Avaliação da cinética viral do Herpesvirus Humano 6 e Citomegalovirus por PCR em tempo real e das complicações clínicas relacionadas ocorridas após o transplante de fígado

Detalhes bibliográficos
Autor(a) principal: Silva, Ana Carolina Guardia da, 1980-
Data de Publicação: 2013
Tipo de documento: Tese
Idioma: por
Título da fonte: Biblioteca Digital de Teses e Dissertações da Universidade Estadual de Campinas (UNICAMP)
Texto Completo: https://hdl.handle.net/20.500.12733/1621883
Resumo: Orientadores: Ilka de Fatima Santana Ferreira Boin, Raquel Silveira Bello Stucchi
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spelling Avaliação da cinética viral do Herpesvirus Humano 6 e Citomegalovirus por PCR em tempo real e das complicações clínicas relacionadas ocorridas após o transplante de fígadoEvaluation of viral kinetics of Human Herpesvirus 6 and Cytomegalovirus by real time PCR and related clinical complications occuring after liver transplantationHerpesvirus humanoCitomegalovírusFígado - TransplanteHuman herpesvirusCytomegalovirusLiver transplantOrientadores: Ilka de Fatima Santana Ferreira Boin, Raquel Silveira Bello StucchiTese (doutorador) - Universidade Estadual de Campinas, Faculdade de Ciências MédicasResumo: Introdução: As infecções oportunistas constituem um dos principais problemas para os transplantados de fígado. O Citomegalovírus (CMV) e o Herpesvirus humano 6 (HHV- 6) são patógenos oportunistas freqüentes nesses pacientes, e o HHV-6 tem sido associado a várias desordens tais como a encefalite. A PCR em tempo real (RT-PCR) é o padrão ouro de diagnóstico para os herpesvirus, pois tem melhor precisão, maior rendimento e menos risco de contaminação em comparação com outros testes convencionais. Objetivo: Este estudo teve como objetivo avaliar a cinética viral do HHV-6 e CMV por RT-PCR nos pacientes submetidos ao transplante hepático correlacionando-a com a presença de encefalite e complicações clínicas ocorridas no período pós-transplante. Método: Foram analisadas prospectivamente pela RT- PCR a carga viral do CMV e HHV-6 de 30 pacientes transplantados de fígado. A monitorização dos pacientes foi realizada prospectivamente desde o pré-transplante (imediatamente antes do ato cirúrgico - dia zero) com amostras do doador e receptor, e no pós-transplante: 2ª, 3ª, 4ª, 6ª, 8ª, 10ª e 12ª semanas, somando 270 amostras de soro. O protocolo foi seguido de acordo com os requerimentos para pesquisas e foi aprovado pelo Comitê de Ética em Pesquisada da Faculdade de Ciências Médicas da Universidade Estadual de Campinas (CEP nº 430/2003). Os achados clínicos foram obtidos através dos prontuários. Para a detecção e quantificação do DNA dos vírus CMV e HHV-6 foram usados os Kits comerciais "CMV Real-TM Quant" e "HHV-6 Real-TM Quant". Os testes de Nested-PCR e antigenemia foram realizados rotineiramente para o vírus CMV, pelos laboratórios do HC-Unicamp, e seu resultados obtidos eletronicamente. A análise estatística comparou as variáveis categóricas usando o teste exato de Fisher. Para identificar os fatores associados ao aumento da carga viral foi utilizado o método das Equações de Estimação Generalizadas e medidas de acurácia. Resultados: Treze (43%) dos 30 pacientes apresentaram infecção pelo HHV-6 e 26 (86%) apresentaram infecção pelo CMV. Nove pacientes apresentaram encefalite após o transplante de fígado sendo que sete deles tiveram infecção pelo HHV-6 (p=0,0012), assim com o aumento da carga viral do HHV-6 se constatou a presença de encefalite após o transplante de fígado (p= 0.0226). O RT- PCR (p= 0,0306) para o CMV mostrou aumento significativo na segunda a quarta semana e décima a décima segunda semanas em relação aos outros testes, mostrando-se também mais sensível. Conclusão: concluímos que o aumento da carga viral do HHV-6 foi associado com a