Estudo clínico do perfil microbiológico, de LPS e de LTA em dentes com vitalidade pulpar associados à doença periodontal

Detalhes bibliográficos
Autor(a) principal: Louzada, Lidiane Mendes, 1993-
Data de Publicação: 2019
Tipo de documento: Dissertação
Idioma: por
Título da fonte: Biblioteca Digital de Teses e Dissertações da Universidade Estadual de Campinas (UNICAMP)
Texto Completo: https://hdl.handle.net/20.500.12733/1638974
Resumo: Orientador: Brenda Paula Figueiredo de Almeida Gomes
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spelling Estudo clínico do perfil microbiológico, de LPS e de LTA em dentes com vitalidade pulpar associados à doença periodontalClinical study of the microbial profile, LPS and LTA in teeth with pulp vitality associated with periodontal diseaseBactériasDoenças periodontaisEndodontiaLipopolissacarídeosÁcido lipoteicóicoBacteriaPeriodontal diseasesEndodonticsLipopolysaccharidesLipoteichoic acidOrientador: Brenda Paula Figueiredo de Almeida GomesDissertação (mestrado) - Universidade Estadual de Campinas, Faculdade de Odontologia de PiracicabaResumo: A doença periodontal de longa duração pode provocar alterações pulpares. O objetivo deste presente estudo clínico foi investigar a microbiota e quantificar os níveis de endotoxinas (LPS) e ácido lipoteicóico (LTA) antes (C1) e após (C2) o preparo químico-mecânico (PQM) e após o uso de uma medicação intracanal (MIC) à base de hidróxido de cálcio por 30 dias (C3) nas bolsas periodontais (BP) e canais radiculares (CR) de dentes com polpa vital associados a doença periodontal, que não responderam à terapia periodontal. Dez dentes com doença periodontal e resposta positiva ao teste de sensibilidade pulpar que estavam sob tratamento periodontal por no mínimo 6 meses foram selecionados. Amostras das BP e CR foram coletadas com cones de papel estéreis/apirogênicos. A microbiota das BP e dos CR foi caracterizada através das técnicas moleculares ¿ Nested PCR (17 primers) e Checkerboard DNA-DNA hybridization (CB) (40 sondas bacterianas). A quantificação de LPS e de LTA em ambos os sítios foram realizadas através do método de LAL pyrogent 5000 e ELISA, respectivamente. Foi detectado DNA bacteriano em todas as amostras das BP e CR (10/10). Pelo Nested PCR, das 17 bactérias investigadas, todas estavam presentes nas BP e 11 nos CR. Foi observada alta prevalência de E. faecalis e F. nucleatum nas BP e CR em todas as etapas do tratamento endodôntico. Pelo CB, 39 espécies foram detectadas em algum momento do tratamento endodôntico nas BP e 25 espécies nos CR. Nas BP, 12 bactérias apresentaram carga entre 105 e 106 células e F. nucleatum apresentou carga de aproximadamente 106 células. Nos CR, apenas 2 espécies apresentaram carga microbiana entre 105 e 106. Das 14 bactérias comuns a ambos os métodos de identificação microbiana, O Nested PCR apresentou maior sensibilidade que o CB (p<0,05). Níveis de LPS foram detectados nas BP e CR. Após o PQM houve redução de 31,59% nos níveis de LPS nas BP (p<0,05) e após a MIC de 73,38% (p<0,05). Nos CR, após o PQM, foi observada redução 80% (p<0,05) e após a MIC de 90% (p<0,05). Foi detectado LTA nas BP e CR. Após o PQM, houve redução de 34,49% (p<0,05) e de 28,45% após a MIC (p>0,05) nas BP. Nos CR, após o PQM houve redução de 11,55% (p<0,05) e após a MIC de 47,93% (p<0,05). Conclui-se que a microbiota das BP e CR de dentes com vitalidade pulpar e doença periodontal associada é polimicrobiana, com presença de bactérias Gram-positivas, Gram-negativas, anaeróbias facultativas e anaeróbias estritas. O PQM e a MIC promoveram redução do conteúdo infeccioso das BP e CR. Os métodos utilizados foram eficazes para a caracterização da microbiota das BP e CR. O PQM e a MIC foram efetivos na redução dos níveis de