônio, cromatografia em coluna de DEAE-Sephadex e CM-Celulose. A eletroforese da enzima purificada em gel de SDS-PAGE revelou uma única banda de proteína. O peso molecular foi estimado como 120.000 daltons. A enzima purificada foi caracterizada. Verificou-se que a enzima hidrolisa as ligações glicosídicas ?-1,4 e ?-1,6 de amido, o que tomou possível concluir que esta enzima é uma amiloglicosidase (E.C. 3.2.1.3., ?-1,4 glucano glucanahidrolase), que entretanto, apresenta características diferentes da amiloglucosidase de Aspergillus niger e Rhizopus sp quanto à hidrólise da ligação glicosídica ?-1,4 da maltose. A amiloglicosidase de Candida sp hidrolisa com menor eficiência a maltose e pode ser utilizada na produção de mistura de glicose e maltose. A enzima apresentou pH ótimo e temperatura ótima de 5,6 e 55° 60°C respectivamente. A combinação da amiloglicosidase de Candida sp com a pululanase de Klebsiella sp, resultou no aumento significativo da eficiência da hidrólise de amido de milho, para a produção de glicose e maltose.Abstract: Amylolitic enzyme was produced by a new strain of yeast which was identified as Candida sp ATCC 90238 was purified and investigated to its enzymatic characteristics. The enzyme was purified by ammonium sulfate fractionation, DEAE-Sephadex A-50 and CM-Cellulose column chromatography. The molecular weight of the purified enzyme was determined by sodium dodecyl sulfate polyacrylamide gel electrophoresis (SDS-PAGE) which showed a single protein band. The molecular weight of the enzyme was calculated as 120.000. The purified enzyme hydrolyzed starch to only glucose. This is apparent that the enzyme cleaved ?-1,4 and ?-1,6 glicosidic linkages in the starch. This result indicated that the enzyme is an extracellular amyloglucosidase (?-1,4-g1ucan glucanohydrolase, E.C.3.2.1.3.). When substrate is liquefied starch which was hydrolyzed by bacterial ?-amylase, the enzyme hydrolyzed the liquefied starch to glucose and maltose. The property of the enzyme was different as compared with amyloglucosidases from Aspergillus niger and Rhizopus sp. Further investigation demonstrated that the purified enzyme was not able to hydrolyze maltose efficiently. The optimum pH and the optimum temperature of the purified enzyme were 5,6 e 55° - 60°C. Combination of the Candida sp amyloglucosidase and Klebsiella sp pullulanase efficiently hidrolyzed the liquefied com starch, producing glucose and maltose as compared to Candida amyloglucosidase onlyMestradoMestre em Ciência de Alimentos[s.n.]Park, Yong Kun, 1930-2018Sato, Helia HarumiPereira, Jose LuizPastore, Glaucia MariaUniversidade Estadual de Campinas (UNICAMP). Faculdade de Engenharia de AlimentosPrograma de Pós-Graduação em Ciência de AlimentosUNIVERSIDADE ESTADUAL DE CAMPINASSilva, Edilsa Rosa da19941994-11-30T00:00:00Zinfo:eu-repo/semantics/publishedVersioninfo:eu-repo/semantics/masterThesisapplication/pdf[97]f. : il.https://hdl.handle.net/20.500.12733/1581784SILVA, Edilsa Rosa da. Caracterização e purificação de enzima amilolitica de Candida sp e sua aplicação. 1994. [97]f. Dissertação (mestrado) - Universidade Estadual de Campinas, Faculdade de Engenharia de Alimentos, Campinas, SP. Disponível em: https://hdl.handle.net/20.500.12733/1581784. Acesso em: 2 set. 2024.https://repositorio.unicamp.br/acervo/detalhe/80960porreponame:Biblioteca Digital de Teses e Dissertações da Universidade Estadual de Campinas (UNICAMP)instname:Universidade Estadual de Campinas (UNICAMP)instacron:UNICAMPinfo:eu-repo/semantics/openAccess2017-02-18T02:16:29Zoai::80960Biblioteca Digital de Teses e DissertaçõesPUBhttp://repositorio.unicamp.br/oai/tese/oai.aspsbubd@unicamp.bropendoar:2017-02-18T02:16:29Biblioteca Digital de Teses e Dissertações da Universidade Estadual de Campinas (UNICAMP) - Universidade Estadual de Campinas (UNICAMP)false
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