Otimização do protocolo de liofilização para coleções de culturas microbianas

Detalhes bibliográficos
Autor(a) principal: Antonio, Ingrid Capuano, 1993-
Data de Publicação: 2020
Tipo de documento: Dissertação
Idioma: por
Título da fonte: Biblioteca Digital de Teses e Dissertações da Universidade Estadual de Campinas (UNICAMP)
Texto Completo: https://hdl.handle.net/20.500.12733/1639285
Resumo: Orientador: Derlene Attili de Angelis
id UNICAMP-30_f4ca12a4aaadbd90cef7b8cc71df1fc2
oai_identifier_str oai::1129317
network_acronym_str UNICAMP-30
network_name_str Biblioteca Digital de Teses e Dissertações da Universidade Estadual de Campinas (UNICAMP)
repository_id_str
spelling Otimização do protocolo de liofilização para coleções de culturas microbianasOptimization of the freeze drying protocol for collections of microbial culturesMicro-organismos - Coleção e preservaçãoLiofilizaçãoDelineamento experimentalMicroorganisms - Collection and preservationFreeze dryingExperimental designOrientador: Derlene Attili de AngelisDissertação (mestrado) - Universidade Estadual de Campinas, Instituto de BiologiaResumo: A utilização de recursos microbianos em setores da indústria vem crescendo devido à versatilidade de suas aplicações, que podem variar desde a produção de alimentos até a geração de produtos de alto valor agregado. Linhagens biotecnologicamente promissoras e de referência, geralmente encontram-se depositadas em coleções de culturas reconhecidas, as quais constituem instituições responsáveis por catalogar, autenticar, preservar e distribuir este material de forma assegurada. Dentre as técnicas empregadas pelas coleções microbianas, a liofilização é considerada uma das mais bem difundidas internacionalmente pelas vantagens que oferece, apesar de se tratar de um método nada elementar, que envolve muitas variáveis. A Coleção Brasileira de Micro-organismos de Ambiente e Indústria ¿ CBMAI/UNICAMP comtempla o serviço de liofilização no seu escopo, utilizando um equipamento alemão (Christ Gamma 2-16 LSC). A fim de reduzir o tempo do processo para acompanhar sua intensa demanda de trabalho, a CBMAI tomou a iniciativa de otimizar o protocolo de sua rotina. O presente estudo visou atender essa necessidade, com base no desenvolvimento de um delineamento experimental fracionado 2 4-1 + 3P.C. A partir de parâmetros do protocolo padrão (com 38h40 min. de duração) o delineamento gerou onze ensaios que foram testados selecionando linhagens com metabolismos distintos dentro dos principais grupos: fungos filamentosos, leveduras e bactérias. Os ensaios mais bem-sucedidos foram os de número: 3 (18h05 minutos de duração), 4 (8h05 minutos de duração) e 8 (19h05 minutos de duração), capazes de reduzir a duração do processo em mais de 50% e mantendo a viabilidade celular. Os testes de validação (repetição dos ensaios classificados como satisfatórios) comprovaram a reprodutibilidade dos ensaios selecionados. As características macro e microscópicas foram analisadas após preservação. A liofilização é considerada uma técnica de conservação de longo tempo. Nesse estudo, uma reativação das amostras foi realizada após seis meses de estocagem e os resultados mostraram que não houve alterações significativas nos ciclos logarítmicos das contagens realizadas (UFCs) e nem em relação às características macro e microscópicas das culturas. As autenticações ao nível molecular asseguraram a pureza e a confiabilidade da identidade das linhagens utilizadas. Com base nos resultados obtidos deste estudo, pode-se concluir que a liofilização é passível de otimizações desde que realizadas com o embasamento de técnicas estatísticas como o delineamento experimental, capazes de compreender e avaliar todas as variáveis do processo. Os protocolos propostos servirão de orientação para outros laboratórios que utilizem um equipamento similarAbstract: The use of microbial resources in sectors of the industry has been growing due to the versatility of their