LPS nas BP e CR. A MIC foi eficaz na redução significativa dos níveis de LTA nas BP e CRAbstract: Long-term periodontal disease can cause pulpal changes. The aim of this clinical study is to investigate the microbiota and to quantify the levels of endotoxins (LPS) and lipoteichoic acid (LTA) in root canals (RC) and periodontal pockets (PP) of teeth submitted to endodontic therapy with chronic periodontal disease with secondary endodontic involvement that did not respond to the periodontal therapy, before and after the chemo-mechanical preparation (CMP) and after the use of an intracanal medication (ICM) for 30 days. Ten teeth with periodontal disease and positive response to the pulp sensitivity test that were under periodontal treatment for at least 6 months were selected. Samples from PP and RC were collected by using sterile/apirogenic paper points. The microbiota of PP and RC was characterized using molecular methods ¿ Nested PCR and Checkerboard DNA-DNA hybridization. Quantification of LPS and LTA in both sites were performed using LAL Pyrogent 500 and ELISA, respectively. Bacterial DNA was detected in all PP and RC samples (10/10). By Nested PCR, of the 17 bacteria investigated, all were present in the PP and 11 in the RC. A high prevalence of E. faecalis and F. nucleatum was observed in PP and RC at all stages of endodontic treatment. By CB, 39 species were detected at some time of the endodontic treatment in the PP and 25 species in the RC. In PP, 12 bacteria had a load between 105 and 106 cells and F. nucleatum had a load of approximately 106 cells. In the RC, only 2 species showed microbial load between 105 and 106. Of the 14 bacteria common to both microbial identification methods. Nested PCR presented higher sensitivity than CB (p <0.05). Levels of LPS were detected in PP and RC. After CMP, there was a reduction of 31.59% in LPS levels in PP (p <0.05) and after ICM in 73.38% (p <0.05). In the RC, after CMP, a bacterial reduction of 80% (p <0.05) and after ICM of 90% was observed (p <0.05). LTA was detected in PP and RC. After CMP, there was a reduction of 34.49% (p <0.05) and after ICM of 28.45% ICM (p> 0.05) in PP. In RC, after CMP, there was a reduction of 11.55% (p <0.05) and after MIC of 47.93% (p <0.05). It was concluded that the microbiota of PP and RC of teeth with vital pulp associated with periodontal disease is polymicrobial, with presence of Gram-negatives, Gram-positives, facultative and strict anaerobic bacteria. CMP and ICM promoted reduction of the infectious content of PP and RC. The methods used were effective for characterizing the microbiota of PP and RC. CMP and ICM were effective in reducing LPS levels in PP and RC. ICM was effective in significantly reducing LTA levels in PP and RCMestradoEndodontiaMestra em Clínica OdontológicaFAPESP2017/18838-1CAPES1698562[s.n.]Gomes, Brenda Paula Figueiredo de Almeida, 1961-Cintra, Luciano Tavares AngeloFerraz, Caio Cezar RandiUniversidade Estadual de Campinas (UNICAMP). Faculdade de Odontologia de Piracicaba (FOP)Programa de Pós-Graduação em Clínica OdontológicaUNIVERSIDADE ESTADUAL DE CAMPINASLouzada, Lidiane Mendes, 1993-20192019-02-21T00:00:00Zinfo:eu-repo/semantics/publishedVersioninfo:eu-repo/semantics/masterThesisapplication/pdf1 recurso online (207 p.) : il., digital, arquivo PDF.https://hdl.handle.net/20.500.12733/1638974LOUZADA, Lidiane Mendes. Estudo clínico do perfil microbiológico, de LPS e de LTA em dentes com vitalidade pulpar associados à doença periodontal. 2019. 1 recurso online (207 p.) Dissertação (mestrado) - Universidade Estadual de Campinas, Faculdade de Odontologia de Piracicaba, Piracicaba, SP. Disponível em: https://hdl.handle.net/20.500.12733/1638974. 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