presença de encefalite após o transplante de fígado e a técnica de PCR em tempo real se mostrou como o teste mais sensível para detecção e monitorização do CMV nos pacientes transplantados de fígadoAbstract: Introduction: Opportunistic infections are a major problem for liver transplantation patients. Cytomegalovirus (CMV) and human herpesvirus 6 (HHV-6) are opportunistic common pathogens and HHV-6 has been associated with several disorders such as encephalitis. Real-time PCR (RT-PCR) is the gold standard for diagnosis of herpesvirus, as it has better accuracy, higher efficiency and less risk of contamination compared to other conventional tests. Objective: The aim of study was to evaluate the viral kinetics of HHV-6 and CMV by RT-PCR in patients undergoing liver transplantation and correlated with the presence of encephalitis complications occurring in the post-transplant period. Methods: We prospectively analyzed by RT-PCR the viral load of CMV and HHV-6 in 30 liver transplant patients. Monitoring of patients was performed prospectively from pretransplant (immediately before surgery-day zero) with donor and recipient samples and posttransplant: 2nd, 3rd, 4th, 6th, 8th, 10th and 12th weeks with a total of 270 serum samples. The protocol was followed according to the requirements for research and was approved by the Ethics Research Committee of the Faculty of Medical Sciences State University of Campinas (CEP nº 430/2003). The clinical findings were obtained from the medical records. For detection and quantification of DNA of the CMV and HHV-6 virus the commercial kits "Real- CMV Quant TM" and "HHV-6 Real -TM Quant" were used. Nested-PCR and antigenemia tests were performed routinely for CMV virus and their results obtained electronically. Statistical analysis comparing categorical variables was applied using Fisher exact test. To identify associated factors with increased viral load the method of Generalized Estimation Equation (GEE) and the accuracy and precision was used. Results: Thirteen (43 %) of the thirty patients had HHV-6; 26 (86 %) had CMV infection. Nine patients had encephalitis after liver transplantation and seven of them had HHV-6 (p = 0.0012) and with an increasing viral load of HHV-6 the presence of encephalitis after liver transplantation was found (p = 0.0226). RT-PCR (P = 0.0306 ) CMV showed a significant increase at the 2nd to 4th week and 10th to 12th week compared to the other tests, having also more sensibility. Conclusion: We concluded that the increase in viral load of HHV-6 was associated with the presence of encephalitis after liver transplantation and the technique of real-time PCR was shown to be the best sensibility test for the detection and monitoring of CMV in our liver transplant patientDoutoradoFisiopatologia CirúrgicaDoutora em Ciências da Cirurgia[s.n.]Boin, Ilka de Fatima Santana Ferreira, 1953-Stucchi, Raquel Silveira Bello, 1958-Figueira, Estela Regina RamosSilva, Renato Ferreira daAlmeida, Jazon Romilson de SouzaAtaide, Elaine Cristina deUniversidade Estadual de Campinas (UNICAMP). Faculdade de Ciências MédicasPrograma de Pós-Graduação em Ciências da CirurgiaUNIVERSIDADE ESTADUAL DE CAMPINASSilva, Ana Carolina Guardia da, 1980-20132013-12-13T00:00:00Zinfo:eu-repo/semantics/publishedVersioninfo:eu-repo/semantics/doctoralThesisapplication/pdf136 p. : il.https://hdl.handle.net/20.500.12733/1621883SILVA, Ana Carolina Guardia da. Avaliação da cinética viral do Herpesvirus Humano 6 e Citomegalovirus por PCR em tempo real e das complicações clínicas relacionadas ocorridas após o transplante de fígado. 2013. 136 p. Tese (doutorador) - Universidade Estadual de Campinas, Faculdade de Ciências Médicas, Campinas, SP. Disponível em: https://hdl.handle.net/20.500.12733/1621883. 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