Estudo da atividade inflamatoria e apoptose em reservatorios ileais de doentes operados por polipose adenomatosa familiar e retocolite ulcerativa inespecifica

Detalhes bibliográficos
Autor(a) principal: Leal, Raquel Franco, 1977-
Data de Publicação: 2009
Tipo de documento: Tese
Idioma: por
Título da fonte: Biblioteca Digital de Teses e Dissertações da Universidade Estadual de Campinas (UNICAMP)
Texto Completo: https://hdl.handle.net/20.500.12733/1608512
Resumo: Orientadores: Claudio Saddy Rodrigues Coy, Licio Augusto Velloso
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spelling Estudo da atividade inflamatoria e apoptose em reservatorios ileais de doentes operados por polipose adenomatosa familiar e retocolite ulcerativa inespecificaInflammatory and apoptosis pathway in ileal pouches of patients with ulcerative colitis and familial adenomatous polyposisCirurgiaBiologia molecularIntestino - DoençasSurgeryMolecular biologyIntestinal diseaseOrientadores: Claudio Saddy Rodrigues Coy, Licio Augusto VellosoTese (doutorado) - Universidade Estadual de Campinas, Faculdade de Ciencias MedicasResumo: A retocolectomia total com anastomose do reservatório ileal ao canal anal é a cirurgia de escolha para doentes com retocolite ulcerativa inespecífica (RCUI) refratária ao tratamento clínico e para polipose adenomatosa familiar (PAF), com pólipos retais. A ileíte do reservatório é uma das complicações mais comuns, sendo freqüente nos doentes com RCUI, porém rara na PAF. Objetivo: Avaliar a atividade inflamatória e apoptótica em mucosa de reservatórios ileais endoscopicamente normais pela expressão de IFN-?, STAT-1, IL-10, SOCS-3, Bax, Bcl-2, FADD/Caspase-8 e Apaf-1/Caspase-9 em RCUI e PAF operados. Casuística e Métodos: Estudou-se 18 doentes submetidos à cirurgia com reservatório ileal (RI) em "J", sendo nove doentes com RCUI e nove com PAF. O grupo controle foi constituído por nove doentes com íleo-colonoscopia normal. As biópsias foram congeladas em nitrogênio líquido e as expressões de IFN-?, STAT-1, IL-10, SOCS-3, Bax e Bcl-2 foram avaliadas por meio de imunoblot de extrato protéico total. As expressões de FADD/Caspase-8 e Apaf-1/Caspase-9 foram determinadas por meio de ensaio de imunoprecipitação e imunoblot. Utilizou-se imunoistoquímica para Bax e Bcl-2 e imunofluorescência com Anexina V. Resultados: Expressão de STAT-1 foi maior em RCUI, quando comparada com PAF e controles (p<0.05). A expressão de IFN-? foi maior em RCUI quando comparada aos controles (p<0.05). Expressões de IL-10, SOCS-3 e Bcl-2 foram semelhantes em todos os grupos (p>0.05). Expressão de Apaf-1/Caspase-9 foi maior em RCUI comparada à PAF (p<0.05), entretanto FADD/Caspase-8 foi similar entre os grupos (p>0.05). Conclusão: Os doentes com RCUI apresentaram maiores níveis das citocinas pró-inflamatórias na mucosa do RI, sendo estas semelhantes àquelas presentes em mucosa colorretal de RCUI ativa, mesmo na ausência de sinais clínicos e endoscópicos de ileíte do reservatório. Além disso, houve expressão aumentada de proteínas pró-apoptóticas no Grupo RCUI, podendo justificar a maior susceptibilidade dos doentes operados por RCUI a esta complicação. Demonstrou-se também, alteração dos mecanismos de apoptose em PAF, que poderia explicar a diminuição da renovação celular e presuntivamente, o aparecimento de adenomas nesta síndrome.Abstract: Ileal pouch-anal anastomosis is the surgical procedure of choice for patients with refractory ulcerative colitis (UC) and for familial adenomatous polyposis (FAP) with rectal polyps. Pouchitis is the most common complication in UC, while it is quite rare in FAP. Objective: Evaluate the inflammatory and apoptotic activity in endoscopically normal ileal pouch mucosa, by determining the expressions of IFN-?, STAT-1, IL-10, SOCS-3, Bax, Bcl-2, FADD/Caspase-8 and Apaf-1/Caspase-9 in operated patients with UC and FAP. Patients and Methods: Eighteen patients submitted to total retocolectomy and J pouch were evaluated; nine were patients with UC and nine with FAP. The control group consisted of nine individuals with normal ileo-colonoscopy examination. The collected specimens were snap-frozen in liquid nitrogen and expressions of IFN-?, STAT-1, IL-10, SOCS-3, Bax and Bcl-2 were determined by immunoblot of total protein extracts. FADD/Caspase-8 and Apaf-1/Caspase-9 were evaluated by immunoprecipitation and immunoblot. Immunohistochemistry analysis for Bax and Bcl-2, and immunofluorescence with Annexin V assays were applied in all biopsies. Results: STAT-1 expression was increased in patients with UC, when compared with FAP and controls (p<0.05). IFN-? expression was increased in UC when compared with controls (p<0.05). IL-10, SOCS-3 and Bcl-2 were similar among the groups (p>0.05). Apaf-1/Caspase-9 expression was increased in UC when compared with FAP (p<0.05); however FADD/Caspase-8 was similar in the groups (p>0.05). Conclusion: Patients with UC had increased pro-inflammatory cytokines levels, even without clinical and endoscopic evidence of pouchitis; these alterations were similar to those of UC disease. Indeed, there was increased pro-apoptotic protein expression in UC. These findings may suggest a higher susceptibility to this complication in operated patients with UC, when it was compared to PAF. In addition, a down-regulation of apoptosis in FAP was observed, possibly explaining the decreased cell turn over and presence of adenomas in this syndrome.DoutoradoCirurgiaDoutor em Cirurgia[s.n.]Coy, Claudio Saddy Rodrigues, 1961-Velloso, Licio Augusto, 1963-Habr-Gama, AngelitaMatos, DelcioAndreollo, Nelson AdamiBustorff-Silva, Joaquim MurrayUniversidade Estadual de Campinas (UNICAMP). Faculdade de Ciências MédicasPrograma de Pós-Graduação em CirurgiaUNIVERSIDADE ESTADUAL DE CAMPINASLeal, Raquel Franco, 1977-2009info:eu-repo/semantics/publishedVersioninfo:eu-repo/semantics/doctoralThesisapplication/pdf100 f. : il.https://hdl.handle.net/20.500.12733/1608512LEAL, Raquel Franco. Estudo da atividade inflamatoria e apoptose em reservatorios ileais de doentes operados por polipose adenomatosa familiar e retocolite ulcerativa inespecifica. 2009. 100 f. Tese (doutorado) - Universidade Estadual de Campinas, Faculdade de Ciencias Medicas, Campinas, SP. Disponível em: https://hdl.handle.net/20.500.12733/1608512. Acesso em: 2 set. 2024.https://repositorio.unicamp.br/acervo/detalhe/436428porreponame:Biblioteca Digital de Teses e Dissertações da Universidade Estadual de Campinas (UNICAMP)instname:Universidade Estadual de Campinas (UNICAMP)instacron:UNICAMPinfo:eu-repo/semantics/openAccess2017-06-07T09:59:12Zoai::436428Biblioteca Digital de Teses e DissertaçõesPUBhttp://repositorio.unicamp.br/oai/tese/oai.aspsbubd@unicamp.bropendoar:2017-06-07T09:59:12Biblioteca Digital de Teses e Dissertações da Universidade Estadual de Campinas (UNICAMP) - Universidade Estadual de Campinas (UNICAMP)false
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