applications, which may vary from the food production to the generation of products with high added value. Biotechnologically promising and reference strains are generally deposited in recognized cultures collections, which constitute institutions responsible for cataloging, authenticating, preserving and distributing this material, in a confident way. Among the techniques used by microbial collections, the lyophilization is considered one of the most internationally spread, due to the advantages it offers, although it is a non-elementary method with many variables. The Brazilian Collection of Environmental and Industry Microorganisms - CBMAI / UNICAMP offers the freeze-drying service using a German equipment (Christ Gamma 2-16 LSC). In order to reduce the time of the process and keep up with its intense working demand, CBMAI searched for the optimization of its routine protocol. The present study aimed to meet this need, based on the development of a fractional experimental design 2 4-1 + 3P.C. From parameters of the standard protocol (38:40 long) the design generated eleven tests that were tested by using selected strains with distinct metabolisms within the main groups: filamentous fungi, yeasts and bacteria. The most successful trials were numbers: 3 (18:05 long), 4 (08:05 long) and 8 (19:05 long), capable of reducing the process time by more than 50% and maintaining cell viability. The validation tests (repetition of the tests classified as satisfactory) proved the reproducibility of the selected assays. Macro and microscopic characteristics were analyzed after preservation. Lyophilization is considered a long-term conservation technique. In this study, samples were reactivated after six months of storage. The results showed that there were no significant changes in the logarithmic cycles of the counts performed (CFUs) or in relation to the macro and microscopic characteristics of the cultures. Authentications at molecular level ensured the purity and reliability of the identity of the studied strains. Based on the results obtained from this study, it can be concluded that lyophilization is subject to optimizations as long as carried out on the basis of statistical techniques such as the experimental design, able to understand and evaluate all process variables. The proposed protocols will serve as guidance for other laboratories that use similarMestradoFármacos, Medicamentos e Insumos para SaúdeMestra em CiênciasCAPES001[s.n.]Angelis, Derlene Attili de, 1963-Barbosa, Milene GomesRodrigues, AndréUniversidade Estadual de Campinas (UNICAMP). Instituto de BiologiaPrograma de Pós-Graduação em Biociências e Tecnologia de Produtos BioativosUNIVERSIDADE ESTADUAL DE CAMPINASAntonio, Ingrid Capuano, 1993-20202020-04-28T00:00:00Zinfo:eu-repo/semantics/publishedVersioninfo:eu-repo/semantics/masterThesisapplication/pdf1 recurso online (72 p.) : il., digital, arquivo PDF.https://hdl.handle.net/20.500.12733/1639285ANTONIO, Ingrid Capuano. Otimização do protocolo de liofilização para coleções de culturas microbianas. 2020. 1 recurso online (72 p.) Dissertação (mestrado) - Universidade Estadual de Campinas, Instituto de Biologia, Campinas, SP. Disponível em: https://hdl.handle.net/20.500.12733/1639285. Acesso em: 3 set. 2024.https://repositorio.unicamp.br/acervo/detalhe/1129317Requisitos do sistema: Software para leitura de arquivo em PDFporreponame:Biblioteca Digital de Teses e Dissertações da Universidade Estadual de Campinas (UNICAMP)instname:Universidade Estadual de Campinas (UNICAMP)instacron:UNICAMPinfo:eu-repo/semantics/openAccess2020-07-17T11:07:18Zoai::1129317Biblioteca Digital de Teses e DissertaçõesPUBhttp://repositorio.unicamp.br/oai/tese/oai.aspsbubd@unicamp.bropendoar:2020-07-17T11:07:18Biblioteca Digital de Teses e Dissertações da Universidade Estadual de Campinas (UNICAMP) - Universidade Estadual de Campinas (UNICAMP)false
dc.title.none.fl_str_mv Otimização do protocolo de liofilização para coleções de culturas microbianas
