Co-cultivo celular de fibroblastos e queratinócitos em matriz extracelular composta por biomateriais micro moldados por dispositivo 3D
Autor(a) principal: | |
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Data de Publicação: | 2021 |
Tipo de documento: | Dissertação |
Idioma: | por |
Título da fonte: | Biblioteca Digital de Teses e Dissertações da Universidade Estadual de Campinas (UNICAMP) |
Texto Completo: | https://hdl.handle.net/20.500.12733/8885 |
Resumo: | Orientadores: Lucimara Gaziola de La Torre, Hernandes Faustino de Carvalho |
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Co-cultivo celular de fibroblastos e queratinócitos em matriz extracelular composta por biomateriais micro moldados por dispositivo 3DCell co-culture of fibroblasts and keratinocytes in an extracellular matrix composed of microbiomaterials molded by a 3D deviceMimetismo (Biologia)In VitroImpressão tridimensionalColágenoBiomateriaisFibroblastosQueratinócitosMimicryIn vitroThree-dimensional printingCollagenBiomaterialsFibroblastsKeratinocytesOrientadores: Lucimara Gaziola de La Torre, Hernandes Faustino de CarvalhoDissertação (mestrado) - Universidade Estadual de Campinas, Faculdade de Engenharia QuímicaResumo: A busca por novos fármacos e cosméticos e métodos que acelerem sua avaliação biológica são requisitos importantes para o avanço da medicina. Assim, modelos in vitro de pele têm sido pesquisados visando à obtenção de dados fidedignos do comportamento celular humano e diminuição significativa do uso de animais para fins de pesquisa em análises cosméticas e farmacológicas. Uma alternativa recente para simular a pele, de forma mais precisa, é por meio da criação de microambientes que mimetizem a superfície ondulada apresentada por esse órgão. Existem poucos trabalhos com essa abordagem disponíveis na literatura, e uma forma mais simples e rápida de produção desses microambientes que garantam a exploração de diversos estudos celulares se faz necessária. Com esse enfoque, foi desenvolvido por nosso grupo de pesquisa um micromolde impresso em 3D que permite moldar o colágeno criando uma topografia que mimetiza a interface derme-epiderme. Até então não tinham sido realizadas a caracterização desta topografia, a seleção de hidrogéis potenciais para mimetizar a matriz extracelular, nem o cultivo celular por um período de tempo expressivo. Nesse contexto, este trabalho tem como objetivo contribuir no processo de mimetização da pele humana. Para tanto, as propriedades mecânicas da matriz extracelular foram avaliadas após o acréscimo de glicosaminoglicanos, ácido hialurônico e sulfato de condroitina, ao gel de colágeno. O gel contendo apenas colágeno apresentou características mais próximas às da derme in vivo e foi utilizado como plataforma para o crescimento celular. Os fibroblastos foram incorporados ao colágeno e sobre esse sistema foi inserido o micromolde para transferência da topografia. Mimetizando a estrutura do tecido nativo os queratinócitos foram adicionados sobre a topografia formada. O comportamento de ambas as células, típicas da pele, foi observado após 8 dias de cultura. Ambas apresentavam morfologia de células saudáveis, núcleos inteiros e aderência, indicando o êxito do processo de micromoldagem. Também foi avaliado que, após esse período, a topografia recriada no gel de colágeno se manteve fiel às dimensões projetadas. Em seguida, para otimização do processo de micromoldagem, foi projetado e construído um sistema amplificado que permitiu maior eficiência na criação de topografias e a análise de várias matrizes simultaneamente. Este projeto contribuirá para o desenvolvimento de modelos in vitro de pele que poderão agilizar a avaliação de novos fármacos com aplicação dérmicaAbstract: The search for new drugs and cosmetics and methods that accelerate their biological evaluation are important requirements for the advancement of medicine. Thus, in vitro skin models have been researched to obtain reliable data on human cell behavior and a significant reduction in the use of animals for research purposes in cosmetic and pharmacological analyses. A recent alternative to simulate the skin, more precisely, is through the creation of microenvironments that recapitulate the wavy surface presented by this organ. There are few words with this approach available in the literature, and a simpler and faster way of producing these microenvironments that guarantee the exploration of several cellular studies is needed. With this approach, our research group developed a 3D printed micro mold that allows the collagen to be molded creating a topography that mimics the dermis-epidermis interface. However, the characterization of this topography, the selection of potential hydrogels to mimic the extracellular matrix, nor the cell culture for an expressive time were not carried out. In this context, this work aims to contribute to the process of mimicking human skin. Therefore, the mechanical properties of the extracellular matrix were evaluated after adding glycosaminoglycans, hyaluronic acid, and chondroitin sulfate to the collagen gel. The gel containing only collagen showed characteristics closer to those of the dermis in vivo and was used as a platform for cell growth. The fibroblasts were incorporated into the collagen and the micro mold for topography transfer was inserted over this system. Mimicking the structure of the native tissue, keratinocytes were added over the formed topography. The behavior of both cells, typical of the skin, was observed after 8 days of culture. Both had healthy cell morphology, whole nuclei, and adhesion, indicating the success of the micro-molding process. It was also evaluated that, after this period, the topography recreated in the collagen gel remained faithful to the projected dimensions. Then, to optimize the micro molding process, an amplified system was designed and built that allowed greater efficiency in the creation of topographies and the analysis of several matrices simultaneously. This project will contribute to the development of in vitro skin models that will speed up the evaluation of new drugs with the dermal applicationMestradoEngenharia QuímicaMestra em Engenharia QuímicaCAPES88887.337618/2019-00[s.n.]Torre, Lucimara Gaziola de la, 1971-Carvalho, Hernandes Faustino de, 1965-Morales, Ana RitaLancellotti, MarceloUniversidade Estadual de Campinas. Faculdade de Engenharia QuímicaPrograma de Pós-Graduação em Engenharia QuímicaUNIVERSIDADE ESTADUAL DE CAMPINASSilva, Elaine Cristina Batista da, 1994-20212021-12-16T00:00:00Zinfo:eu-repo/semantics/publishedVersioninfo:eu-repo/semantics/masterThesisapplication/pdf1 recurso online (96 p.) : il., digital, arquivo PDF.https://hdl.handle.net/20.500.12733/8885SILVA, Elaine Cristina Batista da. Co-cultivo celular de fibroblastos e queratinócitos em matriz extracelular composta por biomateriais micro moldados por dispositivo 3D. 2021. 1 recurso online (96 p.) 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