Optimization of the freeze drying protocol for collections of microbial cultures
title Otimização do protocolo de liofilização para coleções de culturas microbianas
spellingShingle Otimização do protocolo de liofilização para coleções de culturas microbianas
Antonio, Ingrid Capuano, 1993-
Micro-organismos - Coleção e preservação
Liofilização
Delineamento experimental
Microorganisms - Collection and preservation
Freeze drying
Experimental design
title_short Otimização do protocolo de liofilização para coleções de culturas microbianas
title_full Otimização do protocolo de liofilização para coleções de culturas microbianas
title_fullStr Otimização do protocolo de liofilização para coleções de culturas microbianas
title_full_unstemmed Otimização do protocolo de liofilização para coleções de culturas microbianas
title_sort Otimização do protocolo de liofilização para coleções de culturas microbianas
author Antonio, Ingrid Capuano, 1993-
author_facet Antonio, Ingrid Capuano, 1993-
author_role author
dc.contributor.none.fl_str_mv Angelis, Derlene Attili de, 1963-
Barbosa, Milene Gomes
Rodrigues, André
Universidade Estadual de Campinas (UNICAMP). Instituto de Biologia
Programa de Pós-Graduação em Biociências e Tecnologia de Produtos Bioativos
UNIVERSIDADE ESTADUAL DE CAMPINAS
dc.contributor.author.fl_str_mv Antonio, Ingrid Capuano, 1993-
dc.subject.por.fl_str_mv Micro-organismos - Coleção e preservação
Liofilização
Delineamento experimental
Microorganisms - Collection and preservation
Freeze drying
Experimental design
topic Micro-organismos - Coleção e preservação
Liofilização
Delineamento experimental
Microorganisms - Collection and preservation
Freeze drying
Experimental design
description Orientador: Derlene Attili de Angelis
publishDate 2020
dc.date.none.fl_str_mv 2020
2020-04-28T00:00:00Z
dc.type.status.fl_str_mv info:eu-repo/semantics/publishedVersion
dc.type.driver.fl_str_mv info:eu-repo/semantics/masterThesis
format masterThesis
status_str publishedVersion
dc.identifier.uri.fl_str_mv https://hdl.handle.net/20.500.12733/1639285
ANTONIO, Ingrid Capuano. Otimização do protocolo de liofilização para coleções de culturas microbianas. 2020. 1 recurso online (72 p.) Dissertação (mestrado) - Universidade Estadual de Campinas, Instituto de Biologia, Campinas, SP. Disponível em: https://hdl.handle.net/20.500.12733/1639285. Acesso em: 3 set. 2024.
url https://hdl.handle.net/20.500.12733/1639285
identifier_str_mv ANTONIO, Ingrid Capuano. Otimização do protocolo de liofilização para coleções de culturas microbianas. 2020. 1 recurso online (72 p.) Dissertação (mestrado) - Universidade Estadual de Campinas, Instituto de Biologia, Campinas, SP. Disponível em: https://hdl.handle.net/20.500.12733/1639285. Acesso em: 3 set. 2024.
dc.language.iso.fl_str_mv por
language por
dc.relation.none.fl_str_mv https://repositorio.unicamp.br/acervo/detalhe/1129317
Requisitos do sistema: Software para leitura de arquivo em PDF
dc.rights.driver.fl_str_mv info:eu-repo/semantics/openAccess
eu_rights_str_mv openAccess
dc.format.none.fl_str_mv application/pdf
1 recurso online (72 p.) : il., digital, arquivo PDF.
dc.publisher.none.fl_str_mv [s.n.]
publisher.none.fl_str_mv [s.n.]
dc.source.none.fl_str_mv reponame:Biblioteca Digital de Teses e Dissertações da Universidade Estadual de Campinas (UNICAMP)
instname:Universidade Estadual de Campinas (UNICAMP)
instacron:UNICAMP
instname_str Universidade Estadual de Campinas (UNICAMP)
instacron_str UNICAMP
institution UNICAMP
reponame_str Biblioteca Digital de Teses e Dissertações da Universidade Estadual de Campinas (UNICAMP)
collection Biblioteca Digital de Teses e Dissertações da Universidade Estadual de Campinas (UNICAMP)
repository.name.fl_str_mv Biblioteca Digital de Teses e Dissertações da Universidade Estadual de Campinas (UNICAMP) - Universidade Estadual de Campinas (UNICAMP)
repository.mail.fl_str_mv sbubd@unicamp.br
_version_ 1809189162593550336

Registros relacionados